食用菌菌种制作技术
一、母种制作
生产上用的母种,不管是从外地引进的,还是自己分离的菌种,对母种的转接一般应控制在三代以内,且菌龄要适宜。优质母种的特征:菌丝洁白、浓密、粗壮、生长整齐,不产生色素,气生菌丝少,有菇香味。 1、 母种培养基常规配方:
马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂2O克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.50克,水1000毫升 PH值5.50~6.50。 2、 培养基的制备
选择未发芽、无病害、不发青的新鲜马铃薯洗净去皮,称取200克,切成薄片,装入铝锅中,倒入清水1500毫升,加热煮沸维持20~30分钟,至马铃薯稍烂为度,加热过程中稍加搅拌,然后用3层纱布过滤,取其滤液1000毫升,不足补水至1000毫升,在马铃薯汁液中加入琼脂(琼脂要事先剪短后,有温水浸泡),继续加热搅拌至琼脂完全溶化,最后加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁,用\试纸测定并调节\值。在正常操作的情况下\值常在要求范围内,常可忽略测定。分装在试管中,高度为试管高度的1/8~1/5,加棉塞,将塞好棉塞的试管每七支一把用牛皮纸包扎,防止棉塞受潮。然后放在高压锅内灭菌,打
开放气阀,当放气阀放出的气体成直线后,就关闭放气阀,这叫排放冷空气,再升压到0.10 5 M pA维持 3 0分钟,自然降温到指针为0时出锅,摆成斜面。 3 接种培养
首先将待要接种的母种、接种工具、酒精灯、消毒好的斜面试管、消毒用的75%的酒精棉球、消毒烟熏剂、打火机一同放入接箱内。然后点燃烟熏消毒剂,等烟熏剂点燃冒烟后,迅速关闭接种箱门,等药在接种箱内消毒半小时后,人才能进入接种箱内操作,接种:首先将要接的母种用接种针将母种斜面用针划成如绿豆大小的小块,左手握母种试管和一支待接空试管,右手拿接种针,用接种针勾一小块母种接入空试管的中央,有菌丝体的这面朝上,把试管塞用火消毒一下塞好管口,如此反复。接好种后将母种放入培养室内,温度23~25℃,空气相对湿度 65%左右培养 7~14天,菌丝长满培养基斜面,即可用来接原种。 二、原种的制作
制种原料的选择和配制对菌种生产的质量和使用效果有着直接的关系,常用的原料有小麦、玉米、棉籽壳、木屑等。 1 原种配方
⑴小麦(玉米)97%、石膏粉2%,红糖 1%、pH值 5.50~7。
⑵ 棉籽壳 82%、麸皮 15%、蔗糖1%、石膏粉 1%,石灰1%、加水120%~ 130%。
⑶木屑78%、麸皮 20%、蔗糖1%、石膏粉 1% 2 培养基的制备
⑴小麦(玉米)培养基的制备:将小麦(玉米)筛检干净,称量,置清水中浸泡2-4小时,将糖、小麦放入开水中边煮边搅动,随时检查煮的程度,特别是煮到15分钟后更要勤检查,待麦粒(玉米)无白心,熟而不烂(不能开花)时立即捞出,放在尼龙布或干净的水泥地上晾晒。见麦粒(玉米)表面没有多余的水分时,加入石膏粉、等,搅拌均匀,装瓶(用500克的罐头瓶或酒瓶或500毫升葡萄糖瓶,罐头瓶加两层报纸,上覆1张耐高温的塑料,用橡皮圈(自行车废内胎剪成)扎好,灭菌时要求压力在 0.10 5 M pA,维持 2小时,灭菌时应注意排冷空气的时间,注意不要超压,灭菌时间一定要精确。用手提高压锅消毒时注意水被烧干,灭菌1小时后停下来,待压力下降为0后加水,进行第二轮灭菌1小时。
⑵ 棉籽壳、木屑培养基的制备:先称取原料,将糖、石膏粉、石灰等先溶化,制成母液,按大约所需水稀释,然后将棉籽壳木屑拌湿,搅拌加麸皮,拌匀,用手紧捏培养料,以指缝中有水外渗而不往下滴为适宜。用14*28的聚丙烯高温菌种袋装装。装袋要压实,套上套盖,进入灭菌消毒,时间同上。
3 接种培养:将灭好菌的培养基出锅冷却至室温时进行接种,每只试管可接5~6瓶原种。培养条件同母种,一般经20~25天即可长满瓶子。若要发菌时间缩短,一瓶原种可上下接二点母种,注意:小麦原种培养到10~12天需摇瓶,然后再培养。优质原种的特征是菌丝洁白、整齐,瓶壁及表面布满菌丝,有菇香味。
3、栽培种的制作
⑴ 培养基制备及配方 同制原种。
⑵ 接种培养 首先用75%酒精或3%来苏儿擦手及原种瓶外消毒,然后用消毒的接种铲(锄*翻松原种,在接种箱内(超净工作台上)的酒精灯火焰上方倒少许原种于灭菌的瓶料中,每瓶原种接20~25瓶,培养条件同原种。一般20~25天即可长满,长满后应立即播种。若暂时不用,可在10~14摄氏度下干燥保存,时间不超过10天;2~4 摄氏度时保存不超过2 0天。经低温保存的栽培种,在使用前将菌种放在常温下恢复1~2天。
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