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检验操作规程
题目：大枣原药材检验操作规程 编号：TS-GC-YL-20060-00 制定人： 制定日期2017年 月 日 版本：2 页数：1/3 审核人： 审核日期2017年 月 日 颁发部门：质 量 部 批准人： 批准日期2017年 月 日 生效日期2017年 月 日 目的：规范大枣原药材检验操作 范围：大枣原药材检验 分发部门： 质量部、 化验室、生产部 标 题 正 文 1 标准依据：《中国药典》2024年版一部及四部 2 【性状】 2.1 仪器：直尺。 2.2 方法：取本品,置日光下观察,并用直尺测量：本品呈橢圆形或球形，长 2～3.5cm，直径1.5～2.5cm。表面暗红色，略带光泽，有不规则皱纹。基部凹陷，有短果梗。外果皮薄，中果皮棕黄色或淡褐色，肉质，柔软，富 糖性而油润。果核纺锤形，两端锐尖，质坚硬。气微香，味甜。 【鉴别】 3 （1）显微鉴别 3.1 仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛、稀甘油等。 3.1.1 方法：取本品适量，用水合氯醛装片，置显微镜下观察： （1）本品粉3.1.2 末棕色。外果皮棕色至棕红色；表皮细胞表面观类方形、多角形或长方形， 胞腔内充满棕红色物，断面观外被较厚角质层；表皮下细胞黄色或黄棕色， 类多角形，壁稍厚。草酸钙簇晶（有的碎为砂晶）或方晶较小，存在于中 果皮薄壁细胞中。果核石细胞淡黄棕色，类多角形，层纹明显，孔沟细密， 胞腔内含黄棕色物。 （2）薄层鉴别 3.2 仪器与试剂：分析天平、硅胶G薄层板、层析缸、乙醚、乙酸乙酯、3.2.1 乙醇、冰醋酸、石油醚（60～90℃）、甲苯等。 方法：（2）取本品粉末2g，加石油醚（60～90℃）10ml，浸泡10分3.2.2 钟，超声处理10分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣晾干，加乙醚20ml，浸 泡1小时，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。 另取大枣对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取齐墩果酸对照品、白 桦脂酸对照品，加乙醇分别制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10μl、 上述两种对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸 乙酯-冰醋酸（14:4:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙 醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视。 供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点或荧光斑点。 【检查】 4 总灰分 不得过2.0％（通则2302）。 4.1 4.1.1 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 4.1.2 方法：取供试品2～3g，过二号筛混合均匀后，置炽灼至恒重的坩埚中称定重量，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～
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4.1.3 4.2 4.2.1 4.2.2 4.2.3 4.2.4 4.3 4.3.1 4.3.2
600℃，使完全灰化至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。 计算公式： W1-W0 总灰分% = ×100% W样 式中： W0 ----------- 坩埚重量(g)。 W1----------- 坩埚与灰分的重量(g)。 W样----------- 样品的重量(g)。 黄曲霉毒素 照黄曲霉毒素测定法（通则2351）测定。 本品每1000g含黄曲霉毒素B1不得过5μg，黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1的总量不得过10μg。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水（40:18:42）为流动相；采用柱后衍生法检测，①碘衍生法：衍生溶液为0.05%的碘溶液（取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀释至1000ml制成），衍生化泵流速每分钟0.3ml，衍生化温度70℃；②光化学衍生法：光化学衍生器（254nm）；以荧光检测器检测，激发波长=360nm（或365nm），发射波长λex=450nm。两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。 混合对照品溶液的制备 精密量取黄曲霉毒素混合对照品溶液（黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.Oμg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml）0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为贮备溶液。精密量取贮备溶液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。 供试品溶液的制备 取供试品粉末约15g（过二号筛），精密称定，置于均质瓶中，加入氯化钠3g，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速搅拌2分钟（搅拌速度大于11000转/分钟），离心5分钟（离心速度2500转/分钟），精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，量取续滤液20.0ml，通过免疫亲合柱，流速每分钟3ml，用水20ml洗脱，洗脱液弃去，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用适量甲醇洗脱，收集洗脱液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法 分别精密吸取上述混合对照品溶液5μl、10μ1、15μl、20μl、25μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线。另精密吸取上述供试品溶液20～25μ1，注入液相色谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2的量，计算，即得。 二氧化硫残留量：照二氧化硫残留量测定法（通则 2331)测定，不得过150mg/kg 仪器与试剂：两颈圆底烧瓶、电热套、竖式回流冷凝管、磁力搅拌器、分析天平、甲基红乙醇溶液指示剂、氢氧化钠滴定液滴、盐酸溶液（6mol/L)等。 方法：测定法取药材或饮片细粉约10g(如二氧化硫残留量较髙，超过1000mg/kg，可适当减少取样量，但应不少于5g),精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水300?400ml。打开回流冷凝管开关给水，将冷凝管的上端二氧化硫气体导出口处连接一橡胶导气管置于100ml锥形瓶底部。锥形瓶内加 第 2 页 共 3 页
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4.3.3 入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液（橡胶导气管的末端应在吸收液液面以下）。使用前，在吸收液中加人3滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml),并用0.Olmol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色（即终点；如果超过终点，则应舍弃该吸收溶液）。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2L/min；打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L)10ml流入蒸馏瓶，立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5小时后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定（O.Olmol/L)滴定，至黄色持续时间20秒不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。 计算公式： （V供-V空）×C×0.032×106 二氧化硫残留量（mg/kg） = W供 式中： V供为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； V空 为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； C 为氢氧化钠滴定液的浓度，mol/L； W供为供试品的重量，g。 0.032为lml氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g
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YL-20060大枣原料检验操作规程
