(完整版)HPLC谱图常见问题原因汇总及解决方式
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(完整版)HPLC谱图常见问题原因汇总及解决方式
HPLC谱图常见问题原因及解决方式汇总
液相色谱系统的许多问题都可以在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键所在。
A.峰拖尾
原因 解决办法 1.a。反冲色谱柱; 1.筛板阻塞; b.更换进口筛板; c.更换色谱柱; 2。色谱柱塌陷; 2。 填充色谱柱; 3. a.使用更长的色谱柱; 3.干扰峰; b.改变流动相或更换色谱柱; 4。调整pH值,对于碱性化合物,低4.流动相pH选择错误; pH值更有利于得到对称峰; 5.样品与填料表面的溶化点发生反应; 5.a。加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂。b.更改色谱柱.
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B.峰前延
原因 1.柱温低; 2。样品溶剂选择不恰当; 3.样品过载; 4。色谱柱损坏; C。峰分叉
原因 解决办法 1.取下保护柱再进行分析;如果必要更换保护柱;如果分析柱阻塞,拆下来清洗;如果问题仍然存在,1。保护柱或分析柱污可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施;染; 如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。 2.样品溶剂不溶于流动相; 2。改变样品溶剂;如果可能采取流动相作为样品溶剂; 解决办法 1。升高柱温; 2。使用流动相作为样品溶剂; 3.降低样品含量; 4。见A1、A2;