生理实验
实验十 家兔手术技术训练
一、实验目的
1.了解急性整体动物实验的流程;
2.学习和掌握家兔的常用手术技术和麻醉技术; 3.掌握家兔的气管插管术; 4.实践家兔的腹部手术技术; 5.学习家兔的开颅术。
二、实验原理
急性动物实验中常以血压、呼吸等为指标,以静脉注射、放血等为实验方法。需要暴露气管、颈总动脉,颈外静脉,股动脉,股静脉,并做相应的插管,以及分离迷走神经,减压神经及股神经等。手术主要在颈部和腹部进行。
在慢性实验或急性在体实验中,施行手术之前必须将动物麻醉。麻醉可使动物在手术或实验过程中减少疼痛,保持安静,保证实验的顺利进行。麻醉剂的种类繁多,作用原理不尽相同,在应用时需根据动物的种类以及实验或手术的性质慎重加以选择。麻醉必须适度,过深或过浅均会给手术或实验带来不良影响。麻醉的深浅可从呼吸,某些反射的消失,肌肉的紧张程度和瞳孔的大小加以判断。常用刺激角膜以观察角膜反射。适宜的麻醉状态是呼吸深慢而平稳,角膜反射与运动反应消失,肌肉松弛。
因为实验时,容易损伤喉返神经,造成皮下水肿,动物呼吸困难甚至窒息,所以一旦开始实验要尽快实行气管插管术。
暴露气管后在气管中段,于两软骨环之间,剪开气管口径之半,在向头端作一小纵切口呈倒“T”形。用镊子夹住T形切口的一角,将适当口径的气管套管由切口向心端插入气管腔内,用粗线扎紧,再将结扎线固定于“Y”形气管插管分叉处,以防气管套管脱出。
做切口前,应注意切口的大小和解剖结构,一般以少切断神经和血管为原则,同时应尽可能地使切口与各层组织的纤维方向一致。切口的大小,既要便于手术操作,但也不可过大。做切口时,先用左手拇指和食指、中指将预定切口上端两侧的皮肤固定,右手持手术刀,用执弓式或执笔式,以适当的力量,一次全
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线切开皮肤和皮下组织,直至肌层。
手术过程中,要随时注意止血,以免造成血肉模糊,难以分辨血管和神经,延误手术时间。微小血管出血,可用湿热生理盐水纱布按压止血;较大血管出血,需先找到出血点,用止血钳夹住,而后用线结扎;大血管破损,应准确、快速止血,否则失血过多,影响实验。
三、动物与器材
实验动物:家兔1只/组。
实验器材:家兔手术器械、粗绳、解剖台、玻璃分针、注射器等。 实验试剂:生理盐水、3%的戊巴比妥。
四、实验步骤
1. 一手抓住兔子的双耳,一手托住它的后腿,从笼中抓出进行称重。由于秤已不准,可以用相对值的方法,即人先抱着兔站在秤上称重(m1),然后人单独站在秤上称重(m2),两者的差值即兔子的重量,本组的兔子重量为1kg.注射1mL戊巴比妥。在兔耳背耳缘处寻找耳缘静脉,如不明显,可用棉球蘸少许酒精擦拭耳缘使静脉暴露。根据1ml/1kg戊巴比妥的量注射入耳缘静脉
使兔子麻醉,判断是否麻醉的依据是是否出现角膜反射。如无角膜反射,则兔子已被麻醉。
2.将动物背位固定于手术台上,用剪毛剪将颈部手术部位的毛剪去,即可进行手术。
颈部手术
(1) 在紧靠喉头下缘,沿颈部正中线作一长约5—7cm 的皮肤
图3 家兔的手术台固定
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切口,用止血钳分离皮下结缔组织,首先看到胸锁乳突肌。再向下分离,便露出胸骨甲状肌和紧贴于气管上的胸骨舌骨肌。
(2) 气管插管术。用止血钳由正中线将胸骨舌骨肌分离,暴露出气管。于已暴露的气管下面用镊子穿一丝线,打一活结。在喉头下2—3cm处的气管上作一“T”形切口,将与气管口径相近的气管插管向心方向插入气管中,用线结扎,并将余线固定于气管插管的分叉处,以防气管插管松脱。
(3) 颈部神经血管分离术。在颈部,神经与颈总动脉被结缔组织膜束在一起,形成血管神经束,位于气管外侧,其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。用止血钳分离上述肌肉之间的结缔组织,后用左手拇指和食指轻轻捏住分离的肌肉和皮肤,稍向外翻,即可将血管神经束翻于食指之上,然后用弯头止血钳分离颈总动脉外的结缔组织膜,将动脉分离约4cm 长,即可穿线备用。
腹部手术
在下腹部正中线作长约4cm的皮肤切口,沿腹白线切开腹壁, 找到剑突,认清输尿管进入膀胱背侧部位后,细心地分离出一侧输尿管。
开颅手术
将家兔腹位固定于手术台上。用剪毛剪将头顶部被毛剪去,再用手术刀由眉间至枕骨部纵向切开皮肤,沿中线切开骨膜。用手术刀柄自切口处向两侧刮开骨膜,暴露额骨及顶骨。用骨钻在一侧的顶骨上开孔(勿伤及脑组织)后,将止血钳小心伸入孔内,自孔处向四周咬骨以扩展创口。向前开颅至额骨前部,向后开至顶骨后部及人字缝之前(切勿掀动人字缝前的顶骨,以免出血不止),暴露双侧大脑半球。观察大脑的结构,区分大脑皮层运动区。
五、注意事项
1、麻醉必须适度,过深或过浅均会给手术或实验带来不良影响。一次不要打太多,实验过程中可补加。
2. 剪下的毛应放入污物筒内,以免到处飞扬,污染环境。 3. 手术时应尽可能地使切口与各层组织的纤维方向一致。 4. 在分离及穿线时,切勿伤及其下的神经。
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5. 家兔开颅术中,用骨钻在一侧的顶骨上开孔,轻轻慢速转动骨钻,感觉到颅骨的断裂后立即停止,动作要轻,勿伤及脑组织。
六、实验心得
1、本次实验相对于以往各次实验有明显的不同之处。以前解剖的全部都是蛤蟆,而现在解剖的是家兔,实验动物体积大了很多,且更高等复杂。因此,我们不能怀着戏谑的态度,而是怀着严谨的态度进行实验,并感恩这来之不易的实验机会。让兔子死的有所值,通过实际操作来提高手术技术。
2、总的来说,兔子应该感到恐惧和紧张的,所以要让它放松,动作不宜粗暴。实行气管插管术时要尽快,一旦手术开始,就不能有任何怠慢,培养良好的职业道德,否则动物易窒息而死。
3、 兔子气味难闻,可能会使同学厌恶。但家兔是一种比蛤蟆要高等的多的动物,在麻醉不彻底的情况下实验,能够明显的感觉到家兔的敏感和痛苦,所以要注意补加麻药。
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