以定向改造蛋白质，也能创造出自然界中不存在的蛋白质，D错误。
9．下列关于基因定点诱变技术的说法，正确的是( ) A．对任何蛋白质的改造都可以用基因定点诱变技术
B．对于已知空间结构的蛋白质的改造可以采用基因定点诱变技术 C．基因定点诱变技术是蛋白质工程中必须用到的技术 D．采用基因定点诱变技术通常可以改变蛋白质中多种氨基酸
解析：选B。基因定点诱变技术是“小改”时所用的一项技术，是有目的地改造蛋白质分子中某活性部位的一个或几个氨基酸残基，是改变蛋白质结构的核心技术之一，主要应用于空间结构已知的蛋白质。对于空间结构未知的蛋白质用非定点诱变技术来进行蛋白质的改造。
10．下列关于蛋白质工程的进展和应用前景的叙述中，不正确的是( )
A．通过对基因结构的定点突变实现玉米赖氨酸合成的关键酶结构的改变属于蛋白质工程
B．将人的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内，使大肠杆菌生产人的胰岛素的技术属于蛋白质工程
C．对蛋白质进行分子设计必须从蛋白质的功能特点入手
D．通过对基因结构的改造生产出自然界中从未存在的蛋白质种类目前还很少 解析：选B。蛋白质工程实质是通过对基因结构的改造来实现对蛋白质的改造的技术，故A正确；将人的胰岛素基因导入大肠杆菌，生产的仍然是人的胰岛素，并没有产生自然界不存在的蛋白质，故B错误；蛋白质工程的途径是从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的核糖核苷酸序列，然后找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列，故C正确；通过基因结构的改造生产出的自然界不存在的蛋白质产品较少，故D正确。
11．猪的胰岛素用于降低人体血糖浓度效果不明显，原因是猪的胰岛素分子中有一个氨基酸与人的不同。为了使猪的胰岛素用于临床治疗糖尿病，用蛋白质工程中的蛋白质分子设计的最佳方案是( )
A．对猪的胰岛素进行一个不同氨基酸的替换
B．将猪的胰岛素和人的胰岛素进行拼接组成新的胰岛素 C．将猪和人的胰岛素混合在一起治疗糖尿病 D．根据人的胰岛素设计制造一种全新的胰岛素
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解析：选A。因为猪的胰岛素分子中只有一个氨基酸与人的胰岛素不同，所以用蛋白质工程中的蛋白质分子设计，只需替换这一个不同的氨基酸即可。虽然根据人的胰岛素分子的结构设计一种全新的胰岛素也可以用于临床治疗，但分子设计和胰岛素的生产方面存在很多困难，所以不是最佳方案。
12．科学家为提高玉米中赖氨酸含量，计划将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中104位的氨基酸由天冬酰胺变成异亮氨酸，就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍。下列对蛋白质的改造，操作正确的是( )
A．直接通过分子水平改造蛋白质 B．直接改造相应的mRNA C．对相应的基因进行操作 D．重新合成新的基因
解析：选C。蛋白质工程的目的是对蛋白质进行改造，从而使蛋白质功能可以满足人们需求。而蛋白质功能与其高级结构密切相关，蛋白质高级结构又非常复杂，所以直接对蛋白质改造非常困难，而蛋白质是由基因控制合成的，对基因进行操作却容易得多。另外，改造后的基因可以遗传，如对蛋白质直接改造，即使成功也不能遗传。
二、非选择题
13．糖尿病是近年来高发的“富贵病”，常见类型有遗传型糖尿病和Ⅱ型糖尿病。遗传型糖尿病的主要病因之一是胰岛受损。科研机构作出如下设计：取糖尿病患者的细胞，将人的正常胰岛素基因导入其中，然后做细胞培养，诱导产生胰岛组织，重新植入患者的胰岛，使胰岛恢复功能。Ⅱ型糖尿病需要注射胰岛素治疗。目前临床使用的胰岛素制剂注射后120 min后才出现高峰，与人体生理状态不符。科研人员通过一定的工程技术手段，将胰岛素B链的28号和29号氨基酸互换，获得了速效胰岛素，已通过临床试验。请回答下列相关问题：
(1)对遗传型糖尿病进行基因治疗的方案中，胰岛素基因称为________________，实验室中要先对该基因利用__________技术进行扩增。将该基因导入正常细胞所用的方法是________。
(2)对遗传型糖尿病患者进行治疗的基因工程步骤中的核心步骤是________________。 (3)科研人员利用蛋白质工程合成速效胰岛素，该技术的实验流程为：
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其中，流程A是____________________，流程B是__________________。
(4)与基因工程相比，蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因________或基因______，对现有蛋白质进行________，制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产生活需要。
解析：(1)根据题意在进行基因治疗时，胰岛素基因是目的基因，在体外条件下可利用PCR技术对其进行扩增，在基因工程中将目的基因导入动物细胞的常用方法是显微注射法。
(2)基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建。
(3)根据蛋白质工程的流程示意图，可知流程A是根据预期蛋白质的功能设计蛋白质的三维结构，然后推测相应的氨基酸序列，最后找到对应的脱氧核苷酸序列。
(4)与基因工程相比，蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产生活需要。
答案：(1)目的基因 PCR 显微注射法 (2)基因表达载体构建(目的基因与运载体结合) (3)预期蛋白质的功能 相应的氨基酸序列 (4)修饰 合成 改造
14．胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射到人体后，会堆积在皮下，需经较长的时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易分解，因此，治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计速效胰岛素的生产过程，请据图回答下列有关问题：
