MTHFR C677T基因多态性对干预Hhcy后脑梗死复发的
影响
刘海艳 魏秀娥 荣良群 许 静 杨 华 张翠翠
【摘 要】【摘要】 目的 观察5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性对干预高同型半胱氨酸血症后脑梗死复发的修饰作用。方法 363例合并Hhcy脑梗死患者，180例给予干预Hhcy及标准二级预防治疗，183例给予标准治疗。随访1 a观察不同MTHFR基因型脑梗死干预Hhcy后卒中复发的情况。结果 CC型患者标准治疗+干预Hhcy组1 a卒中复发率19.64%，与标准治疗组(21.8%)比较差异无统计学意义。CT基因型患者中标准治疗+干预Hhcy组卒中复发率18.42%，与标准治疗组(19.5%)比较差异无统计学意义。TT基因型中标准治疗+干预Hhcy组1 a卒中复发率10.20%，标准治疗组26%，两种卒中复发率比较差异有统计学意义(P<0.05)。在TT基因型患者中，对影响卒中复发的单因素给予Logistics多因素分析，显示干预Hhcy治疗降低TT基因型卒中复发风险，OR值0.678。结论 MTHFR 677位TT基因型患者干预Hhcy后能够降低缺血性卒中复发风险。 【期刊名称】中国实用神经疾病杂志 【年(卷),期】2018(021)016 【总页数】5
【关键词】【关键词】 5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶；基因多态性；高同型半胱氨酸血症；脑梗死；干预；复发 ·论著 临床诊治·
基金项目：江苏省卫计委课题(编号：Q201209)
近年来多项研究认为，高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia，Hhcy)是缺血性脑血管病新的独立危险因素[1-3]。5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)再甲基化途径中的一项重要物质，MTHFR基因突变可导致Hhcy[4]，大量的研究也认为MTHFR基因C667T突变与缺血性脑血管病密切相关[5-10]。然而，对合并Hhcy脑梗死患者进行Hhcy干预是否能降低卒中复发风险目前尚有争议[11-13]，结局是否受MTHFR677TT基因型的影响也不清楚。本研究对伴Hhcy的脑梗死患者给予标准二级预防治疗或标准治疗及干预Hhcy，观察1 a不同MTHFR677位基因型脑梗死患者缺血性卒中复发情况，以期为伴Hhcy脑梗死患者二级预防的个体化治疗方案提供依据。
1 资料与方法
1．1 临床资料 选择2012-09—2014-09徐州医科大学第二附属医院神经内科Hcy>15 μmol/L的 2个月内新发363例脑梗死患者，脑梗死诊断符合全国第4届脑血管病学术会议修订的诊断标准，排除心源性卒中患者，年龄>20岁。 1．2 治疗方法 采用前瞻平行对照方法将研究对象分为2组，A组：标准二级预治疗及干预HHcy组180例(叶酸 5 mg/d，维生素B6 25 mg/d，维生素B12 0.5 mg/d)；B组：标准二级预防组183例。对入组患者进行MTHFR677位基因检查，分为CC型、CT型、TT型。随访1 a，终点事件为缺血性脑卒中复发。
详细记录性别、年龄、文化程度等人口学资料以及抽烟史、饮酒史、卒中史、高血压史、糖尿病史、冠状动脉粥样硬化性心脏病史、血糖、血脂、肌酐、Hcy水平等血管病危险因素以及MTHFR677位基因型、影像学资料。检测患
者入组时、1 a血浆Hcy以及血糖、血脂、肾功能等生化指标；记录患者入组时、干预后1 a神经病学状况及影像学资料，观察脑卒中复发。神经影像评定采用1.5T磁共振常规T1、T2、Flair、DWI成像、MRA。
1．3 血样采集Hcy水平测定 采用竞争免疫法酶测定Hcy，>15 μmol/L为Hhcy。
1．4 MTHFR基因多态性分析 采用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性( PCR-RFLP)技术检测MTHFR基因型。用血液DNA基因试剂盒提取基因组DNA，MTHFR扩增引物序列参考文献，PCR反应体系50 μL常规配制，扩增MTHFR基因的反应条件为：94 ℃变性5 min，94 ℃ 1 min，55 ℃ 30 s，72 ℃ 1 min，循环30个周期，72 ℃延伸7 min；取10 μL的PCR产物，Hinf Ⅰ限制性内切酶6 U，加双蒸水至20 μL，37 ℃消化3 h，2%琼脂糖凝胶电泳判断酶切结果。可见MTHFR有3种基因型：TT纯合型，酶切后含有174 bp及72 bp 2种片段；CT杂合型，有246 bp、174 bp和72 bp 3种片段；CC野生型，仅有246 bp片段。见图1(1为Marker，5为CC野生型，4、7为CT杂合型，2、3、6为TT(纯合型)。
1．5 统计学处理 所有数据均经SPSS 19.0统计软件包进行处理。正态分布的计量资料以均数±标准差表示，非正态分布中位数和四分位数表示，多组间比较用ANOVA方差分析和LSD-t检验和秩和检验。计数资料采用频数计数法表示，χ2检验比较组间的频率。独立危险因素分析采用逐步Logistic回归分析方法处理等。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2．1 3种基因型比较 CC型111例，CT型153例，TT型99例，分别占
MTHFR C677T基因多态性对干预Hhcy后脑梗死复发的影响
