第十一单元 生物技术实践 第2讲 微生物的培养与应用
课时跟踪练
1．(2014·全国卷Ⅱ)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________________________________；
然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过____________灭菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是___________________。
(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。
解析：(1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间，观察空白平板上是否出现菌落。0.1 mL稀释液中平均有(39＋38＋37)/3＝38个活菌，则每毫升稀释液中活菌的数目为38/0.1＝380个，则稀释前每毫升水样中活菌数目为380×100＝3.8×104个，则每升水样中活菌数目为3.8×104×1 000＝3.8×107个。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较图A和图B可以看出：A培养基中细菌的分布呈线性，是用平板划线法接种培养后得到的结果；B培养基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌
体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。
答案：(1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107个 (2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧 营养物质
2．(2013·全国卷Ⅱ)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题：
(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用________法或________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
(2)取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培养基表面，在37 ℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B________；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明__________________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。
(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素________。
解析：(1)实验室中对微生物纯化培养时，常用的接种方法有划
线法和稀释涂布法。(2)若让已经获得的单个菌落在固体培养基上大量且均匀繁殖，常用涂布器把稀释的菌液均匀涂满整个平板。(3)对某种抗生素越敏感的致病菌，在该抗生素存在的范围内，越不易生存，形成的透明圈就越大。但是，如果在透明圈中还有菌落生存，则说明这个菌落的细菌耐药性很强。(4)通过(3)可知，在应用时，要想杀死某致病菌，就得选择能使该致病菌大量死亡，即产生的透明圈大的那种抗生素。
答案：(1)平板划线 稀释涂布(或涂布)
(2)涂布 (3)敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A的弱 耐药菌 (4)A
3．为了调查成都自来水的水质情况，某研究小组对自来水水样中的细菌含量进行了测定，请回答下列问题：
(1)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是____________。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿________培养。
(2)若小组采用平板划线法分离水样中的细菌，划线时落在培养基上共画了5个区域，则共需要________次灼烧接种环。该培养基从物理状态上看，属于________培养基。
(3)检测自来水中大肠杆菌的数量，可选用伊红美蓝培养基，伊红美蓝培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外，还可以提供______________等基本营养成分。该研究小组在统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因____________而遗漏菌落的数目，如果接种后一个平板经培养后的菌落分布如下图所示，推测接种时可能的操作失误是____________。
解析：(1)微生物的培养基常用高压蒸气灭菌法进行灭菌。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿倒置培养。
(2)因为每次划线前后都需要灭菌，所以画了5个区域需要6次灼烧接种环。平板划线法用的是固体培养基。
(3)微生物的培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源。在统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目，如果接种后一个平板经培养后的菌落分布如题图所示，推测接种时可能的操作失误是涂布不均匀。
答案：(1)高压蒸气灭菌 倒置 (2)6 固体 (3)氮源和无机盐(答不全不得分) 培养时间不足 涂布不均匀
4．(2017·赣州模拟)如图是分离、纯化及保存枯草芽孢杆菌菌株的过程示意图：将土壤表层土稀释液煮沸十五分钟(枯草芽孢杆菌的芽孢不会失去活性)静置5分钟后获得样品，进行如下操作：
高考总复习生物练习：第十一单元第2讲课时跟踪练
