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薄层色谱三种展开方式

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(2)CAMAG HPTLC VARIO系统

将10cm×10cm的高效薄层板用刮板设备分割成6条,在设备的一端有6个溶剂槽,可以分别放置6种不同的展开剂;在设备的另一端有一个展开剂槽,但有6条相应于薄层的凹槽,可以设计6种不同的预平衡条件,包括不同的溶剂蒸气和相对湿度,这样可以同时选择最佳的展开剂和预平衡条件。 (3)GAMAG VARIO KS Chamber

为20cm×20cm的普通薄层设计的水平展开室,见图7-3-21,这种展开室节约展开剂,对同一块板上的几条样品带可用几种流动相同时展开,便于选择最佳展开剂;可在展开时用适当的溶剂蒸气或水蒸气对薄层进行饱和,也可进行夹心展开。

(二)环形展开

展开剂自圆心向四周展开,U型展开室是为高效薄层环形展开专用的设备,见图7-3-22。

这种展开方式展距短、展速快、节约展开剂、分离效率高,圆心式展开时斑点的比移值(Rfe)与线性展开的比移值(Rf)间的关系为:(Rfc)2=Rf,因此适用于Rf值较小的组分的分离。 (三)反圆心式展开

反圆心式展开是样品点在薄层的周围,展开剂自四周向圆心展开,展速快,可提高Rf值较大组分的检测灵敏度和定量准确性;反圆心式展开的专用反) 型展开室见图7-3-23。

用于高效薄层的展开方式的比较见表7-3-3。

表7-3-3 HPTLC不同展开方式的比较(.chemalink.net/books/C/1238/0.html) (四)多次展开

1.单向多次展开(UMD)

这是多次展开中最简单的一种,当一次展开后化合物得不到很好的分离时,可将展开后的薄层除去展开剂,再用相同展开剂沿同一方向进行相同距离重复展开,这种操作可以反复进行直至分离满意为止。此法在纸色谱中曾被研究应用过。经过几次展开,斑点的比移值(nRf)可用下式表示:此处n为展开次数,用斑点间距离(△X)对展开次数n作图,可获得最佳间距的展开次数。一般二次展开即可,能得到最佳的分离,但还不能使斑点十分浓集。这种技术在薄层色谱中也得到广泛应用,Picman在硅胶板上用此法从银胶菊中分离了倍半萜酯异构体;从苍耳中分离了苍耳素和苍耳明。 2.增量多次展开(IMD)

此法是指在同一块薄层上,用同一种展开剂,沿同一方向,展距递增的重复展开。增量多次展开常采取增加薄层长度的分数展开方式(如展开至1/4,1/2,3/4 长度),以至最后为整个薄层长度。增量多次展开能提供比一般薄层色谱好得多的分离度,在短时间得到较多次展开,有利于斑点的浓集及Rf值较小的组分的分离。在固定条件下,狭窄的斑点意味着分离效率及灵敏度的增加。Szabady等人对他们的实验结果进行了数学论证,并将实验值与计算值进行了比较。

3.阶式展开

阶式展开也叫分级展开,也是多次展开的一种,当样品中存在的各成分的极性相差很大时,很难用一种展开剂在同一块薄层上得到分离。如用两种或两种以上极性不同的展开剂分别展开几次,则可以将极性相差很大的组分在一块薄层板上分离。利用此法进行分离的例子很多,其中以朱敏在高效薄层板上分离定量元中11种异喹啉生物碱的例子最为成功,作者第一次用乙醚-环己烷-甲醇(5:3:0.5)展开,除去展开剂后,用碘蒸气薰0.5min,在波长280nm处测定四

氢黄连碱、紫堇碱、延索乙素、毕扣扣灵及海罂粟碱等5种生物碱,扫描后将薄层放入氨气中薰10min,取出后稍挥一下表面蒸气;第二次用乙醚-环己烷-甲醇(5:3:0.5)展开,挥去展开剂后于波长280nm处测定原阿片碱、隐品碱及!( 别隐品碱等) 种生物碱;第三次用甲苯-氯仿-甲醇-二乙胺(7:2:1:0.3)展开,挥去展开剂后于350nm处测定黄连碱、小蘖碱及巴马亭3种生物碱。图7-3-24为不同品种元及11种异喹啉生物碱的薄层色谱图。

结果表明,不同种元中所含生物碱的种类及含量均有明显差异,从而造成质量上的差别,故所得结果对资源利用很有意义,也证明阶式展开是解决复杂多组分的一种简便有效的方法。

Matysik等报道的用阶式梯度薄层色谱分离洋地黄提取物中的地高辛等C 种洋地黄甙,

Markowski等用两步增量梯度展开分离上述化合物。Matysik在高效硅胶薄层板上,在水平展开室中用多次梯度展开分离了13种氨基酸的DABS(4,4N-二甲基氨基苯-4'-磺酰氯)衍生物,并与常规梯度展开进行比较,结果见图7-3-25、7-3-26,表7-3-4、7-3-5。

表7-3-4 常规4步梯度展开,每步板不干燥(.chemalink.net/books/C/1239/0.html)

表7-3-5 多次梯度4步展开(MGD),每步后板干燥(.chemalink.net/books/C/1240/0.html)

4.程序多次展开(PMD)

Perry等在总结多种展开方式的基础上,设计了程序多次展开的方法。此法由n次

薄层色谱三种展开方式

(2)CAMAGHPTLCVARIO系统将10cm×10cm的高效薄层板用刮板设备分割成6条,在设备的一端有6个溶剂槽,可以分别放置6种不同的展开剂;在设备的另一端有一个展开剂槽,但有6条相应于薄层的凹槽,可以设计6种不同的预平衡条件,包括不同的溶剂蒸气和相对湿度,这样可以同时选择最佳的展开剂和预平衡条件。(3)GAMAGVAR
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