【毒理学课件】毒理学

第二节 外来化合物毒性作用的影响因素 一、化学结构

在特异性结构物质中，功能团是发挥其毒性作用的活性部位，而不直接参与作用的部位可以起到载体的作用。往往会影响毒物在体内的转运、蓄积、分布、转换等。 功能团的空间位置与机体结构互补才能发挥最大毒性作用。

二、理化性质 三、纯度和溶剂

四、实验动物的种属差异 五、同种动物间的个体差异 1.遗传因素及不同免疫状态 如某些个体对青霉素的过敏现象。 2.年龄 3.性别 4.机体不同的生理、功能状态 5.营养状况

六、接触途径

七、毒物的浓度（稀释度）、剂量及作用时间 八、环境及气象因素 二、急性联合作用类型的评定1. 联合作用系数法 该方法是先求出各化合物的LD50值，然后假设各化合

物之间的联合作用是相加作LD50及其95％可信限，然后用，求出预期的LD50值，然以横纵坐标分别代表两种化合后从预期LD50值与实测混合物的剂量范围，分别将甲、乙物的LD50值之比做为联合作的LD50值及95％可信限点用系数（K），再以K值大小在坐标上，且将两个化合物的评定其联合作用类型。即：K相应三点连成三条线，即甲、＝预期LD50／实测LD50。 乙二物质的LD50值连线及 混合物预期LD50值满足95％可信限上、下限连线，此下面关系：

即为等效线。然后再各取两化其中，A、B……N代表参加联合物的等毒性剂量（如各取其合作用的各化合物。 1／2 LD50剂量）混合，求出 a、b…… n分别代表各其混合物LD50值，再以求出化合物在混合物中所占的重量的混合物LD50剂量中两个化比例，所以， 合物所各含的实际剂量分别在 a＋b＋……＋n＝1 相应坐标上找到各自的剂量位 若各化合物呈相加作用，置，并由相应剂量点作垂线，则K值应等于1，但通常测定视其交点位置进行联合作用评LD50值时有一定波动，在评定。

定其联合作用类型时，94年如交点正好落在两化合物的国家标准采用Smyth法。95％可信限上、下两条线之即：K＜0.40，拮抗作用；间，表示为相加作用；交点落0.40～2.70，相加作用；K＞在可信限下限以下，表示为协2.7，协同作用。

同作用；交点落在95％可信2.等效应线图法 ：这种方法限上限以上，为拮抗作用。 只能评定两种化合物的联合作 2、 蓄积性具有以下特点： 用。

（1）在每次摄入毒物剂量相 其原理是：在试验条件和同的条件下，稳态时体内毒物接触途径相同的情况下,分别平均蓄积量随每次摄入量的增求出两化合物（如甲和乙）的

加而增加。

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旗开得胜 （2）在每次摄入毒物剂量相同的条件下，?稳态时体内毒物平均蓄积量随摄入时间间隔的加大而减小。

（3）在每次摄入毒物剂量相同，时间间隔相同的条件下，不同外来化合物在体内达到稳态时的平均蓄积量与其生物半减期成正比，因而可以用生物半减期作为外来化合物蓄积性的量度。

第五节 代谢试验 一、代谢试验的目的 是阐明外来化合物在体内吸收、分布、排泄等生物转运过程和其转变为代谢物的生物转化过程。

通过代谢试验可以阐明下列情况： 1）外来化合物在体内吸收、分布、排泄的速度和程度、蓄积的程度和主要蓄积器官，同时也 可发现可能存在的靶器官。 2）外来化合物在机体

内可能的代谢产物，并对其毒性作用初步了解。 3）代谢试验的结果还可提供某些外来化合物的代谢动力学参数，掌握毒物动力学全部情况后，可对

1

旗开得胜 其毒性作出初步估计。 二、代谢试验的方法 1、实验动物与染毒剂量 可选用雌雄两性大鼠或小鼠 ，按两个剂量考虑：（1）相当于引起中毒的剂量（ 2）参照人体实际接触的剂量 及其它科学试验的动物 。 一、 实验动物的分类 1 按微生物控制分： （ 国际分）无菌动物、悉生动物、无特定病原体动物、普通动物 我国的分类标准：一级，普通动物；二级，清洁动物；三级，无鼠、长爪沙鼠、地鼠等， 四、被检物的给予方式和途径 1消化道染毒法

1)灌胃法： 是将液态、气或固态受试化合物溶于某溶剂中，配制成一定浓度，装入注射器等定量容器，经过导管注入胃耳缘静脉采血；7）股静脉或股动脉采血；8）颈静脉或颈动脉采血

2 血液标本的选择

1）全血：采血时加入适当抗凝剂，使血液不产生凝固，含有有

形成份的标本。含水约81%。 2、受试物给予方式

（1）是静脉注射，可对受试物的分布和排泄情况有较为直接明确的了解；（2）是采用人体实际接触的方式，在食品毒理学中，主要是经口方式，多采用灌胃或将被检物混入饲料，以便了解吸收过程的实际情况。 三、代谢试验的内容 1．测定受试物在血浆中的含量或浓度 2．测定受试物在胃肠中吸收情况3．测定受试物在主要器官中分布情况及主要浓集器官4．测定受试物通过

尿、粪、和胆汁的排泄情况 5．受试外来化合物在体内生物转化情况

实验动物：是指经人工饲育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确或来源清楚 的，用于科学研究、教学、生产、检定以

