临床检验技士考试辅导
微生物检验
第二十六章 螺旋体及检验
本章内容 一、概述 二、疏螺旋体属 （一）伯氏疏螺旋体 （二）回归热螺旋体 （三）奋森螺旋体 三、钩端螺旋体 四、密螺旋体属 梅毒螺旋体 一、概述
螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状，运动活泼的原核细胞型微生物。 基本结构与细菌相似：
原浆柱=细菌菌体，由细胞壁，胞质膜及胞质内容物组成，胞质中含有核质（原始核）； 中轴丝=螺旋体的运动器官； 外膜=细菌荚膜相当。
螺旋体革兰染色阴性，但着色较困难。
以二分裂方式繁殖，对抗生素敏感。螺旋体所致疾病主要有性传播疾病和自然疫源性疾病。 螺旋体科有8个属，其中致病性螺旋体主要有3个属：疏螺旋体属，钩端螺旋体属，密螺旋体属。
二、疏螺旋体属 又称包柔螺旋体属。
螺旋稀疏，有3～10个螺旋，不规则呈波纹状，运动活泼。 对人致病的主要有伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体和奋森螺旋体。
（一）伯氏疏螺旋体 生物学特性
形态：螺旋稀疏，运动活泼。
染色：G，不易着色。Giemsa染色呈紫红色，Wright染色呈棕红色。 培养特性
营养要求：高，需长链饱和与不饱和脂肪酸、葡萄糖、氨基酸和牛血清蛋白等。 气体环境：微需氧，5%～10%CO2促进生长； 温度环境：适宜温度35℃；
菌落特征：生长慢；液体培养基中需培养2～3周可观察到生长情况。 微生物检验
标本采集：早期取皮损组织、淋巴结抽出液、血液、关节滑膜液、脑脊液和尿液等。 形态学检查：染色镜检；暗视野显微镜观察标本中螺旋体的形态和运动。 分离培养：改良的Kelly（BSK）培养基，33～35℃孵育。
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抗体检测：间接免疫荧光法、ELISA、免疫印迹技术。 核酸检测：PCR 动物实验 致病性及临床意义 莱姆病的病原体。 自然疫源性传染病。储存宿主主要是野生或驯养的哺乳动物。主要传播媒介是硬蜱，叮咬部位出现移形性红斑。未经治疗者发展至晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常。 （二）回归热螺旋体
回归热是一种由节肢动物传播的、有周期性反复发作的急性传染病。 引起该病的疏螺旋体有两种：回归热螺旋体，以虱为传播媒介，引起流行性回归热；赫姆疏螺旋体，以蜱为传播媒介，引起地方性回归热。 （三）奋森螺旋体
革兰染色阴性，专性厌氧。
常与梭杆菌寄生于人类口腔牙龈部。一般不致病，只有当人体抵抗力显著降低时，这两种菌大量繁殖，协同引起咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口腔炎等。
三、钩端螺旋体 生物学特性
形态：细长丝状圆柱形，螺旋盘绕细密而规则；在暗视野显微镜下，似细小珍珠排列成的细链，一端或两端弯曲成钩状。运动活泼，沿长轴作旋转、扭转及菌体伸缩匍匐状运动，因而常使菌体呈C、S、8等字形。
染色：G，不易着色。常用镀银染色法及荧光抗体染色法。Fontana镀银染色法染成深褐色。 -
培养特性 营养要求：较高； 气体环境：需氧；
温度环境：28～30℃；pH7.2～7.4，低于6.5、高于8.4生长不良。 菌落特征：
液体培养基：表面1cm内的部位生长最佳，28℃培养1周左右，呈半透明云雾状混浊。 含有兔血清（如Korthof培养基）和含白蛋白、脂肪酸的培养基：28℃培养2周后形成菌落。 抵抗力
耐冷，不耐热和干燥。对化学消毒剂极敏感。对青霉素、金霉素及庆大霉素极敏感，但对磺胺类药物耐药。 微生物检验
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标本采集：从临床标本、携带者和自然界的水中分离获得。发病1周内血液的阳性率高，1周后尿和脑脊液等的阳性率高。 形态学检查 分离培养
抗体检测：间接免疫荧光法、ELISA、免疫印迹技术。 核酸检测：PCR。 动物实验 致病性及临床意义
钩体病是一种典型的人、畜共患性疾病及自然疫源性疾病。临床常见的有黄疸出血型、流感伤寒型、肺出血型、脑膜脑炎型、肾功能衰竭型、胃肠炎型等。
鼠类和猪是最常见的储存宿主。钩体在感染动物的肾中长期存在，持续随尿排出，污染水源和土壤，人类主要感染途径是接触了疫水。
四、密螺旋体属
螺旋细密，有8～14个规则的螺旋，两端尖。
分致病性和非致病性两大类。对人致病的密螺旋体有苍白密螺旋体和品他密螺旋体两个种。苍白螺旋体又分为3个亚种：苍白亚种、地方亚种和极细亚种，它们分别引起人类梅毒、地方性梅毒和雅司病等。 梅毒螺旋体——生物学特性 形态与结构
形态：密螺旋体，菌体纤细，两端尖直，有8～15个呈锐角弯曲而规则的螺旋；在暗视野显微镜下观察，运动活泼，方式有蜿蜒前进，沿纵轴旋转或前后移行。
染色：不易着色，常用Fontana镀银染色法，染成棕褐色，菌体变粗易于查见。
培养特性
不能在人工培养基上生长繁殖。 抗原
特异性抗原：表面特异性抗原具属特异性，无种特异性。 类属抗原：可刺激机体产生沉淀素抗体或补体结合抗体。 抵抗力：
抵抗力极弱。对温度和干燥特别敏感。离体在外环境中1～2h即死亡。对常用化学消毒剂亦敏感。对青霉素、四环素、红霉素、庆大霉素均敏感。 梅毒螺旋体——微生物检验
标本采集：一期梅毒取硬下疳渗出液，二期梅毒取梅毒疹渗出液。 形态学检查：暗视野显微镜 核酸检测：PCR 血清学检测：
1）非密螺旋体抗原试验：多用牛心类脂质作为抗原，测定患者血清中的反应素（抗脂质抗体）。为非特异性试验。 ①性病研究实验室试验（VDRL）；②快速血浆反应素试验（RPR）；③不加热血清反应素试验（USR）。
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临床检验技士-微生物检验 讲义 26
