展已经相当成熟,近年来在进展期胃癌根治术中,剥离横结肠系膜前叶和胰腺被膜己逐渐成为常规,并有学者提出了胃全系膜切除和胃癌根治术中网膜囊完整切除的概念,以求达到根治。胃全系膜切除术是指完整切除胃腹侧、背侧系膜内所有的组织结构,包括胃及其血管和淋巴脂肪组织。网膜囊完整切除是指将网膜囊的后壁与前壁及胃(包括周围淋巴脂肪组织)]。但胃周系膜内是否存胃癌微转移灶分析腹膜微转移与胃癌大小、侵透膜与否、肿瘤分期、淋巴结转移等临床因素的关系,探讨胃癌腹膜微转发生的因素和微转移的规律,为手术方式选择、判断预后及建立个体化的术后治疗方案提供更可靠的依据。 鉴于胃癌行淋巴结清扫一直缺乏较为可靠的理论依据,且剥离操作易进入错误分离层面,造成出血、系膜剥离不全、术后淋巴漏、胰漏等,故对于进展期胃癌是否应该行此术式值得探讨。胃周围系膜表面上无关联,但在胚胎解剖学上具有高度的组织同源性。在胚胎时期,胃腹侧系膜在前肠旋转中形成小网膜,胃背侧系膜的前后两层则广泛覆盖胃、脾、胰腺,衍化成为大网膜、胃脾韧带、胰腺被膜等。在胚胎时期前肠旋转中,胃周围系膜与系膜、系膜与脏器和后腹壁相互靠近并贴在一起发生融合,形成潜在的,分布广泛的,充满淋巴组织和疏松结缔组织的间隙[}l,容许恶性病变沿其扩散、蔓延。胃癌细胞比较容易通过脱落种植,淋巴转移等途径扩散到胃周系膜组织内。 如果能在在胃癌根治术中对多处腹膜组织进行活检,行免疫组化染色,检测CK20,并与常规HE染色及PLC检查结果相比较。结果表明,虽然常规HE染色检查并不能发现,实际上横结肠系膜前叶、胰腺被膜和胰腺上方的网膜囊后壁等处组织内确实已存在微转移灶,并且微转移发生概率与肿瘤大小、侵透浆膜等因素相关。因此对于进展期胃癌,尤其是肿瘤较大、侵透浆膜者,应该剥离横结肠系膜前叶、胰腺被膜和胰腺上方的网膜囊后壁,争取做到网膜囊完整切除,以保证手术的根治性。另外淋巴转移途径在腹膜微转移中占有一定的地位,胃癌根治术中必须严格行D2淋巴结清扫。 三、拟采取的研究方法、技术路线
选取术前影像学检查及手术中探查未发现周围脏器侵犯(如:肝脏、胰腺、横结肠及其系膜等)、远处转移的患者胃癌肿瘤标本。患者术中为减少腹腔游离癌细胞和脱落种植转移,均实行腹腔高温灌洗,术后进行常规病理学检查以及脱落细胞学和腹腔灌洗液检查,腹腔冲洗液细胞学检查采用转速控制在1600转/分的低速离心机,上清液去除,沉渣图片行瑞氏染色,镜下观察。检测到癌细胞即为阳性。并去腹膜组织做HE染色,标本来自横结肠系膜、男性直肠膀胱陷凹(女性为直肠子宫陷凹)以及网膜囊后壁,采用免疫组化的方法(免疫组化染色采用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接(sP)法)检查CK20,与腹腔灌洗液体细胞学检查做对比。CK20阳性者,视为转移,所取不同部位的腹膜组织有一处阳性者即认为发生了腹膜微转移。CK20存在于上皮来源的肿瘤之中,表达于细胞浆,以胞浆染为淡黄色到深棕黄色,染色强度明显高于背景者为阳性。凡无黄色染色且显色强度与背景无明显差别者为阴性(图5)。本试验中若HE染色阴性,而CK20阳性者,即视为该处腹膜组织发生了微转移。同一病人所取的横结肠系膜前叶、网膜囊后壁近胰腺上缘处、直肠膀肤陷凹(直肠子宫陷凹)腹膜组织中有一处或一处以上发生微转移者,视为发生了腹膜微转移。比较免疫组化Ck20腹膜微转移的阳性率与腹腔灌洗液细胞学检查的阳性率。应用SPSS统计软件进行数据分析。是否发生腹膜微转移与肿瘤侵浆膜与否,淋巴结转移等临床资料的分析采用卡方检验。
四、考核指标
预期成果 随着免疫组织学和分子生物学技术的不断进步,胃癌微转移的检测手段也越来越可靠,这将为临床工作中判断预后、选择术式、确定淋巴结清扫范围、术后确立分期及建立个体化的化疗方案提供更可靠的依据,在胃癌的诊治中发挥更加重要的作用。由于大量文献中所表现出来的CK20在胃癌微转移检测中较好的敏感性和特异性,选择CK20作为免疫组化染色的指标CK20的表达率高于PLC的检出率, CK20是检测胃癌腹膜微转移的较好指标,具有较高的灵敏度。鉴于临床所见的胃癌多为进展期胃癌,约50%的患者术后可发生腹膜转移四」。发生腹膜转移的患者对原静脉辅助化疗、新辅助化疗以及放疗等治疗手段均不敏感,生存率偏低。因此及可通过减瘤手术配合腹腔化疗早发现腹膜微转移,早治疗,早预防和阻断腹膜转移的发生显得尤为重要,而对于已发生腹膜转移的患者,,以减少病人的痛苦,改善病人的症状,延长中卫生存时间.存时间。并且有可能为胃癌根治术以及胃癌的综合治疗提供参考依据和价值.