脂肪来源干细胞在慢性创面愈合中作用的研究进展
卫传元， 顾建英*
【摘 要】[摘要] 慢性创面难愈或不愈是目前整形外科亟待解决的难题。脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)除具有与其他间充质来源干细胞类似的性质外，还具有取材方便、来源充足及体型雕塑等优点，成为近年来再生医学领域的研究热点。大量研究表明，ADSCs可通过多种机制促进慢性创面愈合，被认为是一种非常有前景的治疗策略。因此，本文就ADSCs的分离纯化及其在慢性创面修复中的作用机制等作一综述。 【期刊名称】中国临床医学 【年(卷),期】2017(024)004 【总页数】6
【关键词】[关键词] 慢性创面；脂肪来源干细胞；旁分泌；诱导分化 ·综 述·
1 慢性创面与慢性创面愈合
随着现代社会的发展和生活方式的转变，人口老龄化加剧，人类疾病谱发生了显著改变，创面难愈或不愈的发生率逐年增高。慢性创面在美国影响着约650万患者，每年用于治疗慢性创面的费用高达250亿美元[1]。我国住院患者中慢性创面发生率约1.7‰[2]。慢性创面一般不会威胁生命，但由于病程长达数月甚至数年、数十年，严重影响患者生活质量，给其家庭和社会带来沉重的护理与经济负担[3]。此外，由于慢性创面常伴有感染，可导致脓毒症等并发症，不仅加重原发病甚至危及患者生命，包括烧伤在内的各种创伤、创面问题已高居人口死因中的第4位。因此，如何寻找更为合理的治疗方案，已成为整形外科
乃至整个医疗领域亟待解决的问题。
创面愈合，指体内外因素使皮肤等组织出现离断或缺损后的修复过程，大致可分为止血期、炎症期、增生期、重塑期4个阶段[4]。对于正常愈合过程，上述4个阶段必须以正确的顺序在特定的时间内完成[5]。然而，临床上很多创面未能按照正常愈合进程在规定时间内完成，超过6～8周即可认为慢性创面愈合不良。其病因复杂多样，临床上90%常见于糖尿病皮肤溃疡、静脉性溃疡、褥疮、烧伤或外伤后残余创面等。
在大多数慢性创面中，组织修复过程常停滞在炎症阶段，导致炎症细胞及其分泌的炎症因子过度产生，借此可以计数嗜中性粒细胞来检测慢性创面的产生或存在。过多的炎症细胞可导致基质金属蛋白酶(MMPs)的分泌进而降解细胞外基质(ECM)，并可导致转化生长因子-β(TGF-β)、血小板源性生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)等的大量丢失。此外，随着慢性创面持续暴露于外界环境中，表面含有的病原微生物也将随之增加，当每克组织中超过105时，便会严重影响创面愈合进程。而且病原微生物及其产物可包埋于创面形成生物膜，而影响抗生素的治疗效果。可见，急慢性创面有着明显不同的致病机制和修复原理，因此在治疗上也应有针对性的处理方案。然而，目前临床上并未完全将这两者区分开来，而是将急性创面的常规治疗手段直接应用于慢性创面，如清创后采用局部皮瓣修复等，虽然可以迅速解决皮损的闭合问题，且取得不错的治疗效果，但部分难治性创面因血供较差而影响皮瓣的存活，且给患者带来较大的二次创伤。因此，寻找更为合理的治疗手段显得尤为重要。高压氧疗、负压吸引等措施被发现有利于创面修复，但这些只是改善局部微环境或针对某一环节进行治疗，难以取得显而易见的临床效果。脂肪干细胞具有自我复制和多向分化
潜能，并能分泌多种细胞因子而在慢性创面中发挥重要而广泛的作用，因此受到广泛关注。
2 脂肪来源干细胞的概念及来源
Rodbell等[6]于20世纪60年代便开始从脂肪组织中分离细胞，然而由于技术等因素并未发现干细胞的存在。随着分离技术的不断改进，2001年Zuk等[7]通过免疫荧光和流式细胞术发现，脂肪组织中存在着具有黏附特性的多向分化潜能干细胞亚群，并命名为脂肪组织提取细胞(processed lipoaspirate, PLA)。2002年，该研究团队再次从脂肪组织中分离并证实了干细胞的存在，正式命名为脂肪来源干细胞[8]，从此揭开干细胞研究的新篇章。
一般将脂肪组织经过酶消化法处理，并高速离心分离出来的细胞称为血管基质成分(SVF)，包括脂肪前体细胞、成纤维细胞、内皮细胞及多种免疫细胞等，脂肪来源干细胞仅占其中的约10%。可见，脂肪来源干细胞是从SVF中提取出来的具有自我更新和多向分化潜能的间充质干细胞。ADSCs提取在局麻下即可进行，操作简单、对供区创伤小、含量丰富。1 g脂肪组织可提取约5×103个ADSCs，而相同质量的骨髓仅可提取约10个骨髓干细胞[9]。脂肪来源干细胞具有类似骨髓干细胞的形态、表面标志及分化特性，在体内环境下可定向分化为各个胚层的多种细胞，并可分泌多种细胞因子、生长因子，从而促进创面愈合。与皮肤替代物和局部皮瓣等各种传统方法相比，脂肪干细胞治疗操作简单、耗时少，并且可以减少手术给患者带来的二次创伤。因此，2001年以来脂肪干细胞便成为再生医学中的研究热点，并备受关注。
3 脂肪干细胞的表面抗原和分离纯化
Zuk等[8]通过流式细胞术和免疫荧光化学发现ADSCs表面表达CD13、CD29、
脂肪来源干细胞在慢性创面愈合中作用的研究进展
