得蛋白质;
终止子:转录在所需地方停下来
将目的基因导入受体细胞
教学环节
将目的基因导入受体细胞
1) 引出转化的概念,并强调转化的最终目的是目的基因在受体细胞维持稳定和表达 2) 讲授:将目的基因导入植物细胞有三种方法,其中最常用的是农杆菌转化法 3) 引导学生看书,质疑:农杆菌有何特点 教师行为
4) 引导学生看插图,概述农杆菌转化法的过程
5) 质疑:将目的基因导入动物细胞中的常用方法及常用的受体细胞
6) 质疑:培育转基因动物时,受体细胞能否采用动物体细胞,为何采用受精卵
7) 引出原核生物的特点,早期基因工程都用原核生物作受体细胞,质疑:目的基因导入微生物细胞采用的方法
8) 讲授:怎样筛选含外源基因的受体细胞,主要是应用标记基因的插入失活特性,向学生展示图,并配以习题
看书并回答:1 农杆菌生活在土壤中,自然条件下能感染双子叶植物和裸子植物
2 农杆菌中Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体DNA上 学生活动
讨论并回答:将目的基因导入Ti质粒→转入农杆菌→含重组Ti质粒的农杆菌→导入植物细胞→植物组织培养→转基因植物
看书并回答:显微注射法,受体细胞是受精卵
思考并回答:动物体细胞没有全能性,受精卵全能性高,并且营养物质丰富
看书并回答:用Ca2+处理制备感受态细胞
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听讲并根据习题理解
目的基因的检测与鉴定
1) 质疑:用什么方法可以知道抗虫棉赋予了植物抗虫特性
2) 质疑:检测与鉴定有何不同,基因工程成功的标志(提示学生应用真核生物中心法则思考)
3) 引出检测分为DNA、mRNA和蛋白质水平。强调检测转基因生物染色体的DNA上是否插入目的基因是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。
4) 指导学生看书,质疑:DNA水平上的检测应用什么方法,探针是什么,如何标记,检测如何操作
5) 根据学生回答,补充探针还可以用地高辛和生物素标记。质疑:DNA分子杂交原理 6) 检测目的基因是否转录mRNA应用方法,依据原理
7) 质疑:用什么方法检测目的基因是否翻译出蛋白质,原理是什么
8)讲授:除上述分子水平上的检测外,还可以应用个体生物学水平的鉴定,如给棉铃虫喂食抗虫棉,看虫子生活状况等
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思考并回答:给棉铃虫喂食抗虫棉,看虫子生活状况;检测抗虫棉染色体DNA上是否插入目的基因
看书并回答:检测是分子水平上的,而鉴定是个体水平上的。成功标志是表达出人类所需蛋白质
思考并回答:方法:DNA分子杂交;
探针:含有目的基因的单链DNA,用放射性同位素标记;
步骤:转基因生物→提取基因组DNA和探针杂交→有杂交带→证明目的基因已插入染色体DNA中
思考并回答:碱基互补配对原则
思考并回答:转基因生物mRNA与DNA探针杂交;原理:碱基互补配对原则
思考并回答:转基因生物→提取蛋白质(用其作抗原)与抗体反应→有杂交带→目的基因已形成蛋白质产品;
原理:抗原—抗体特异性结合
整体水平上归纳总结
教师引导下,学生讨论总结出基因工程的基本操作程序概念图,在整体上把握知识脉络
见图3
7 教学反思
1) 巧妙布置预习作业,化“复杂”为“简约”。由于基因工程内容上的“高”与“新”,处理不好,会提高学习难度,令学生视高科技为畏途,致使教学流于形式。所以在课前以学生较为熟悉的转基因抗虫棉的培育过程案例为预习作业,使学生首先从整体上了解基因工程的四个步骤,起到了突破难点及培养自学能力的目的。 2)巧妙运用插图及多媒体技术,化“抽象”为“形象”。对于基因工程,学生接触得少,只运用文字来教学会感到很抽象。如在讲授如何构建基因文库时,教师会提供一幅非常形象的插图,结合图文提出相应问题,诱导学生思考,从而把学习的注意力从简单的死记硬背引导到分析、批判、创新等有利于学生终身发展的能力上来。【1】
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