课后·分层训练
(时间:30分钟 满分:100分)
1.(2016·云南师大附中检测)请根据基因工程的有关知识回答下列问题: (1)cDNA文库属于________文库,其构建方法是:用某种生物发育的某个时期的________反转录产生的cDNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中。 (2)切割DNA分子的工具是________,它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的________键断开,从而形成黏性末端或平末端。
(3)基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,其中只能“缝合”黏性末端的是________DNA连接酶;既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端的是________DNA连接酶。
(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用________处理细胞,使之成为感受态细胞。
解析 (1)基因文库包括基因组文库和部分基因文库,cDNA文库属于部分基因文库。(2)限制酶可切割DNA分子,使磷酸二酯键断开。(3)E·coli DNA连接酶只能“缝合”黏性末端。T4DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端。(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用Ca2+处理细胞,使之成为感受态细胞。 答案 (1)部分基因 mRNA (2)限制性核酸内切酶(限制酶) 磷酸二酯 (3)E·coli T4 (4)农杆菌转化法 Ca2+
2.(2016·皖南八校三模)科研小组将大麦的抗旱基因(HVA)导入小麦细胞,并用植物组织培养的方法培育成高抗旱性小麦植株。回答下列问题:
(1)该科研小组采用________技术培育抗旱小麦,该生物技术的核心步骤是________。若要获得大量抗旱基因,可通过________技术对抗旱基因进行扩增。
(2)要确定抗旱基因在小麦细胞中是否成功表达,从分子水平上鉴定,可采用的方法是________;若要进行个体水平检测,则需要把转基因小麦植株分别种植在________不同的田地,以检测其是否有抗性及抗性程度。
(3)在培育成功的转基因抗旱小麦的繁育过程中,抗旱基因和标记基因
________(填“遵循”或“不遵循”)基因的分离规律,理由是________________________。
解析 (1)分析题意可知,科研小组将大麦的抗旱基因(HVA)导入小麦细胞,即采用基因工程技术培育抗旱小麦,基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建,若要获得大量抗旱基因,可通过PCR技术对抗早基因进行扩增。(2)要确定抗旱基因在小麦细胞中是否成功表达,从分子水平上鉴定,可采用的方法是抗原-抗体杂交;若要进行个体水平检测,则需要把转基因小麦植株分别种植在干旱程度(或含水量)不同的田地,以检测其是否有抗性及抗性程度。(3)在培育成功的转基因抗旱小麦的繁育过程中,由于抗虫基因和标记基因是非等位基因,因此在遗传过程中不遵循基因的分离规律。 答案 (1)基因工程 基因表达载体的构建 PCR
(2)抗原-抗体杂交 干旱程度(或含水量) (3)不遵循 抗虫基因和标记基因是非等位基因
3.(2016·山东济宁一模,40)图示方案为人们获得生物新品种的过程,请回答下列问题:
导入方案Ⅰ:抗冻蛋白基因――→烟草细胞―→抗冻烟草
导入方案Ⅱ:A基因――→免疫过的B细胞―→体外培养―→单克隆抗体
导入移植方案Ⅲ:人的生长激素基因――→牛的受精卵―→早期胚胎――→受体母牛―→转基因牛
(1)基因工程的核心步骤是________________。农杆菌转化法中,根据农杆菌的特点,如果将抗冻蛋白基因插入________上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其插入植物细胞中________上。
(2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是________,请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则____________________________。
(3)方案Ⅲ中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前,必须进行性别鉴定,一般是取处于________时期的________细胞进行检测。
