（生物科技行业）第七章微生物的生长繁殖与及其控
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第七章微生物的生长繁殖及其控制
第壹节微生物生长繁殖及其测定 壹、微生物生长繁殖
? 个体生长：原生质总量增加，个体增大 ? 繁殖：个体数目增加
? 群体生长：个体生长＋个体繁殖＋代谢产物增多 二、纯培养的分离方法
? 纯培养：在实验条件下从壹个细胞繁殖得到纯种群体
? 分离原理：稀释样品，使各种细胞分开，再培养，使单个细胞生长繁殖成单
菌落.挑取单菌落，再在平板上加以3－5次划线纯化。 ? 稀释混合倒平板法 ? 涂布法 ? 划线法
? 单细胞挑取法：用显微挑取器 ? 选择培养基分离法 ? 其它分离方法:
产孢菌分离：可先加热，杀死营养细胞，再分离 病原微生物分离：选取敏感组织
细胞数量少样品分离：先富集培养或浓缩样品 三、微生物生长的测定 （壹）测生长量 1直接法：
称重量法：离心沉降物干重
测体积法：离心沉降物体积 2间接法
比浊法：分光光度计，450～650nm波长 生理指标法：含氮量；核酸；好氧量等 （二）计繁殖数
1直接法：计数板计数法（如血球计数板） 2间接法：平板菌落计数法
为活菌计数法
把菌液稀释后，取壹定量混合倒平板或涂布平板，培养后，每壹个活细胞就形成壹个菌落，此即菌落形成单位（colonyformingunit,cfu）。根据每皿上 cfu数推算出样品含活菌数 稀释倒平皿菌落计数法:
第二节微生物的生长规律
壹、同步生长(synchronousgrowth)
使培养基中细菌同时分裂，处于相同的生长阶段叫同步生长。获得同步生长(synchronousgrowth)的方法：诱导法：如芽孢诱导萌发、藻类光照控制
机械选择法 过滤法 离心法
二、单细胞微生物的典型生长曲线
生长曲线（growthcurve）:定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的曲线 单细胞微生物的典型生长曲线：把少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中，在适宜条件下培养，以细胞数目的对数对时间作图所得曲线。根据生长速率不同可分为延滞期、指数生长期、稳定期和衰亡期 单细胞微生物典型生长曲线: （壹）延滞期(lagphase) 1延滞期特点
? 净生长等于零或略有下降 ? 菌体粗大 ? ＲＮＡ含量增加 ? 代谢活力强
? 对不良条件抵抗能力降低 2延滞期出现原因
? 适应新环境；需要合成多种酶，尤其是胞外酶；DNA复制 ? 影响延滞期限长短因素 接种龄 接种量 培养基成分
4生产上：缩短延滞期
能够缩短生产周期，提高设备利用率。 ? 接种对数生长期的菌种，采用最适菌龄 ? 加大接种量。壹般10％
? 用和培养菌种接近的组分的培养基 （二）指数期(对数期)(exponentialphase) 1特点
? 活菌数和总菌数接近 ? 酶系活跃，代谢旺盛
? 生长速率最大，代时（generationtime）最短 ? 细胞的化学组成及形态，生理特性比较壹致 生产上：多利用做该期的细菌种子和科学试验材料 2出现原因
? 细胞适应了新环境，开始大量分裂 ? 营养充足
? pH值EH值等理化条件适宜 ? 有害代谢产物少
（三）稳定期(stationaryphase) 1稳定期特点
? 活菌数保持相对稳定，总菌数达最高水平。 ? 细菌次级代谢物和代谢副产物大量积累 ? 芽孢杆菌这时开始形成芽孢
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