(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛素模型的主要依据是________________________________________________________________________。
(2)通过DNA合成形成的新基因应与________结合后转移到______________________中才能得到准确表达。
(3)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素，需用到的生物工程有________、________和发酵工程。
(4)图解中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是什么？
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解析：(1)蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质结构进行分子设计，因此，图中构建新的胰岛素模型的依据是胰岛素的预期功能，即速效胰岛素。(2)合成的目的基因应与载体结合，构建基因表达载体后导入受体细胞中才能得以表达。(3)利用蛋白质工程生产自然界原本不存在的蛋白质，需对原有胰岛素进行改造，根据新的胰岛素模型中氨基酸的序列推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，人工合成新的胰岛素基因即形成目的基因，改造好的目的基因需通过基因工程来生产基因产物，并且在生产过程中要借助工程菌，所以还需要进行发酵，因此该过程涉及蛋白质工程、基因工程和发酵工程。(4)由新的蛋白质模型到构建新的基因，其基本设计思路是根据新的蛋白质中氨基酸的序列，推测出基因中的脱氧核苷酸序列，然后用DNA合成仪直接合成出新的基因。
答案：(1)蛋白质的预期功能 (2)载体 大肠杆菌等受体细胞 (3)蛋白质工程 基因工程
(4)根据新的胰岛素模型中氨基酸的序列，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后利用DNA合成仪来合成出新的胰岛素基因。
15．凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达。下图是基因工程中获得的基因和构建重组质粒过程，请回答有关问题：
(1)分析上图可知，构建重组质粒(如图所示)最好选用________限制酶，理由是________________________________________________________________________。
(2)工业生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，将目的基因导入大肠杆菌或芽孢杆菌前所做的具体处理方法是____________________。现在生产凝乳酶多采
用
酵
母
菌
，
酵
母
菌
作
为
受
体
细
胞
的
优
势
是
________________________________________________________________________。
(3)研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是____________，该生物工程技术的原理是__________________，实质是________________。
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(4)基因工程的最后一步中，目的基因能否在生物体内稳定遗传的关键是________________________，检测目的基因是否转录出了mRNA 所用的探针是用______________(填“DNA”“RNA”或“蛋白质”)制作的。
答案：(1)BamHⅠ和PstⅠ 防止目的基因与载体反向连接
(2)用钙离子处理细胞，使之转化为感受态细胞 含有的内质网和高尔基体可对蛋白质进行加工和修饰
(3)蛋白质工程 中心法则的逆推 改造基因
(4)检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 DNA
16．地中海贫血症属于常染色体遗传病，一对夫妇生有一位重型β地中海贫血症患儿，分析发现，患儿血红蛋白β链第39位氨基酸的编码序列发生了突变(C→T)。用PCR扩增包含该位点的一段DNA片段1，突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和s；但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切，如图甲。目前患儿母亲再次怀孕，并接受了产前基因诊断。家庭成员及胎儿的PCR扩增产物酶切电泳带型示意图见图乙(终止密码子为UAA、UAG、UGA)。
(1)在获得单链模板的方式上，PCR扩增与体内DNA复制不同，前者通过______解开双链，后者通过________解开双链。
(2)据图分析，胎儿的基因型是______(基因用A、a表示)。患儿患病可能的原因是________的原始生殖细胞通过__________过程产生配子时，发生了基因突变；从基因表达水平分析，其患病是由于____________________________________________。
(3)研究者在另一种贫血症的一位患者β链基因中检测到一个新的突变位点，该突变导致β链第102位的天冬酰胺替换为苏氨酸。如果__________________________________，但______________________________，则为证明该突变位点就是这种贫血症的致病位点提供了一个有力证据。
解析：(1)PCR过程中通过加热升高温度(95 ℃)打开双链，即通过高温解开双链，DNA在细胞内复制通过解旋酶解开双链。(2)由以上分析可知患儿的基因型是aa，一个a来自父亲，另一个来自母亲，而母亲的基因型是AA，所以患儿发病的可能原因是母亲的卵原细胞在减数分裂时发生了基因突变。由图中信息可知：模板链的GTC突变为ATC后，转录的mRNA上的密码子由CAG变为UAG(终止密码子)，使翻译提前终止，从而使合成的血红蛋白异常。
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高中生物 第一章第三节 蛋白质工程知能演练 苏教版选修3