解析 (1)基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。农杆菌转化法中,将抗冻蛋白基因插入Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因插入植物细胞中染色体DNA上。(2)方案Ⅱ中将A基因导入免疫过的B淋巴细胞生产单克隆抗体,说明A基因使得细胞无限增殖,即A基因能够调控细胞无限增殖,该基因在受体细胞中能够复制、转录和翻译。(3)方案Ⅲ中将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,使得转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。囊胚中的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,滋养层细胞发育成胎盘和胎膜,将早期胚胎移植入受体母牛子宫之前,一般取处于囊胚时期的滋养层细胞进行性别检测。
答案 (1)基因表达载体的构建 Ti质粒的T-DNA 染色体DNA (2)调控细胞无限增殖
(3)乳腺蛋白基因 囊胚 滋养层
4.人β-酪蛋白是人乳汁中的重要营养成分,科学家已培育出转基因山羊来生产人β-酪蛋白,下图为培育流程,其中①~④为相关过程,请回答下列问题:
(1)人β-酪蛋白基因是此基因工程的________,可从人细胞中直接提取或从人的________中提取。
(2)过程①获得的A为____________;将A导入受精卵常用的方法是________法。
(3)过程③为________,进行此操作的早期胚胎应处于________________阶段。 (4)代孕母羊对早期胚胎无________反应是转基因山羊能在其子宫内存活并发育的基础。
(5)从分子水平可通过________技术检测转基因山羊中是否成功表达出人β-酪
蛋白。
解析 (1)人β-酪蛋白基因是此基因工程的目的基因,可从人的基因组文库或cDNA文库中提取。(2)流程图中A应为含目的基因的表达载体,常用显微注射法将基因表达载体导入动物细胞。(3)过程③为胚胎移植,进行胚胎移植的羊的早期胚胎应处于桑椹胚或囊胚阶段。(4)代孕母羊对早期胚胎不发生免疫排斥反应是转基因山羊能在其子宫内存活并发育的基础。(5)实际操作中可用抗原—抗体杂交技术检测转基因山羊中是否成功表达出人β-酪蛋白。 答案 (1)目的基因 基因组文库(或cDNA文库)
(2)含目的基因的表达载体 显微注射 (3)胚胎移植 桑椹胚或囊胚 (4)免疫排斥 (5)抗原-抗体杂交
5.下图是科学家利用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程。请结合相关知识回答问题:
(1)除图示方法获得目的基因(人胰岛素基因)外,还可通过________的方法获得目的基因。
(2)图示所获得的人胰岛素基因在大肠杆菌中不能表达,需要质粒为其提供________等调控因子;质粒含有一个或多个________切割位点,供目的基因插入其中;质粒上还含有________,供重组DNA的鉴定和选择。
(3)图中切割人胰岛素基因和质粒的酶(酶A)相同,其目的是____________,将重组DNA分子导入大肠杆菌前,常需用________处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞。
(4)由于大肠杆菌中没有____________等结构,其内合成的人胰岛素没有活性,需要经过再加工。
解析 (1)获取目的基因的方法除题图所示方法外,还有人工合成。(2)图示所获得的人胰岛素基因由于不含启动子和终止子,因此需要运载体——质粒提供。质粒上还应含有一个或多个限制酶切割位点,供目的基因插入其中;质粒上还
含有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。(3)用同一种限制酶切割目的基因和质粒,以便获得相同的末端。将重组DNA分子导入大肠杆菌前,需用Ca2+处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞。(4)由于大肠杆菌中没有内质网、高尔基体等结构,其内合成的人胰岛素没有活性,需要经过再加工。
答案 (1)人工合成 (2)启动子、终止子 限制酶 标记基因 (3)获得相同的末端 Ca2+ (4)内质网、高尔基体
6.基因工程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—,根据图示判断下列叙述错误的是( )
A.用限制性核酸内切酶切割获得目的基因时,有四个磷酸二酯键被水解 B.质粒用限制性核酸内切酶Ⅰ切割,目的基因用限制性核酸内切酶Ⅱ切割 C.限制性核酸内切酶Ⅰ和限制性核酸内切酶Ⅱ切割后获得的黏性末端相同 D.质粒中的标记基因便于筛选出目的基因已经表达的细胞
解析 将目的基因切割下来需要切断四个磷酸二酯键,故A对;质粒如果用酶Ⅱ切割,质粒上的两个标记基因都将会被破坏,所以只能用酶Ⅰ切割,故B对;根据题意可知二者产生的黏性末端相同,故C对;质粒中的标记基因的作用是用来筛选含有目的基因的受体细胞,故D错。 答案 D
7.下图是利用转基因技术培育抗病小麦的过程。请据图回答问题。
(1)重组质粒T除含有目的基因外,还必须有________、________和________
第34讲 课后分层训练(含答案)
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