310bp的DNA片段中。正常纯化个体的基因经过酶切只能形成两种长度的DNA片段，杂合子的基因经过酶切后可形成四种长度的DNA片段，因此图2四名女性中Ⅰ-1、Ⅱ-3、Ⅱ-4是杂合子。
②已知女性每个细胞所含两条X染色体中的一条总是保持固缩状态而失活,其失活染色体上的基因无法表达的原因是染色体呈固缩状态无法解旋进行转录。
③以mRNA为模板合成cDNA的过程称为逆转录。表1中，Ⅱ-3、Ⅱ-4个体突变基因的表达量明显高于正常基因，由此可推断Ⅱ-3、Ⅱ-4发病的原因是来自父方的X染色体失活概率较高，以突变（Xd）基因表达为主。
（3）ALD属于遗传病，通过遗传咨询和产前诊断可以对该病进行监测和预防。该病为伴X染色体隐性遗传病，图1家系中Ⅱ-1(不携带d基因，基因型为XDXD)与Ⅱ-2（XdY）婚配后，所生男孩的基因型均为XY，不患病；所生女孩的基因型均为XX，其是否患病取决于X染色体失活情况，因此不一定患病。
【点睛】本题关键要看懂酶切基因的电泳图谱，结合题干信息“正常基因含一个限制酶切位点，突变基因增加了一个酶切位点”，分析确定正常基因酶切只产生两个DNA片段，而突变基因会产生3个DNA片段，进而分析出图谱中相应个体的基因组成。
11.豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素（多肽，天然食品防腐剂）对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：
①豆浆变质处理：将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中，密封、37℃条件下放置7d后，豆浆发生变质。
②腐败细菌的初步分离和计数：取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段时间后，统计各培养基上菌落种类和数量。结果如表： 细菌菌落特征 序号 S1 S2 S3
D
Dd
菌落直径/mm 表面有白色绒毛，圆形边缘不规则 白色，表面无绒毛，有白色液滴 黄色，表面无绒毛，如同黄色液斑 5 1-2 20-30 菌落数/个 豆浆A 5 18 11 豆浆B 自制豆浆 3 11 7 7 24 15 - 11 -
③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果：以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处理后，在37℃下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图：
（1）日常生活中经常用到消毒方法是______________，步骤②中培养基的灭菌方法是_________________________。
（2）步骤②中适宜采用的接种方法是__________，固体培养基制备的步骤为
____________________。培养中统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止____________________________。
（3）步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是___________，为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在________mg?kg左右。
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（4）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是__________________。
【答案】 (1). 煮沸消毒法 (2). 高压蒸汽灭菌法 (3). 稀释涂布平板法 (4). 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 (5). 因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目 (6). S1 (7). 250 (8). 食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群 【解析】 【分析】
由题文描述可知：该题综合考查学生对微生物的实验室培养基、微生物的分离和计数等相关知识的识记和理解能力，以及对实验结果的分析能力。
【详解】(1) 日常生活中经常用到煮沸消毒法。在实验室中，通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。
(2) 步骤②需要对“腐败细菌进行初步分离和计数”，因此适宜采用的接种方法是稀释涂布平板法。固体培养基制备的步骤为：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。为了防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目，统计菌落的种类和数量时要每隔24h观察统计一次，
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直到各类菌落数目稳定为止。
(3) 分析曲线图可知，随着乳酸链球菌素添加量的增大，S1细菌数量的相对值最高，由此表明最能耐受乳酸链球菌素的细菌是S1。当乳酸链球菌素添加量为250mg．kg-1后，细菌数量的相对数值不再随乳酸链球菌素添加量的增大而降低；可见，为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在250mg．kg左右。
(4) 乳酸链球菌素是一种由34个氨基酸组成的多肽，食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群，这正是使用乳酸链球菌素防腐比使用抗生素防腐的优点所在。
【点睛】解答本题的关键是识记并理解实验室常用的灭菌方法、固体培养基的配制流程、纯化微生物时常用的接种方法等相关知识、形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题意和曲线图中提取有效信息进行相关问题的解答。
12.胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。如图是利用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程示意图。请据图分析回答下列问题：
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(1)过程②称为__________。若将某种生物发育的某个时期的mRNA经过程②产生的多种互补DNA片段与载体结合后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体称为这种生物的_______文库。 (2)________(填“能”或“不能”)用人体皮肤细胞来完成过程①，简述理由_____________。 (3)与基因组文库的基因相比，由过程④获得的目的基因中不包含________________。 (4)在基因工程操作步骤中，获得A的步骤称为________________，A的名称是____________。 (5)该目的基因在大肠杆菌表达出来的产物却没有生物活性，其主要原因是_______________。 【答案】 (1). 反(逆)转录 (2). cDNA (3). 不能 (4). 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达，不能形成胰岛素mRNA (5). 启动子、内含子(或非编码DNA片段) (6). 基因表达载体的构建 (7). 重组质粒(或基因表达载体) (8). 大肠杆菌细胞中没有内质网和高尔基体，无法对核糖体合成的肽链进行加工 【解析】 【分析】
本题以图文结合的形式，考查学生对基因工程的基本操作程序等相关知识的识记和理解能力，以及识图分析能力。
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【详解】(1) 过程②是以胰岛素mRNA为模板合成DNA的过程，此过程称为反(逆)转录。在生物的个体发育过程中，由于基因的选择性表达导致细胞发生分化，细胞中的mRNA只是部分基因转录形成的，所以通过逆转录方法合成的目的基因只包含该生物的部分基因。可见，若将某种生物发育的某个时期的mRNA经过程②产生的多种互补DNA片段与载体结合后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体称为这种生物的cDNA文库。
(2) 过程①表示从人的胰岛细胞中提取胰岛素mRNA。由于皮肤细胞中的胰岛素基因未表达，不能形成胰岛素mRNA，所以不能用人体皮肤细胞来完成过程①。
(3)与基因组文库的基因相比，由过程④（通过逆转录方法）获得的目的基因中不包含启动子、内含子(或非编码DNA片段)。
(4) A是由目的基因与质粒结合而成，其名称是重组质粒或基因表达载体。在基因工程操作步骤中，获得A的步骤称为基因表达载体的构建。
(5) 胰岛素属于分泌蛋白，在胰岛B细胞的核糖体中合成的肽链，需经过内质网的初步加工与高尔基体的进一步修饰加工后，才能形成具有生物活性的胰岛素。因大肠杆菌细胞中没有内质网和高尔基体，无法对核糖体合成的肽链进行加工，所以该目的基因在大肠杆菌表达出来的产物（胰岛素）没有生物活性。
【点睛】解答本题的关键是识记并理解基因工程的基本操作程序，并与原核细胞的结构及分泌蛋白的合成与运输过程建立联系。在此基础上，结合问题情境，从题图和题意中提取有效信息，准确判断图中数字所示过程，进而对相关问题进行解答。
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四川省宜宾市叙州区第一中学2019届高三生物适应性考试试题(含解析)
