过氧化氢酶（CAT）试剂盒说明书
一、 测定原理：
过氧化氢酶（CAT）分解H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止，剩余的 H2O2与钼酸铵 作用产生一种淡黄色的络合物，在 405nm处测定其变化量，可计算出 CAT的活力。试剂一
（ml）
二、 试剂组成与配制：
试剂一：液体100 ml XI瓶，4C保存6个月。 试剂二：底物液体 10 ml XI瓶，4 C保存6个月。
试剂三：显色粉剂 XI瓶，4C保存6个月。加双蒸水至100 ml溶解，4C保存1个月。（如 果底部有不溶粉末沉淀，直接取上清使用，不影响测定结果）
试剂四：液体10 ml XI瓶，4C保存6个月。天冷时会凝固，临用前 用。
三、 组织样本的检测
37C水浴至透明方可使
1、 组织匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量 （g）:体积（ml）=1 : 9的比例加入9倍体
积的生理盐水，冰水浴条件下，制备成10%的组织匀浆，2500转/分离心10分钟，取上清， 再用生理盐水稀释成最佳取样浓度，待测
（最佳取样浓度摸索减附录 ）。
2、 操作表：
对照管 组织匀浆（ml） 试剂一（37 C预温）（ml） 试剂二（37 C预温）（ml） 测定管 0.05 1.0 0.1 1.0 0.1 混匀，37C准确反映1分钟（60秒） 试剂三（ml） 试剂四（ml） 组织匀浆（ml） 1.0 0.1 1.0 0.1 0.05
混匀，波长405nm ,光径0.5cm，双蒸水调零，测定各管吸光度值。
注：一般样本没有高脂等导致显着差异情况，对照管的样本更换成双蒸水，做 可。如需做样本自身对照，则试剂盒所测定样本数量减至
1-2管对照即
48样。
3?组织中CAT活力的计算：
（1） 定义：每毫克组织蛋白每秒种分解 lumol的H2O2的量为一个活力单位。 （2） 计算公式： 组织匀浆中
* 1
CAT活力（U/mgprot）（对照0D值-测定0D值）271
注：*271为斜率的倒数 （3）计算举例：
取10%水稻叶片匀浆0.05ml做CAT检测，测得对照管吸光度为 0.605,测定管吸光度为0.332, 同时测得10%水稻叶片匀浆蛋白浓度为
丄
60取样量
待测样本蛋白浓度（mgprot/ml）
3.1303 mgprot/ml。则计算结果为：
1
组织匀浆中 CAT 活力（U/mgprot） 0.704 0.332
271
60 0.05
3.1303 10.7351U/mgprot
2个样本做对照或者用
注：1.测定血清和血浆时，如果样本不溶血，每批样本只需要随机挑
双蒸水代替额样本做对照；如果样本溶血的话，必须每个样本都要做对照。
2.测定组织匀浆时，如果样本不是高脂，每批样本只需要随机挑
水代替额样本做对照；如果样本高脂，必须每个样本都要做对照。
2个样本做对照或者用双蒸
3. 测定全血时，必需每个样本都要做对照。
过氧化氢酶CAT试剂盒说明书
