乙烯利调控甘蔗基因差异表达研究

乙烯利调控甘蔗基因差异表达研究

作者：魏源文;邓智年;黄诚梅;李杨瑞

作者机构：广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,南宁,530007;广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,南宁,530007;广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,南宁,530007;广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,南宁,530007

来源：南方农业学报 ISSN：2095-1191 年：2011 卷：042 期：001 页码：6-10 页数：5

中图分类：S566.1 正文语种：chi

关键词：甘蔗;乙烯利;cDNA-AFLP;基因差异表达

摘要：[目的]建立并优化乙烯利调控甘蔗基因差异表达的cDNA-AFLP分析体系和银染体系,利用该技术对乙烯利处理的甘蔗进行基因差异表达研究,探讨乙烯利调控甘蔗生长的分子机理.[方法]以甘蔗品种ROC16为材料,在甘蔗生长40d左右时,叶面喷施200 mg/L乙烯利溶液(对照为清水)0、3、6、12、24、48 h后,分别取甘蔗叶片提取总RNA,建立cDNA-AFLP分析体系和银染体系;利用193对引物组合对乙烯利处理和对照的甘蔗叶片RNA混合池的样品进行差异表达分析,对部分差异转录片段进行回收、克隆、反向Northem杂交验证、序列分析和功能分析等.[结果]经eDNA-AFLP体系反应扩增,乙烯利处理和对照每个样品的扩增条带数均在35-80之间,处理和对照之间条带多态性明显.在反向Northem杂交验证分析中,24个测试样品中有11个无差异,假阳性率高达