人工牛黄甲硝唑胶囊微生物限度检查方法验证方案
起草 部门：QC组 部门：QC组 审核 部门：质量部 批准 质量部 颁发
下表用于记录修订/变更主要内容及历史。
文件编号 TS-VP-4201-00
修订原因 按GMP（2010年修订版）要求新制定 修订日期 2015.10.22 01 质量部 质量负责人 签名： 签名： 日期： 日期： 本文件根据需要应分发于以下部门：签名： 签名： 日期： 日期： 1 / 20
目 录
1. 概述
2. 验证目的和范围 3. 组织及职责 4. 验证进度计划表
5. 验证所需要的仪器设备及相关文件的确认 6. 验证所需要的菌种、培养基、检验样品的确认 7.验证项目和验证方法 7.1试验菌株
7.2需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌总数检查方法验证的菌液制备 7.3需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌总数检查方法验证--常规倾注平皿法 7.4需氧菌总数检查方法验证—离心沉淀-薄膜过滤法 7.5控制菌检查方法验证—离心沉淀-薄膜过滤法 8.偏差与漏项控制 9.验证报告会审
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1. 概述
我公司生产品种人工牛黄甲硝唑胶囊，产品微生物限度检查项目为需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、以及大肠埃希菌检查和沙门菌检查。参照《中国药典》2015版四部附录1105：微生物计数法，以及1106：控制菌检查法的规定，本公司对该产品的微生物限度检查方法予以验证。通过验证以确认所采用的微生物限度检查方法适用。
人工牛黄甲硝唑胶囊处方中含有甲硝唑、人工牛黄以及常用辅料成分，文献资料介绍甲硝唑对细菌有抑菌特性，对霉菌和酵母菌无抑菌活性。甲硝唑在水中微溶，可以通过离心沉淀-薄膜过滤法去除其对微生物生长的影响。本验证方案通过试验菌株的回收率测试，首先确认常规倾注平皿法是否适用于本品的微生物限度检查；如常规倾注平皿法不适用，则进一步验证可去除供试品抑菌物质的离心沉淀-薄膜过滤法是否适用于本品的微生物限度检查。
本验证方案根据样品特性制定微生物限度检查方法和检验条件，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。 2. 验证目的和范围
验证该产品的微生物限度检查方法的适用性，对其有效性进行评价，保证检验结果的可靠性。本验证方案采用3批按GMP要求组织生产的人工牛黄甲硝唑胶囊，进行微生物限度检查方法的验证。 3.组织及职责
3.1验证方案和验证报告的起草、审核、批准
验证方案由质量部QC组负责起草，由质量部审核，最终由质量负责人批准。验证方案实施完成后，由QC组负责汇总微生物限度检查法验证的结果、撰写报告，由质量部审核，最终由质量负责人批准报告。 3.2验证方案的培训
验证方案在经质量负责人批准后，，由QC组组长对本次验证实施的相关人员组织培训工作，并将该次的培训记录归档。
3.3验证方案实施过程中的变更和偏差
验证方案实施过程中如有变更和偏差，质量负责人应当组织进行评估并采取相应的控制措施。 3.4 验证工作小组成员表
姓名 黄汉新 胡建新 曾凤敏 刘红华 4. 验证进度计划表
本次微生物限度检查方法验证的计划安排时间是2015年12月至2016年1月。 5. 验证所需要的仪器设备及相关文件的确认 5.1.主要检验仪器设备确认表
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部门及职务 质量负责人/质量受权人 质量部QA组长 质量部QC组长 质量部QC 职 责 负责验证方案及报告的批准 审核验证方案、审核验证报告并协调工作 负责验证方案审核、实施、汇总报告及培训工作 负责验证方案起草、具体实施、报告工作序号 1 2 3 4 5 6 仪器设备名称 电子天平 生化培养箱 生化培养箱 生化培养箱 立式压力蒸汽灭菌锅 生物洁净安全柜 型 号 编号 校准单位 校准日期 有效期至 检查人/日期： 复核人/日期： 5.2.验证所需文件的确认表
文件名称 《人工牛黄甲硝唑胶囊内控质量标准》 《人工牛黄甲硝唑胶囊检验操作规程》 《取样操作规程》 《微生物限度检查操作规程》 《微生物实验室清洁消毒操作规程》 《培养基的管理制度》《检定菌的保存、传代、使用、销毁规 程》《LDZX-30FBS立式压力压蒸汽灭菌器 操作规程》 《SPX-150B生化培养箱操作规程》《BHC-1300IIA/B3生物洁净安全柜操 作规程》 《JJ200电子天平操作规程》文件编码 是否有效版本 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 文件保存处 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 检查人/日期： 复核人/日期： 6. 验证所需要的菌种、培养基、检验样品的确认 6.1.试验菌种检查表
序号 菌种名称 代码 冻干菌种 批号 来源 4 / 20
1 2 3 4 5 6 7 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 黑曲霉 大肠埃希菌 乙型副伤寒沙门菌 CMCC（B）26003 CMCC（B）10104 CMCC（B）63501 CMCC（F）98001 CMCC（F）98003 CMCC（B）44102 CMCC（B）50094 中国食品药品检定研究院 中国食品药品检定研究院 中国食品药品检定研究院 中国食品药品检定研究院 中国食品药品检定研究院 中国食品药品检定研究院 中国食品药品检定研究院 检查人/日期： 复核人/日期： 6.2试验所需的培养基检查
序号 名称 生产厂家 是否通过培养基适用性试验 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 □是 □否 批号 01 02 03 04 05 06 07 08 09 胰酪大豆胨液体培养基 胰酪大豆胨琼脂培养基 沙氏葡萄糖液体培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 麦康凯液体培养基 麦康凯琼脂培养基 北京三药科技开发公司 北京三药科技开发公司 北京三药科技开发公司 北京三药科技开发公司 北京三药科技开发公司 北京三药科技开发公司 RV沙门菌增菌液体培养基 北京三药科技开发公司 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼北京三药科技开发公司 脂培养基 三糖铁琼脂培养基 北京三药科技开发公司 检查人/日期： 复核人/日期：
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2015年版中国药典微生物限度检查方法验证方案
