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周德庆微生物笔记

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1、获得该微生物的纯培养 2、测定一系列必要的鉴定指标 3、查找权威性鉴定手册

一章:微生物类群与形态结构 非细胞型:病毒

细胞型:原核微生物:细菌、放线菌等, 无明显核,也无核膜、核仁。 真核微生物:酵母菌、霉菌, 有明显核,有核膜、核仁。 1节:细菌 Bacteria

是微生物一大类群,主要研究对象。

细菌是单细胞的,大小在1um左右,1000倍以上显微镜才能看到其形状。 一、细菌的形态和大小 (一)基本形态 1、球菌

Coccus:球形或近球形,根据空间排列方式不同又分为单、双、链、四联、八叠、葡萄球菌。不同的排列方式是由于细胞分裂方向及分裂后情况不同造成的。

2、杆菌 Bacillus (Bacterium):杆状或圆柱形,径长比不同,短粗或细长。是细菌中种类最多的。 3、螺旋菌

Spirillum:是细胞呈弯曲杆状细菌统称,一般分散存在。根据其长度、螺旋数目和螺距等差别,分为弧菌Vibrio(菌体只有一个弯曲,形似C字)和螺旋菌(螺旋状,超过1圈)。 与螺旋体 Spirochaeta 区别:无鞭毛。

细菌形态不是一成不变的,受环境条件影响(如温度、培养基浓度及组成、菌龄等) 异常形态

一般,幼龄,生长条件适宜,形状正常、整齐。老龄,不正常,异常形态。 畸形:由于理化因素刺激,阻碍细胞发育引起。

衰颓形:由于培养时间长,细胞衰老,营养缺乏,或排泄物积累过多引起。 (二)细菌大小

如何测量:显微测微尺 球菌直径0.5-1um

杆菌直径0.5-1um ,长为直径1-几倍 螺旋菌直径03-1um,长1-50um 细菌大小也不是一成不变的。

细胞重量10-13-10-12g ,每g细菌 二、细菌细胞结构

研究细菌细胞结构是分子生物学重要内容之一,有了电子显微镜才有可能。 其结构分为基本结构和特殊结构。

基本结构是细胞不变部分,每个细胞都有,如细胞壁、膜、核。 特殊结构是细胞可变部分,不是每个都有,如鞭毛、荚膜、芽孢。 (一)基本结构

1、细胞壁 cell wall:位于细胞表面,较坚硬,略具弹性结构。

功能:1)维持细胞外形;2)保护细胞免受机械损伤和渗透压危害;3)鞭毛运动支点;4)正常细胞分裂必需;5)一定的屏障作用;6)噬菌体受体位点所在。另外与细菌的抗原性、

致病性有关。 革兰氏染色

Cristein Gram,1884发明(Koch实验室) 染色过程:(插入)

凡是不能被乙醇脱色,呈蓝紫色,称为革兰氏阳性菌 G+ 凡是经乙醇脱色,呈复染剂颜色,称为革兰氏阴性菌 G- 结果不同主要是细胞壁组成及结构差异造成的。 (1)革兰氏阳性菌 Gram positive

以金黄色葡萄球菌为例,Staphylococcus aureus 细胞壁构成:一连续层,厚20-80nm 两部分:网状骨架:微纤丝组成 基质:骨架埋于基质中

化学组成:主要是肽聚糖和磷壁酸 肽聚糖 peptidoglycan (粘肽、胞壁质) 大分子复合体,许多亚单位交联而成。 亚单位

1)双糖单位:N-乙酰胞壁酸(NAM)和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)通过a-1,4糖苷键相连而成。

2)短肽:L-Ala-D-Glu-L-Lys-D-Ala 3) 肽桥:短肽之间连接。

短肽全部或部分连至NAM上,短肽之间也有连接,组成一网状结构。 肽聚糖是细菌细胞壁特有成分,也是原核微生物特有成分(古生菌没有) 磷壁酸 teichoic acid (垣酸) G+特有成分。

多元醇与磷酸复合物,通过磷酸二酯键与NAM相连。 根据多元醇不同,有甘油型、核糖醇型等5种类型。

主要功能:使壁形成负电荷环境,吸附二价金属离子,维持壁硬度和一些酶活性。还可提供噬菌体位点。

(2)革兰氏阴性菌 Gram negative 以大肠杆菌为例:

