植物组织培养技术实验指导

植物组织培养技术实验指导

马铃薯生产与加工教研室编写

生化系

2013.09

目 录

实验实训一 组培实验室的识别与设计...................................................................... 3 实验实训二 组培常用设备仪器的使用...................................................................... 4 实验实训三 玻璃器皿及用具的洗涤.......................................................................... 6 实验实训四 MS培养基母液的配制 ......................................................................... 10 实验实训五 MS固体培养基的配制与灭菌 ........................................................... 14 实验实训六 试管苗的茎段转接（继代培养）........................................................ 16 实验实训七 试管苗叶片接种.................................................................................... 18 实验实训八 茎尖、茎段外植体接种培养................................................................ 20 实验实训九 外植体叶片接种培养............................................................................ 22 实验实训十 生根培养.............................................................................................. 24 实验实训十一 驯化.................................................................................................. 25 实验实训十二 微茎尖脱毒培养................................................................................ 27 实验实训十三 花器官的培养.................................................................................... 28 实训十四 胚和种子培养............................................................................................ 30

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实验实训一 组培实验室的识别与设计

一、实训目标

能够正确识别组培实验室及育苗工厂的基本组成并能叙述其主要功能。 二、实训内容

通过参观或观看组培实验室和育苗工厂的录像，掌握实验室的基本结构和各区的主要功能。 三、实验器材和试剂

准备设计平面图所需的铅笔、红蓝记号笔、尺、纸、橡皮等文具用品或直接用CAD软件进行组培实验室和育苗工厂的设计和绘图。 四、实验内容和步骤

在教师带领下对组培实验室的各个分区进行参观，并讲解其功能或观看录像，然后自己动手设计实验室。

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实验实训二 组培常用设备仪器的使用

一、实训目标

认识植物组织培养必需的仪器、器皿，掌握几种主要设备的使用方法。

二、实训内容

植物组织培养必需仪器的使用 三、实验器材与试剂 （一）常用仪器 1.蒸馏水器

2.手提式高压消毒锅、立式高压消毒锅

3.天平，包括药物天平、粗天平（1/10）、分析天平（精密度1/10000） 4.超净工作台 5.电热干燥箱（烘箱） 6.恒温光照培养箱 7.电冰箱

8.显微镜和解剖镜，包括手提式解剖镜、立体解剖镜和普通显微镜

9.离心机（学习、使用、操作） （二）必要的器皿、器械

1.玻璃器皿，具体包括试管、三角烧瓶（锥形瓶）、培养瓶（罐头瓶）、培养皿、凹面载玻片

2.盛装器皿，具体包括试剂瓶、烧杯、计量器皿、量筒、容量瓶、吸管、移液管

3.其他器皿，具体包括滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。

4.金属器械

镊子类：20~25cm长形镊子（接种或转移愈伤组织）、尖端弯曲的枪形镊子（夹取较小的植物组织）、尖头钟表镊子和鸭嘴镊子（剥离表皮用）、尖端为小铲状镊子（挖取带琼脂培养基的培养物）。

解剖刀和刀类：眼科用刀、种牛痘疫苗的菱形刀（切割柔软组织中的小细胞团）、解剖刀（手术刀）、双面刀片焊接在玻棒上（切取茎

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尖用）、锋利小刀、大刀和小铁锹。

剪刀类：解剖剪、眉剪、眼科剪、10~25cm弯头剪、修枝剪。 接种针

四、实验内容与步骤

教师讲解并示范后，指导学生正确地按规程进行下列设备仪器的操作使用：

1.学习操作蒸馏水器；

2.学习使用、操作手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅； 3.学习使用、操作分析天平； 4.学习使用、操作超净工作台； 5.学习使用、操作恒温光照培养箱； 6.学习使用、操作手提式解剖镜； 7.学习使用、操作离心机；

8.学习使用、操作量筒、容量瓶、吸管、移液管； 9.学习使用、操作精密pH4~7试纸。 五、作业

将实验整理成实验报告

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