PCR引物流程设计详解

v1.0 可编辑可修改 PCR引物设计流程详解

本文目的：复制出IL-4基因片段

一、

查找基因序列

1、 进入NCBI主页，下拉选框选择Nucleotide，在搜索栏输入要查找的目的基因，即IL-4，点击搜索

2 、在搜索结果选择灵长类（Homo sapiens）

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v1.0 可编辑可修改

2、 在灵长类IL-4基因中选择需要的mRNA序列

3、 查看基因的相关信息

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v1.0 可编辑可修改

外显子区域

CDs区域

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v1.0 可编辑可修改 4、 点击FASTA格式，并将序列保存到文档

二、

使用primer premier 设计引物

1、 建立新文件，将所得的序列复制进输入框内

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v1.0 可编辑可修改

2、 点击搜索按钮，搜索引物

3、 设置引物设计参数（因为在之前查找基因序列的时候获知，外显子区域分别为：1-200、201-248、249-425、426-618，又知在引物设计时引物位置最好跨越一个内含子，PCR产物长度通常为100-150bp，故设定上游引物位置为

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