内壁层:厚2-3 nm,单(双)分子层,由肽聚糖构成。 与G+区别:交联低;DAP取代 L-Lys;肽桥。

外壁层:内层:脂蛋白层,以脂类部分与肽聚糖相连。中层:磷脂层。外层:脂多糖层,外壁重要成分,8-10 nm。

脂多糖 lipopolysaccharide LPS G-特有成分。

结构:类脂A + 核心多糖 + O-侧链

功能:1)内毒素物质基础;2)吸附镁、钙离子;3)决定G-表面抗原;4)噬菌体受体位点。

钙离子是维持LPS稳定性所必需的。 D-AA存在优点 G+与G-比较 革兰氏染色机制

在细胞壁与细胞膜之间,有周质空间(隙),含水解酶、载体蛋白等。

(3)细胞壁缺陷细菌

1、原生质体protoplast:人工条件下用溶菌酶除去细胞壁或用青霉素抑制细胞壁合成后,所留下的部分。一般由G+形成。

2、球形体spheroplast:残留部分细胞壁,一般由G-形成。有一定抗性。

特点:对渗透压敏感;长鞭毛也不运动;对噬菌体不敏感;细胞不能分裂等。

3、细菌 L型:一种由自发突变形成的变异型,无完整细胞壁,在固体培养基表面形成 \油煎蛋 \状小菌落。

4、支原体:长期进化形成。 2、细胞膜 cell membrane

在细胞壁与细胞质之间的一层柔软而富有弹性的半透性膜。厚7-8nm。 化学组成:蛋白和磷脂,蛋白含量高达75%,种类也多。膜不含甾醇类。 膜结构(插入)

功能:1)高度选择透性膜,物质运输:2)渗透屏障,维持正常渗透压;3)重要代谢活动中心;4)与壁、荚膜合成有关;5)鞭毛着生点,供运动能量。 3、间体 mesosome(中质体) 细胞膜内陷形成。

功能:1)拟线粒体,呼吸酶系发达。 2)与壁合成,核分裂,芽孢形成有关。 4、细胞核 nuclear body 核质体

原核无明显核,一反差弱的核区。

特点:无核膜、核仁、固定形态,结构简单,细胞分裂前核分裂。一般单倍体。

成分:DNA:环状双链,超线圈结构,负电荷被镁离子、有机碱(精胺、腐胺)所中和。 与真核区别:

5、核糖体 ribosome RS

核糖核蛋白的颗粒状结构,RNA+蛋白。 原核:游离态、多聚核糖体,70S

真核:游离态、结合内质网上,70、80S

多聚核糖体:一条mRNA与一定数目的单个RS结合而成。 功能:

6、细胞质及内含物

是无色透明胶状物,原核与真核不同。

主要成分:水、蛋白、核酸、脂类及少量糖和无机盐。富含核糖核酸。 不同细菌细胞内,含不同内含物,是细胞的贮藏物质或代谢产物。(插入) 内含物优点? (二)特殊结构 1、荚膜 capsule:某些细菌细胞壁外面覆盖着一层疏松透明粘性物质。厚度不同,名称不同。 折光率低,负染法观察。

成分:90%以上为水,余为多糖(肽)。

功能:1)抵抗干燥;2)加强致病力,免受吞噬;3)堆积某些代谢废物;4)贮存物。 2、鞭毛和菌毛

鞭毛flagellum:某些细菌表面一种纤细呈波状的丝状物,是细菌运动器官。 直径20-25nm,长超过菌体若干倍。电镜或特殊染色法观察,悬滴法观察运动。 化学成分:主要是蛋白质。

结构:G+与G-区别;原核与真核区别 鞭毛着生位置与数目,可作为分类依据。 鞭毛着生状态决定运动特点。 趋性运动:栓菌实验

菌毛fimbria (pilus ):许多G-尤其是肠道菌,表面有比鞭毛更细,数目多,短直硬的丝状体。 直径7-10nm ,长2-3um。 性菌毛(F菌毛)

3、芽孢 spore, endospore

某些菌生长一定阶段,于营养细胞内形成一个内生孢子,是对不良有抗性的休眠体。 每一细胞仅形成一个芽孢,所以其没有繁殖功能。 形成芽孢属于细胞分化(形态发生)

Bacillus, clostridium, Spirillum, Vibrio, Sarcina 结构组成特点:含水量低(平均40%),壁致密,芽孢肽聚糖和吡啶-2,6-二羧酸钙(DPA-Ca ) 芽孢有极强的抗热、辐射、化学药物和静水压的能力,休眠力惊人。 芽孢结构、形成、萌发(自学) 伴孢晶体

