肠出血性大肠杆菌O157：H7 toxB基因的分片段克隆和
表达
张雪寒;栾晓婷;何孔旺;倪艳秀;周俊明
【期刊名称】《江苏农业学报》 【年(卷),期】2014(000)006
【摘要】Based on the toxB sequence on GenBank, six primers were designed to amp1ify the toxB gene. The PCR fragments and pGEX-4T-1 vector were digested with EcoRⅠ and XhoⅠ, 1igated with T4 DNA 1igase and transformed into the comp1ement BL21(p1ys)to construct recombinant BL21(p1ys)( pGEX-4T-1-toxB). After induced by IPTG, recombi-nant ToxB proteins were expressed. SDS-PAGE ana1ysis revea1ed that the mo1ecu1ar mass of six recombinant ToxB proteins were 8. 1×104, 8. 3×104, 8. 4×104, 8. 3×104, 8. 0×104 and 8. 7×104, respective1y. Western b1otting assay using rabbit sera against EHEC O157 : H7 as primary antibody indicated that a11 six recombinant proteins had good immunogenicities.%根据GenBank已有toxB基因全长序列,分别设计6对引物扩增toxB基因,克隆到质粒pGEX-4T-1,构建重组菌BL21(p1ys)(pGEX-4T-1-toxB),IPTG诱导表达重组蛋白质,用Western b1ot鉴定重组蛋白质免疫原性. toxB基因片段大小分别为1531 bp、1590 bp、1609 bp、1603 bp、1525 bp和1690 bp,重组蛋白质分子量分别为8.1×104、8.3×104、8.4×104、8.3×104、8.0×104和8.7×104.以兔源EHEC O157： H7抗血清为一抗,Western b1ot分析结果显示6个重组蛋白质均具有良好的
免疫原性.
【总页数】4页(1392-1395)
【关键词】肠出血性大肠杆菌O157:H7;toxB基因;表达;免疫原性 【作者】张雪寒;栾晓婷;何孔旺;倪艳秀;周俊明
【作者单位】江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏 南京 210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏 南京 210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏 南京 210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏 南京 210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏 南京 210014 【正文语种】中文 【中图分类】S852.61+2 【文献来源】
https://www.zhangqiaokeyan.com/academic-journal-cn_jiangsu-journal-agricultural-sciences_thesis/020123379324.html 【相关文献】
1.肠出血性大肠杆菌O157∶H7鞭毛可变区基因片段的克隆、表达与免疫原性 [J], 张雪寒; 倪艳秀; 周俊明; 俞正玉; 茅爱华; 吕立新; 何孔旺; 赵攀登; 栾晓婷; 叶青; 温立斌; 李彬; 王小敏; 郭容利
2.肠出血性大肠杆菌O157:H7溶血素保护性片段(HlyAN436)克隆、表达、初步纯化与生物学活性研究 [J], 程建平; 邹全明; 易勇; 毛旭虎; 马颖; 王庆旭; 丁红雷
3.肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7紧密粘附素免疫保护性片段(Intimin-C)的克隆表达纯化及部分生物学活性研究 [J], 易勇; 邹全明; 程建平; 毛旭虎; 朱永红
4.肠出血性大肠杆菌O157∶H7紧密黏附素免疫保护性片段的基因克隆与表达 [J], 易勇; 邹全明; 程建平; 毛旭虎; 曾明; 朱永红; 童文德
5.肠出血性大肠杆菌O157:H7 rfbE基因全长的克隆表达 [C], 张书萧; 刘喆; 邵东华; 王少辉; 李蓓蓓; 马志永
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肠出血性大肠杆菌O157：H7 toxB基因的分片段克隆和表达
