《非小细胞肺癌EGFR基因突变检测中国专家共识》要点
近年来，表皮生长因子-酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKIs)等靶向药物已经成为晚期非小细胞肺癌（NSCLC)重要的治疗方式之一。在EGFR基因突变的晚期NSCLC患者，系列国际国内多中心临床研究已经证实EGFR靶向治疗能显著降低疾病进展或死亡风险、改善患者生活质量。而在EGFR基因未发生突变的肺癌患者中，临床研究证据提示不宜使用靶向药物。这些流程研究和系统分析均指出EGFR基因突变检测是晚期肺癌患者使用EGFR-TKIs治疗的先决条件。
鉴于多种原因，临床实践中EGFR基因突变的肺癌组织受检率并不高，导致基于驱动基因变异靶点的个体化治疗策略难以实施。多项回顾性和前瞻性研究表明，当肿瘤组织难以获取时，血液循环游离或肿瘤DNA（cf/ctDNA）检测是突变分析合适的替代选择。
一、肺癌的流行病学
二、EGFR基因突变和EGFR靶向治疗
肺癌患者EGFR基因敏感突变阳性率在高加索人群约为10%，在亚裔人群和我国均为50%左右。以组织和细胞学标本进行EGFR基因突变检测用于
指导NSCLC患者EGFR-TKIs治疗已在全球形成共识，成为标准的临床实践。
三、EGFR基因突变组织检测的指南推荐
四、EGFR基因突变组织检测现状
五、EGFR基因突变的血液检测
研究显示，大部分（并非全部）晚期NSCLC患者的血液中存在循环游离DNAA（cfDNA)。cfDNA主要来源于凋亡或坏死的细胞，包括正常细胞和肿瘤细胞，如果来自肿瘤细胞称为循环肿瘤DNA（ctDNA）。
与肿瘤组织相比，ctDNA中的EGFR基因突变检测具有高度特异性，但敏感度相对较低。
1. 血液EGFR基因突变检测的标本采集及处理： 血浆中ctDNA具有更高的检出率。在标本的采集、运输机贮藏过程中，防止游离DNA的降解是首要考虑的因素；其次，也应防止血液中的白细胞的裂解，避免因野生型DNA背景的增加导致ctDNA中的EGFR基因突变无法检测。
为了采集到最佳血浆标本用于后续提取游离DNA进行EGFR基因突变检
测，建议使用如下两种方法采集10ml全血并进一步分离血浆：⑴用含有游离DNA保护剂及肪细胞裂解保护剂的专用常温采血管采集全血后轻摇混匀，常温（6～30℃）放置不超过5～7d；以足够的离心力将全血充分离心两次，分离出不含细胞成分的血浆，放置于-70℃冻存直至DNA抽提，或直接进入DNA抽提步骤。⑵用常规EDTA抗凝管（严禁使用肝素抗凝管)采集全血后，两小时内以足够的离心力将全血充分离心两次，分离出不含细胞成分的血浆，放置于-70℃冻至DNA抽提，或直接进入DNA抽提步骤。
2. 血液EGFR基因突变检测的外周血游离DNA提取： 因ctDNA含量低，未了提高EGFR基因突变检出率，在临床允许的情况下，建议使用10ml全血分离出的血浆（4～5ml)。外周血游离DNA的提取有很多方法，建议采用国家药监部门批准的、大容量血浆游离DNA分离试剂盒。
3. 血液EGFR基因突变检测的方法： 推荐使用高敏感度的检测方法用于ctDNA样本的EGFR基因突变检测。
目前，检测基因突变最常用的方法是扩增阻遏突变系统（ARMS法）。检测必须在具有资质的检测中心进行。检测方法必须进行严格的验证及质控。检测试剂须使用经CFDA批准的检测试剂盒。
本共识的专家组也推荐EGFR基因突变检测应在具有资质的检测中心进
行，检测方法必须进行严格的验证及质控。检测试剂须使用经CFDA批准的检测试剂盒。
六、EGFR基因突变检测报告及周期
基因突变检测的报告应包括检测结果（建议包括明确的病理诊断剂专业的书写）及对结果的诠释，且能够被肿瘤科医师或其他非病理专业的医师理解。
从接受标本到发出报告周期，建议不超过3～5个工作日，以及时满足临床的需求。
七、血液EGFR基因突变检测发展与展望
血液检测EGFR基因突变用于筛选EGFR-TKIs适治患者是对组织检测的重要补充。血液检测还可以动态监测靶向治疗过程中肿瘤标志物变化，特别是可用于发现新出现的耐药相关基因变异。
血液检测用于指导晚期NSCLC有望实现，但诊断早期NSCLC有待检测技术的发展和进步。
未来，期待通过多元基因检测平台及技术不断发展与成熟，血液驱动基因
突变可实现从定性到定量检测、从静态至动态监测、从单基因到多基因、基因组/外显子组检测的转变，从而推动NSCLC精确靶向治疗的不断进步。
八、总结
当肿瘤组织难以获取时，血液是EGFR基因突变检测合适的替代材料，也是对可疑组织检测结果的补充；血液EGFR基因突变检测可用于对肺癌分子分型、疗效预测和疾病监控；目前成熟且最常用的血液EGFR基因突变检测方法是ARMS法；但是当肿瘤组织可以获取时，肿瘤组织仍应是优先选择的生物样本用于基因状态分析。随着检测技术的不断发展，期望在保证现有的检测特异性和预测准确性的基础上，不断提高血液EGFR基因突变检测的灵敏度，有助于整体上提高我国肺癌患者EGFR基因突变受检率，从而使更多的患者接受精准靶向治疗。
《非小细胞肺癌EGFR基因突变检测中国专家共识》要点
