妊娠糖尿病患者脂肪组织中IRS-1、IRS-2、Omentin-1表达与胰岛素抵抗

妊娠糖尿病患者脂肪组织中IRS-1、IRS-2、Omentin-1

表达与胰岛素抵抗

杨 敏 张 静 赵喜花

【摘 要】摘 要 目的：探讨妊娠糖尿病患者脂肪组织中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、IRS-2及血清网膜素1(Omentin-1)的表达特征，分析与胰岛素抵抗的相关性。方法：选取50例妊娠糖尿病患者和50例正常孕妇分别纳入观察组和对照组。产前测定血清Omentin-1水平、空腹胰岛素(FIns)、空腹葡萄糖(FPG)水平，计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。分娩过程中采集大网膜脂肪组织，检测IRS-1、IRS-2蛋白表达水平。结果：观察组FPG、FIns、HOMA-IR水平均高于对照组，Omentin-1水平低于对照组(P＜0.05)，脂肪组织中IRS-1、IRS-2蛋白表达水平均低于对照组(P＜0.05)。HOMA-IR与Omentin-1、IRS-1、IRS-2均呈负相关(P＜0.05)，Omentin-1与IRS-1、IRS-2均呈正相关(P＜0.05)。结论：血清Omentin-1表达可激活胰岛素受体后信号传导通路，增加胰岛素敏感性，血清Omentin-1及脂肪组织中IRS-1、IRS-2表达降低均使胰岛素抵抗进一步加剧。

【期刊名称】《中国计划生育学杂志》 【年(卷),期】2024(027)009 【总页数】4

【关键词】关键词 妊娠期糖尿病；脂肪组织：胰岛素受体底物；网膜素1；胰岛素抵抗

妊娠期糖尿病(GDM)是临床较为常见的一种妊娠期并发症[1]，胰岛素抵抗、胰岛β细胞分泌不足被认为是主要病因。胰岛素抵抗是妊娠过程中正常的生理性

代谢变化，且随着妊娠进展而加重[2]。相比正常孕妇，GDM患者的胰岛素抵抗程度更严重，既往研究认为胰岛素抵抗的发生与妊娠期体内激素改变有关，胎盘分泌的激素及糖皮质激素发挥抗胰岛素作用，引起生理性妊娠期胰岛素抵抗，甚至引发GDM。胰岛素受体及其底物(IRS)是胰岛素信号传导过程中不可缺少的生物分子，有动物模型及临床研究显示[3]，IRS-1、胰岛素受体基因变异及其结构、功能改变与胰岛素抵抗密切相关。网膜素-1(Omentin-1)是由网膜脂肪组织特异性表达的一种细胞因子，与糖脂代谢疾病的发生密切联系，被认为是代谢异常疾病发生的高危因素之一[4]。为明确血清Omentin-1及脂肪组织中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、IRS-2表达水平与GDM患者胰岛素抵抗的相关性，本研究对妊娠糖尿病患者和健康孕妇进行了对照研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取在2016年12月—2024年12月在本院产科门诊规律产检并入院分娩的50例妊娠糖尿病患者及50例正常孕妇作为研究对象，分别纳入观察组与对照组。纳入标准：①单胎；②足月妊娠；③妊娠前无糖尿病、甲亢、甲减及其他内分泌、肝、肾、心、脑相关疾病；④检查前未应用过可影响糖脂代谢相关药物(如可的松、消炎痛、酚妥拉明等)；⑤GDM患者符合世界卫生组织制定的GDM诊断标准，并经75g OGTT确诊；⑥满足剖宫产指征行剖宫产术分娩；⑦签署知情同意书。排除标准：①多胎妊娠；②早产；③妊娠前明确诊断为糖尿病；④伴有其他内分泌、肝肾、心肺相关疾病；⑤不愿配合参与研究。本研究获得本院医学伦理委员会批准。 1.2 方 法

1.2.1 血清学指标检测 所有入组对象均在入院待产时进行血清学指标检测。采集空腹静脉血，己糖激酶法测定空腹血糖(FPG)，化学发光法测定空腹胰岛素(FIns)，根据计算公式(FPG×Fins/22.5)计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用酶联免疫双抗体夹心法测定血清Omentin-1水平，美国Millipore公司提供试剂盒，美国Imrk公司提供酶标仪。

1.2.2 脂肪组织IRS-1、IRS-2表达检测 均在分娩过程中采集研究对象5g大网膜脂肪组织，充分研磨分装到两支试管中保存。管1加入TRIzol裂解液，管2加入RIPA buffer、100μl蛋白酶抑制剂、10μl磷酸酶抑制剂，置-80℃待检。将管1放入液氮中匀浆，依次使用氯仿、异丙醇、75%酒精萃取沉淀，洗涤总RNA。Thermo Evolution 200紫外分光光度仪测定λ260nm/λ280nm纯度，计算总RNA浓度，取1μg总RNA进行逆转录，3倍稀释后取1μl c DNA PCR扩增，3孔重复。将管2冰上匀浆，离心5min(3000r/min)，吸取中层水溶部分物质BCA法测定蛋白质浓度。取蛋白质120μg，加入6倍上样缓冲液，放入水中煮沸5min，使蛋白质充分变性。聚丙烯胺凝胶电泳法对IRS-1、IRS-2蛋白电泳，使用PVDF膜孵育，再用通用二抗孵育，增强化学发光显色，底片曝光。Image J软件对图像灰度值分析计算蛋白相对表达量。 1.3 观察指标

比较两组血清FPG、FIns、HOMA-IR、Omentin-1水平；孕妇脂肪组织中IRS-1、IRS-2蛋白水平。分析HOMA-IR与血清Omentin-1及脂肪组织中IRS-1、IRS-2蛋白表达的相关性。 1.4 统计学方法

研究数据运用SPSS20.0软件处理，计量资料以(±s)表示，比较行t检验；采用