《医用基因工程》复习思考题
第一章 基因和基因组及基因工程的概念
一、 名词概念
① 移动基因(插入序列；转位子)；② 断裂基因；③ RNA剪辑；④ 内含子(间隔序列)与表达子；⑤ 重叠基因；⑥ 重复序列；⑦ 假基因；⑧ 启动子与终止子；⑨ 起始位点、终止位点。 二、 讨论题
1. 什么叫基因?何谓基因的新概念?基因的主要功能是什么? 2. 一种基因一种酶的提法妥否？ 3. 基因密码子三联体间是否存在着逗号？
4. 基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？
5. 何谓转位子和转位作用?转位的后果如何? 6. 基因中最小的突变单位和重组单位是什么？
7. 基因工程应包括哪些内容？何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明?
8. 真核细胞基因组中常有内含子存在，能否在原核细胞获得表达？能，为什么？不能，为什么？
第二章 基因工程中常用的工具酶
1. 什么是限制性核酸内切酶？ 2. 什么是R/M现象？如何解释？ 3. II型核酸内切酶的基本特点有哪些？
4. 影响II型核酸内切酶活性的因素有哪些？如何克服和避免这
些不利因素？
5. DNA连接酶有哪两类？有何不同？ 6. 甲基化酶有哪两类？有何应用价值？
7. 什么叫同尾酶、同裂酶？在基因工程中有何应用价值？ 8. 平末端连接的方法有哪些？(图示)
9. Klenow酶的特性和用途有哪些？举例说明。 10. 反转录酶的特性有哪些？有何应用价值？ 11. 列举碱性磷酸酶BAP/CAP的应用之一。 12. 列举末端核苷酸序列转移酶的应用之一。
13. 质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？
14. 基因片段与载体的平末端连接的方法有哪些？
15. 用寡核苷酸和衔接物DNA的短片段连接时为使基因内部的切点保护，常用何种办法解决？
第三章 基因克隆载体
1. 基因工程常用的载体有哪5种？其共同特性如何？
2. 什么是质粒？质粒分哪几种？有哪两种复制类型，质粒的分子生物学特性有哪些？
3. 质粒存在的三种形式是什么？ 4. 分离质粒的基本步骤有哪些？
5. 分离纯化质粒的方法有哪几种？简述CsCl密度梯度(浮密度)分离法、碱变性法的原理，如何选择合适的分离方法？
6. 作为理想质粒载体的基本条件有哪些？ 7. 什么叫插入失活，举例说明之。 8. 构建pBR322质粒载体的亲本质粒有哪些？
9. 什么叫插入型和替换型噬菌体载体?插入型和替换型入噬菌
体Cosmid容纳外源DNA的最大容量是多少？
10. 将外源性DNA克隆到上后，如何筛选重组噬菌体？
11. 简述细线状噬菌体M13在基因工程中的应用。 12. 什么是Cos质粒、Cos位点和Cos细胞？ 13. 什么叫cccDNA和ocDNA？
14. 酶母载体有哪三种类型？它们构成的成分各有哪些？什么叫穿梭载体？
15. 改造后的SV40载体有哪几种类型？各举例说明之。
-半乳糖苷酶失活的插入型入噬菌体
第四章 目的基因的分离和克隆
一、 名词解释
① 基因组文库；② cDNA文库。 二、 问答
1. 目的基因克隆时常用哪些方法分离和获得基因？ 2. 构建基因组库的意义及构建过程？
3. 构建cDNA文库的意义、常用载体及构建过程？
4. 目的基因与载体的连接方法有哪些？各有哪些优点？基因重组时在两个酶切位点中其中有一个不相匹配时，你如何解决连接问题？
5. 试述T-A克隆法的原理和用途？
第五章 重组DNA导入宿主细胞与转化子的筛选
一、 名词解释
① 转化；② 转染；③ 转导；④ -互补。 二、 问答
1. 重组DNA向宿主细胞的导入方法有哪些？
基因工程原理期末复习思考题
