6.13 5%红细胞悬液的配制：用生理盐水洗涤红细胞3次。 根据下表进行红细胞悬液的配制
悬液浓度（%） 压积红细胞（滴） 盐水（滴） 2 1 2ml(40) 5 1 0.8ml(16)
7、操作性能概要
7.1正反定型结果不一致的原因： 7.1.1 原因：
有技术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种： 7.1.1.1 分型血清效价太低、亲和力不强。如抗—A血清效价不高，可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。
7.1.1.2 红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显，误判为阴性反应。
7.1.1.3 受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于白血病或恶性肿瘤：以及类B或cisAB等。
7.1.1.4 受检者血清中蛋白紊乱(高球蛋白血症)，或实验时温度过高，常引起红细胞呈缗钱状排列。
7.1.1.5 受检者血清中缺乏应有的抗-A 及或抗—B 抗体，如丙种球蛋白缺乏症。
7.1.1.6 各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集。部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体.
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7.1.1.7 由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。
7.1.1.8 血清中有意外抗体，如自身抗—I，常引起干扰。 7.1.1.9 老年人血清中抗体水平大幅度下降正反定型结果不一致的解决办法如发现ABO正反定型结果不一致，先要重复作试验1次。严格执行操作规程，使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果，就可解决明显的问题，对一些疑难问题月必须进一步研究。 7.1.2 检查步骤：
7.1.2.1 另从受检者采取 l 份新鲜血液标本这样可以纠正因污染或搞错样本造成的不符合。
7.1.2.2 将红细胞洗涤数次，配成5％生理盐水细胞悬液，用抗—A、
抗—B、抗—Al，抗—A十B及抗H做试验可以得到其它有用的信息。 7.1.2.3 对受检红细胞作直接抗球蛋白试验，如结果呈阳性，表示红细胞已被抗体致敏。
7.1.2.4 用 A1、A2、B、O 红细胞及自身红细胞检查受检血清。如果怀疑是抗—I，用O型(或ABO相合的)脐血红细胞检查。 7.1.2.5 如果试验结果未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和4℃放置30min，用显微镜检查核实。
7.1.2.6 如疑为 A 抗原或 B 抗原减弱，则可将受检红细胞与抗—A 或抗—B 血清作吸收及放散试验以及受检者唾液作 A、B、H 血型物质测定。后者只对 80％HAB分泌型的人有用。
7.1.2.7 如试验结果红细胞呈绢钱状排列，加等渗盐水l滴，混和，往
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往可使绢钱现象消失。应注意不应先加盐水 l 滴于受检者血清中而后和红细胞作试验，以免使血清中抗体被稀释。 7.1.2.8 如受检者为A型血而疑为有类B抗原时，可用下列方法进行鉴别：
7.1.2.8.1 观察细胞与抗—A及抗—B的凝集强度，与抗—A的反应要比与抗—B的反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。 7.1.2.8.2 用受检者红细胞与自身血清作试验，血清中的抗—B不凝集自身红细胞上的类B抗原。
7.1.2.8.3 检查唾液中是否有A、B物质，如果是分泌型，可检出A物质而无B物质。
7.1.2.8.4 核对患者的诊断，类B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴性杆菌感染有关。
7.1.2.9 如发现多凝集现象，应考虑由遗传产生的Cad抗原活性；被细菌酶激活的T或TK受体；或产生机制不太明了的Tn受体所引起。多凝集红细胞具有以下特点：
7.1.2.9.1 能被人和许多家兔的血清凝集。
7.1.2.9.2 能与大多数成年人的血清凝集，不管有无相应的同种抗体。 7.1.2.9.3 不被脐带血清凝集。 7.1.2.9.4 通常不与自身的血清凝集。 8、临床意义
用于检验人的ABO血型归属。 9、参考文献
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全国临床检验操作规程（第3版）
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Rh（D）血型鉴定
1、实验原理
红细胞与抗D抗体发生凝集反应表明该细胞有D抗原，反之，无凝集现象表明试验的红细胞缺少正常强度的D抗原。 2、标本收集和制备
无菌操作收集血液标本,收集后尽可能立即进行实验。如果不能立即实验,应将样品贮存于 2-8C。收集在 ACD、CPD、CPD－2A 液中的血液标本,不超过 21天仍可进行实验，但是加EDTA、肝素和凝集的血液标本，实验应在2天内进行。
3、仪器、试剂、校准品、质控品、培养基、以及其他所需物品： Rh(IgM)血型定型试剂（单克隆抗体）： 4、操作步骤 4.1 玻片法：
4.1.1 干净玻片上加1滴抗D。
4.1.2 再加入1滴40%-50%的被检红细胞悬液。该红细胞悬液可以是盐水悬液，也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞。 4.1.3 在圆形的玻片区域中混匀，前后缓慢摇晃玻片。2分钟左右肉眼判读结果。不要将试剂的干燥与凝集相混淆。 4.1.4 如果是阴性，需要试管法重做一遍实验。 4.2 盐水试管法
4.2.1 加一滴抗D试剂于预先标记好的试管中
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输血科管理制度、程序性文件、SOP_文件
