第六课 紫外-可见分光光度法
一、概述
波长范围:紫外区200-400nm 可见光区400-760nm
能级跃迁类型:分子外层电子的能级跃迁 用途:定性、定量和结构分析
特点:灵敏度较高,检测限为10-4-10-6g/ml 相对误差一般为2-5% 适用样品?
二、紫外-可见吸收光谱
几种有机化合物的紫外-可见吸收光谱图。
1、吸收光谱的形成
分子内部三种运动形式和相应的能级
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电子能级——分子轨道能级
分子轨道能级示意图
◆不同分子轨道对应不同的能量,轨道的能级由低到高为s
吸收光谱的形成过程:
运动的分子外层电子--------吸收外来辐射------- 产生电子能级跃迁-------紫外-可见吸收光谱
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吸收光谱中吸收带位置和强度 电子跃迁 → 紫外-可见吸收光谱
◆吸收带的位置(最大吸收波长)是由电子跃迁能级间的能量差所决定,反映了分子内部能级分布状况,是物质定性的依据。
◆吸收谱带的强度(吸光系数)与跃迁几率有关,也是由物质的结构决定,也可作为定性的依据。 三、透光率和吸光度
透光率的负对数称为吸光度A(absorbance)
四、Lambert - Beer 定律 吸光度愈大,溶液对光的吸收愈多
溶液对光的吸收除与溶液本性有关外,还与入射光波长、溶液浓度、液层厚度及温度等因素有关。
式中A为吸光度,T为透光率,E为吸收系数,C为被测物质溶液的浓度,L为液层厚度。 1760年,Lambert从实验中找到了A与液层厚度的关系式: A=k1b
k1为与被测物性质、入射光波长、溶剂、溶液浓度和温度有关的常数
当入射光波长、溶剂和吸光物质种类、浓度和溶液的温度都一定时,该溶液的吸光度只与液层厚度成正比
1852年,Beer从实验中找到了A与溶液浓度的关系式:
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