特定病原体动物；四级，无菌动内

物；

一般只适用于一次给予被检物2 按遗传学控制分 近交系；封的急性毒性试验

闭群；突变系；系统杂交动物；2) 自由采食（又叫喂饲法）指现代遗传工程产生的新品系 将受试物掺入饲料或饮水中，③ 近交系动物的特点 让动物自由摄入。

1基因位点的纯合性； 2遗传这种方法由于动物摄食量的变组成的同源性；3长期遗传的化和摄食中的损失，剂量不够稳定性；4表现性的均一性；5精确但无上述灌胃法缺点，适遗传特征的可辨别性； 6遗传用于多次给药的慢性试验中。 组成的独特性； 7国际分布性；3)吞咽胶囊 指将一定剂量的8背景资料的完整性 受试化学物装入药用胶囊内，2）封闭群 远交群

强制放入到动物的舌后咽部，特点：1较强的繁殖力和生活

迫使动物咽下。

力；2具有杂合性，避免了近交此种方法剂量准确，尤其适用衰退；3个体差异较大 于易挥发、易水解和有异味的二、 啮齿类实验动物的意义 化合物，适于兔、猫、狗等大动1.代谢方式与人接近，对化学物。 物质敏感。 2.体型大小适中。 1血样的采集

3.自然寿命不长，繁殖力强。 4.1）断尾采血；2）眼眶后静脉实验动物化程度高。常选用大、丛采血；3）心脏采血 ； 4）小白鼠。其它啮齿类动物如豚

断头采血；5）摘眼球采血；6）

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常用于碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白、硫血红蛋白、细胞培养等测定，及制备血中各种细胞和全血分析用。 常用抗凝剂有：肝素、草酸钾、草酸钠、草酸铵、草酸锂、枸橼酸钠等。 2）血浆：全血中加入适当抗凝剂，去除细胞成份后剩余部分的标本。含水约93%。采血后可立即分离，可避免凝血时和运输时凝血。其中含有一种纤维蛋白原和前凝血酶。多用于血液凝固机制方面的检验，如游离血红蛋白、变性血红蛋白、纤维蛋白质的分析及血浆分析用。

3）血清：是血浆中除去凝血因子纤维蛋白原的标本。血清是生化分析中最常用的标本。

二、试验设计的基本原则 1 、对比条件相同2 、重复3 、

1

随机化

第一节 急性毒性试验概述 一、概念和试验目的 1 急性毒性： 指机体（人或实验动物）一次，或24小时内多次接触外来化合物所引起的中毒效应（包括死亡）。 2 急性毒性试验的目的 (1) 测定受试物对一种或几种实验动物的半数致死量（LD50），以初步估计其对人类毒害的危险性。

(2) 了解受试物的毒性强度、性质和可能的靶器官，阐明受试物急性毒性的剂量反应关系。(3) 为进一步进行亚慢性和慢性试验以及其它特殊毒性试验的剂量设计和毒性判定指标的选择提供依据

二、实验动物的选择

1动物种类 一般常用大鼠或小鼠；如果同时用两种动物，其中一种为非啮齿类如狗、猴等更为理想

2动物年龄 动物年龄不易过老过幼，一般应选用初成年者，大、小鼠为出生后2～3个月左右，体重一般分别为200g和

20g左右； 狗为生后一年左右。的毒性上限与毒性下限的比值，所有动物进入实验室后，至少也就是引起试验动物的死亡之饲养观察一周，选取其健康动剂量与最低剂量的剂量范围的物，体重相差应在10％以内，宽窄。

动物性别除另有要求，雌雄分二、急性毒性分级 ：极毒；剧别试验外，一般常雌雄各半。 毒；中等毒；低毒；实际无毒；三、 给予被检物的途径和方

无毒

法

第五章 亚慢性和慢性毒性作

1)原则上要求与人类摄用及其试验方法

入该物质的实际途径相一、亚慢性毒性试验 同，2)对食品中化学物质1

概念 是使实验动物连续

来说，主要是经口给予，多日接触较大剂量的在急性毒性试验中，多采化学物的毒性实用灌胃法。 验。

四、观察指标和时间

2 试验的目的 1）近一步探索1.观察指标 在测定LD50中，受试化学物质的毒性作用和靶主要观察指标：动物死亡数目 器官2）初步估计现有有害作动物主要中毒症状和开始出现用的最大无作用剂量和中毒阈的时间 死亡的时间也要记录。 剂量3）为慢性毒性试验的剂2 观察时间 1）一般观察一量设计提供参考4）由于亚慢周即可。因急性毒性实验中，动性毒性试验中所用剂量较大，物的中毒症状以及死亡，一般某些病理或生化等改变出现迅多出现在给予被检物后24～速，可为慢性毒性试验筛选敏48h以内。2）如中毒反应出现感指标5）亚慢性毒性试验也较迟，主要在48h或3～4天常用于研究毒物代谢及中毒机后出现，则观察期也必须相应理。

延长至2周甚至4周，特别是二、慢性毒性试验

48～70h内。

1概念是使实验动物生命大部 急性毒作用带：指化合物

分时间或终生接触被检化学物

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旗开得胜 质的毒性试验。

2 试验的目的 观察长期反复摄入低剂量被检化学物质可能对机体造成的损害，并确定其最大无作用剂量。在此基础上，制定出人体每日容许摄入量和食物中允许含量或最高残留量。

第二节 试验设计 一、实验动物 1

实验动物 种别的选择 1）对被检物质的代谢过程基本与人类相似， 2）如无法掌握这一情况，应尽量选用敏感动物。根据要求应有一种啮齿动物（大鼠或小鼠）和一种非啮齿动物（如狗或猴）。3）目前至少要求用一种啮齿动物全面系统进行，对于了解较少的新化学物质，根据传统经验可选用大鼠，因大鼠对一般化学物质的反应和代谢过程大多与人近似，食性亦和人相近。 2 实验动物的年龄要求 慢性、亚慢性毒性试验中，动物应为初断乳者。大鼠约为出生后4周，体重50g左右；小鼠3周，体重10g左右；品系应明确一

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