微柱凝胶法与经典抗球蛋白法鉴定 RhD变异型的结果比较
李敏 杨春晴 赵玲 宿军 车玲玲 【期刊名称】临床输血与检验 【年(卷),期】2012(014)004 【总页数】2
【关键词】【关键词】微柱凝胶法 抗球蛋白法 RhD 变异型
RhD抗原在不同类型红细胞上表达的强度不均一，从很强的 D到弱 D，最弱的是 Del。 RhD变异型包括 D抗原增强和D抗原减弱，增强的 D抗原可以直接在盐水中凝集 IgG抗-D;减弱的 D抗原包括弱 D、不完全 D(部分 D)，可以通过RhD阴性确认实验或吸收放散实验检出[1]。无论是增强的D抗原还是减弱的D抗原都属于RhD变异型。本文所收集7例 RhD变异型标本均是通过 RhD确认实验检出，均属于RhD抗原表现减弱一类，因使用了不同方法，凝集强度不尽相同，现将结果报告如下。
材料与方法
1 标本来源 本站检验科 2010年1～11月初筛的 419例RhD阴性标本。 2 试剂 单克隆 Ig G/IgM抗-D(批号 1059062，印度圣罗兰公司 );单克隆 IgG抗-D(批号 20090729，20100210)，单克隆 IgM抗 -C(批号 02000001，02300001)、 -c(批号 00800002，20103102)、 -E(批 号 09000003，1020010)、-e(批 号00700001，20103301)，抗 人 球 蛋 白 (批 号 20090720，20091209)均由上海血液生物医药公司提供;抗-A、-B标准血清 (批号 20090713，20091120，长春博德生物技术公司 );DG Gel Coombs卡 (批号 10015.01，10060.01)，筛选细胞(批号 10001.01-10009.01)，由西班
牙 Grifols公司提供;Ac、 Bc、 Oc(本室自制 )。 3 方法
3.1 微柱凝胶法 平行向后撕去 Coombs卡上锡纸膜，每孔加入配置好的 0.8%～1%受检者红细胞悬液1滴并做好标记 ，相应孔内加入单克隆 IgG/IgM抗-D、单克隆 IgG抗-D血清各 1滴，将卡放入干式孵育器内 37℃15 min，取出微柱凝胶卡990 r/min离心9 min，观察并记录结果，按照说明书的判断标准判定每个孔的凝集强度。
3.2 经典间接抗球蛋白试验 按文献[2]方法进行。
结 果
1 凝胶微柱法与经典抗球蛋白法的检测结果见表 1。
2 7例标本用单克隆 IgG/IgM抗-D血清做确认试验时，只有 3号标本凝胶微柱法呈3+凝集，经典抗球蛋白法呈2+凝集，其余标本两种方法均为阴性，但用此种 IgG/IgM抗-D血清对其余 6例做吸收放散试验，结果均能检测到RhD抗原。
讨 论
临床输血工作中，真正的RhD阴性血不论用于 RhD阴性患者还是用于 RhD阳性患者都不会产生溶血性输血反应。RhD变异型若被定为RhD阴性而输给RhD阴性患者有可能发生免疫应答，导致再次输血可能发生输血反应。若供血者是弱 D型，其血液应当做 RhD阳性血使用;若患者是弱 D型，应视作 RhD阴性而输注 RhD阴性血。因此，RhD阴性确认试验应当尽可能将真正的阴性者筛选出来，这就迫切需要一种灵敏度高、稳定性好的试验方法。
微柱凝胶分中性胶、特异性胶和抗人球蛋白胶，分别用于不同的血型血清学试
验。在抗人球蛋白凝胶实验中，凝胶中含有球蛋白抗体，可用于检测 IgG类不完全抗体和相应红细胞抗原的反应，如交叉配血、不规则抗体检定和鉴定，以及用于人血清抗-D血型筛查等。本实验采用的微柱凝胶为人球蛋白胶。微柱凝胶法具有简便、准确、敏感、标本用量少、结果保存时间长、标准化、安全的特点，笔者在实验过程中深刻体会到微柱凝胶法的这些特点。
由表 1可见 ，使用单克隆 Ig G抗-D试剂检测时，两种方法下 7例标本凝集强度均有 1+～2+差异，这与已有的报道基本一致[3]。在使用 IgM/IgG抗-D试剂时，尽管两种方法都只检出 1例 RhD变异型，但微柱凝胶法仍强1+。可以得出这样的结论:在操作人员、使用试剂、方法相同的情况下，微柱凝胶法对D抗原减弱的RhD变异型凝集强度要高于经典抗球蛋白法，微柱凝胶法敏感度更高;使用试剂、方法相同 ，操作人员不同的情况下，经典抗球蛋白法有 3例漏检 ，微柱凝胶法的结果均相同，且未有漏检，微柱凝胶法检测的特异性强，重复性好。实际操作中，笔者建议初筛为阴性的标本先用微柱凝胶法做确认试验，检出的 RhD变异型再用经典抗球蛋白法做确认，排除假阳性，必要时重复实验。 参考文献
1 杰夫.丹尼尔 [英 ]，主编 .朱自严，主译.人类血型 [M].北京:科学出版社，2007:246-259.
2 中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M].第 3版 ，南京:东南大学出版社 ，2006:254.
3 李勇，马学严.实用血液免疫学 [M].北京:科学技术出版社 ，2006:565-566，568-569.
DOI:10.3969/j.issn.1671-2587.2012.04.026
微柱凝胶法与经典抗球蛋白法鉴定RhD变异型的结果比较
