红千层ISSR反应体系的优化
李伟;何桥;赵新成;梁国鲁
【期刊名称】《西南园艺》 【年(卷),期】2006(034)003
【摘要】以红千层(Callistemon rigidus R.Br.)的幼叶为材料,利用正交试验设计,对ISSR反应体系中的主要影响因子进行优化筛选,研究了Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTPs、引物、模板DNA浓度5种因素对扩增结果的影响,同时研究了退火温度和循环次数对PCR扩增结果的影响.实验结果表明,在25μL ISSR反应体系中各组分的最适浓度分别为:1×PCR buffer,2.5 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs,0.4μmol/L引物,1.2 ng/μL模板DNA,0.5 U TaqDNA聚合酶.通过梯度PCR测验,适宜的退火温度为50℃,循环次数45次.并且在红千层ISSR分析中,带纹清晰,稳定性好. 【总页数】4页(1-4)
【关键词】红千层;ISSR;正交设计;梯度PCR 【作者】李伟;何桥;赵新成;梁国鲁
【作者单位】西南大学园艺园林学院,重庆,400716;西南大学园艺园林学院,重庆,400716;西南大学园艺园林学院,重庆,400716;西南大学园艺园林学院,重庆,400716 【正文语种】中文 【中图分类】S685 【相关文献】
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红千层ISSR反应体系的优化
