大网格吸附树脂的吸附等温线的制作
一、实验目的和要求
1.通过实验，加深对大网格树脂吸附机理的理解； 2.了解吸附等温线的制作过程和操作方法。
二、实验原理
大网格树脂吸附法是利用树脂表面分子（包括树脂外表面和空隙的内
表面）与生化物质分子间的范德华力作用，将液体中的生化物质吸附到树 脂表面，与大量杂质分离，然后再用适当的溶剂将其洗脱下来。大网格聚 合物吸附树脂是一种应用广泛的吸附剂，它与大网格离子交换树脂的主要 区别在于其内部结构没有可与被交换的离子基团，因此，是利用分子间作 用力进行吸附。
吸附等温线是表征不同物质吸附的特征曲线，表明在一定温度下，树 脂吸附平衡时的吸附量与溶质浓度之间的函数关系，常用Langmui方程和 Freundlich方程来描述，前者是建立在单分子吸附层的基础上的，后者是经 验式。本实验采用Freundlich方程式，它对本实验树脂的吸附行为具有更 好的吻合性。Freundlich方程式如下：
m=K?1n （2—10—1）
等式两边取对数，得到下式：
lgm=lKg?1n （2—10—2） ?lg 式中：m—— 吸附平衡时固相吸附量（mg/g树脂）
?—— 吸附平衡时液相质量浓度（mg/ml）
K和n——常数
由式（2—10—2）可见，lgm与lg?为线性关系，可由实验求出。 本实验以木瓜蛋白酶为实验对象，采用HZ802非极性大网格树脂为吸
附剂，在25℃温度下，制作吸附等温线。
三、实验器材与试剂
（一）器材
水浴恒温振荡器，分光光度计，精密电子天平，25ml具塞试管，15ml试管、比色皿，真空泵，移液枪，烧杯，漏斗，滤纸等。 （二）试剂
大网格吸附树脂，木瓜蛋白酶，95%乙醇，蒸馏水。
四、操作方法
（一）吸附等温线的制作
1.吸附树脂的预处理
新树脂孔内还有合成树脂时残留的致孔剂等杂质，故应预处理除去。 用95%乙醇于烧杯中浸泡树脂，倾去上浮的杂质，反复多次，直到倾 出的液体与蒸馏水混合不产生白色浑浊（澄清）为止。再用蒸馏水洗至 倾出液无乙醇味即可，最后用真空抽滤，成为抽干树脂。
2.配木瓜蛋白酶
称取木瓜蛋白酶1g，溶于50ml蒸馏水，配成约20mg/ml的溶液。
3.精确吸取上述溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml于7只具塞试管 中，加入蒸馏水，均稀释至10ml，配成1、2、4、6、8、10、12mg/ml 的溶液。
4.称取7份抽干吸附树脂各0.5g，小心倒入上述7只具塞试管中，盖上瓶盖， 置于25℃恒温摇床6h左右。
5.达到吸附平衡后取出，滤纸过滤液体到试管中，除去溶液中的树脂，测定 木瓜蛋白酶液相平衡的A值，带入标准曲线求出对应的浓度。
6.用以下求平衡时树脂上的吸附量m（mg/g树脂）：
（?0-?e）xVm=
m0 式中：?0和?e—— 分别为溶液初始质量浓度和平衡质量浓度（mg/ml) V——溶液体积（ml） m0——树脂质量（g） 以液相的平衡质量浓度（mg/ml）为横坐标，树脂的平衡吸附量（mg/g 树脂）为纵坐标，作25℃时的吸附等温线曲线图。
（二）制作木瓜蛋白酶浓度标准曲线
1.精确称取木瓜蛋白酶20mg与烧杯中，加入10ml蒸馏水，配制成2.0mg/ml 的标准溶液
2.吸取上述标准溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml于试管中，分别用蒸馏 水稀释至5ml，然后用石英比色皿，在280nm分光光度计下测吸光值A。 作线性回归，求线性方程和相关系数R。
【注意事项】
1.用分光光度计测量木瓜蛋白酶时，应用石英比色皿（280nm下玻璃比色皿有吸 光值）。
2.木瓜蛋白酶用完后记得放回4℃冰箱。 3.实验数据可用Excel软件分析。 【实验准备】
仪器 数量 试剂 带塞25ml试管 8支 木瓜蛋白酶 普通10ml试管 8支 蒸馏水 漏斗 1个 95%乙醇 滤纸 若干 1ml移液枪（及枪头） 1支 20μl移液枪（及枪头） 1支 小烧杯（100ml或50ml） 1个 石英比色皿 2个 HZ802大网格吸附树脂 10g 布氏漏斗 真空抽滤机 分光光度计 恒温摇床
五、实验结果及分析
1、实验结果
木瓜蛋白酶标准曲线的制作 浓度（mg/ml） A值 0.08 0.037 0.16 0.068 0.24 0.010 0.32 0.135 0.40 0.170 0.48 0.201
大网格吸附树脂的吸附等温线的制作实验报告