孢囊 cyst,等等。

三、细菌繁殖与群体形态

1、繁殖方式:裂殖为主,少数有性接合。

2、菌落形态:菌落colony:由单个或少数几个细胞在固体培养基表面繁殖出来的,肉眼可见的子细胞群体。

形态包括大小、形状、隆起、边缘、表面状态、表面光泽、质地、颜色等等。 纯培养:克隆clone 菌苔lawn

四、常见常用细菌

细胞结构、菌落特点、代谢产物等。 2节:放线菌 Actinomycetes

因菌落呈放射状而得名,是丝状分枝细胞的细菌。

一般分布在含水量低,有机质丰富的中性偏碱性土壤中,特殊土腥味。 大多数是腐生菌,少数寄生;多数异养,好氧。 突出特性是产各种抗生素。 一、形态与结构

由菌丝构成,直径0.2-1.2um,无横隔,仍是单细胞。 菌丝分为:基内菌丝(营养菌丝) 气生菌丝 孢子丝

菌丝组成菌落,分为两类。 放线菌仍是原核微生物? 二、繁殖

以无性孢子为主,菌丝断裂片段也可繁殖成新菌体。 孢子形成方式:横隔分裂 孢囊孢子

放线菌生活史(发育周期) 三、代表属及常见菌

(一)链霉菌属 Streptomyces

90%抗生素,菌丝发育良好。如龟裂链霉菌S. rimosus, 灰色链霉菌S. griseus (二)小单孢菌属Micromonospora

无气生菌丝,基内菌丝顶端着生一孢子。 (三)诺卡氏菌Nocardia 原放线菌属,降解能力强。 (四)放线菌属Actinomyces

只有基内菌丝,不形成孢子,厌氧。 (五)链孢囊菌属Streptosporangium 形成孢子囊,孢囊孢子。 放线菌、细菌异同?

3节:其它几类原核微生物

重要了解大小、G、培养、细胞及代谢。 一、立克次氏体

Rickettsia:介于细菌、病毒之间,专性真核活细胞内寄生,不能人工培养。不滤过,直径0.3-0.6um,存在与寄主细胞质和核中。细胞球状或杆状,不运动。G-,膜疏松,酶系统不完全,不完整的产能代谢,抵抗性差。

二、支原体Mycoplasma:介于细菌、立克次氏体之间。不具细胞壁,细胞膜含甾醇类。G-,直径0.2-0.25um,可滤过。已知可独立生活的最小的细胞型生物。可人工培养,营养要求苛刻,油煎蛋菌落。

三、衣原体Chlamydia:介于立克次氏体、病毒之间。可滤过,专性活细胞内寄生。G-,\能量寄生物 \。

各类原核微生物与病毒比较表。 蓝细菌Cyanobacteria:含叶绿素,进行放氧型光合作用的原核生物。由于抵抗力和固氮能力,可在贫瘠沙滩荒岩上生长,称为 \先锋生物 \。

蛭弧菌Bdellovibrio:寄生于其他细菌并导致裂解,可滤过,运动活跃,G-。生物防治。 4节:酵母菌 yeast

非分类名词,一群单细胞微生物,属真菌类。第一种 \家养微生物 \,与人类关系密切。主要分布在含糖较高偏酸性环境中,又称 \糖真菌 \。

一、形态大小

单细胞,无鞭毛。细胞形态多样,常见球、卵、圆桶形。 大小在1-5um X 5-30um之间。 二、细胞结构

1、细胞壁:厚0.1-0.3um,三层,由酵母纤维素组成(甘露聚糖、葡聚糖、蛋白、类脂)。用蜗牛酶(heliase)破坏壁来制备原生质体。

2、细胞膜:与原核基本相同,但含甾醇(麦角固醇)。由于有细胞器分化,功能不及细菌多,主要是调节渗透压、吸收营养、分泌代谢物等 3、细胞质及内含物

4、细胞核:真核:双层单位膜,大量核孔,可见染色体,一个或几个核仁,核膜外有中心体。

5、线粒体:含有一环状DNA。呼吸酶系载体, \动力工厂 \。有氧时需要,厌氧或过量葡

周德庆微生物笔记

1、获得该微生物的纯培养2、测定一系列必要的鉴定指标3、查找权威性鉴定手册一章:微生物类群与形态结构非细胞型:病毒细胞型:原核微生物:细菌、放线菌等,无明显核,也无核膜、核仁。真核微生物:酵母菌、霉菌,有明显核,有核膜、核仁。1节:细菌Bacteria是微生物一大类群,主要研究对象。细菌是单细胞的
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