车间空气、设备、设施和人员微生物检测方法
1、 目的：
检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，达到规定的卫生标准，以控制食品成品的质量。
2、 参照标准：
中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979－2002
中华人民共和国国家标准《公共场所卫生检验方法 第三部分：空气微生物》GB/T 18204.3－2013
3、采样与检测方法：
培养基和检测用具的准备： 生理盐水（10ml一管，9ml两管） 培养基：营养琼脂、乳糖胆盐发酵培养基
用具：棉签、平皿（直径90mm），小试管、无菌取样袋，吸管（1ml、10ml）.剪刀、消毒棉球、酒精灯 3.1空气的采样与测试方法 3.1.1样品采集： (1)取样频率：
a)正常生产状态的采样，每周一次。
b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。
c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。 （2）采样方法
室内面积不超过50 m2的设置3个采样点，50 m2以上的设置5个采样点。
采样点安均匀布点原则布置，室内3个采样点的设置在室内对角线四等分的3个等分点上，5个采样点的按梅花布点。 采样点距离地面高度1.2~1.5m，距离墙壁不少于1m。
采样点应避开通风口、通风道等。
采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点(约桌面高度)，打开平皿盖，使平板在空气中暴露15 min。采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24h。 3.1.2菌落培养：
（2）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，并做空白对照，细菌总数
于37℃±1℃培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。
（3）菌落计算：
a) 记录平均菌落数，用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数，标记或
在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，不可遗漏。 空气细菌落菌数（cfu/m3）=50000*N/AT 式中： A——平板面积，cm2；
T——平板暴露时间，min； N——平均菌落数，cfu/平皿。 50000--------系数
有个前提条件是5分钟在100CM2面积上沉降的细菌数相当于10L空气所含的细菌数,用直径90mm的平板，暴露5min，最终结果是平板平均菌落数乘以157
空气的沉降菌指标与平皿的大小和沉降的时间有关
目前食品行业经常引用的标准是GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》，其规定生产环境卫生指标指标为﹕ a)装配与包装车间空气中细菌菌落总数应<2500cfu/m3 b)工作台表面细菌菌落总数应<20 cfu/cm2,
c)工人手表面细菌菌落总数应<300 cfu/只手，并不得检出致病菌。
3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法： 3.2.1样品采集： (1)取样频率：
a)正常生产状态的采样，每周一次。
b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。
c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。 （2） 采样方法：
a) 工作台（机械器具）：用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面（取
与食品直接接触或有一定影响的表面）取25cm2 的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。
b) 工人手：被检人五指并拢，用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指
尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。 （3）采样注意事项：
擦拭时棉签要随时转动，保证擦拭的准确性。对每个擦拭点应详细记录所在分场的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间 3.2.2 细菌·大肠菌群的检测培养:
样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。此液为1：10稀释液。如污染严重，可十倍递增稀释，吸取1ml 1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液。 3.2.2.1 细菌总数：
（1）以无菌操作，选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内，
每个稀释度做两个平皿（平行样），将已融化冷至45℃左右的平板计数琼脂培养基倾入平皿，每皿约15~20ml，充分混合。
（2）待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36℃±1℃ 培养48 h后计数。 （3）结果报告：报告每cm2食品接触面中或每只手的菌落数
(推荐)车间空气、设备、设施和人员微生物检测方法
