v1.0 可编辑可修改 PCR引物设计流程详解
本文目的:复制出IL-4基因片段
一、
查找基因序列
1、 进入NCBI主页,下拉选框选择Nucleotide,在搜索栏输入要查找的目的基因,即IL-4,点击搜索
2 、在搜索结果选择灵长类(Homo sapiens)
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v1.0 可编辑可修改
2、 在灵长类IL-4基因中选择需要的mRNA序列
3、 查看基因的相关信息
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v1.0 可编辑可修改
外显子区域
CDs区域
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v1.0 可编辑可修改 4、 点击FASTA格式,并将序列保存到文档
二、
使用primer premier 设计引物
1、 建立新文件,将所得的序列复制进输入框内
4
v1.0 可编辑可修改
2、 点击搜索按钮,搜索引物
3、 设置引物设计参数(因为在之前查找基因序列的时候获知,外显子区域分别为:1-200、201-248、249-425、426-618,又知在引物设计时引物位置最好跨越一个内含子,PCR产物长度通常为100-150bp,故设定上游引物位置为
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PCR引物流程设计详解
v1.0可编辑可修改PCR引物设计流程详解本文目的:复制出IL-4基因片段一、查找基因序列1、进入NCBI主页,下拉选框选择Nucleotide,在搜索栏输入要查找的目的基因,即IL-4,点击搜索2、在搜索结果选择灵长类(Homosapiens)1
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