高锰酸钾滴定法
欧阳光明（2024.03.07）
1. 试剂配制：
(1)0.3%过氧化氢溶液： ①（1：100 30%的H2O2和水） ②（0.5molH2O2+49.5ml蒸馏水） ③（1ml30% H2O2+99ml蒸馏水） (2)3N硫酸：（10ml硫酸+50ml水）
(3)0.1N高锰酸钾溶液 ：（1.58gKMnO4+100ml蒸馏水） 2. 高锰酸钾的标定：
准确称取约0.2 g在110℃干燥至恒量的基准草酸钠。加入250 mL新煮沸过的冷水、10 mL硫酸，搅拌使之溶解。将草酸钠溶液加热到75℃~ 85℃ (即开始冒蒸气时的温度)，趁热用待标KMnO4 溶液进行滴定。开始滴定时反应速度很慢，待溶液中产生M n2+后，反应速度加快，但滴定时仍必须是逐滴加入，至溶液呈粉红色，半分钟内不褪色即为终点。注意滴定结束时的温度不应低于60℃。
2MnO4- + 5C2O42- + 16H+ 75~ 85℃ Mn 2+ +10CO2 + 8H2O。 参考：《高锰酸钾标准溶液标定方法的改进及注意事项》王继莲 3. 测定：
准确称取2 g风干土置100 mL锥形瓶→加入40 mL蒸馏水和5 mL0.3%过氧化氢（现配），另设对照 (40 mL蒸馏水和5 mL0.3%
过氧化氢)→在往复式振荡机上振荡20 min→加入5 mL3N硫酸（以稳定未分解的H2O2）→用慢速型滤纸过滤，→吸取25 ml滤液，用0.1N高锰酸钾的滴定至淡粉红色 4．结果计算
土壤的过氧化氢酶活性，以单位土重的0.1N KMnO4毫升数(对照与试验测定的差) 表示。 备注：
以容量法测H2O2的酶活：Kappen（1913）首先介绍硫酸存在下用高锰酸钾滴定剩余的过氧化氢测定酶活。此法根据H2O2与土壤相互作用时，未分解的H2O2的数量用容量法（常用高锰酸钾滴定未分解的H2O2）测定H2O2的酶活
2 KMnO4＋5H2O2＋3H2SO4→2MnSO4＋K2SO4＋8H2O＋5O2 土壤H2O2酶促过氧化氢的分解有利于防止它对生物体的毒害作用。
2024年土壤过氧化氢酶活性测定方法(完整)
