抗链球菌溶血素OASO测定胶乳凝集法作业指导书
1. 原理
将SLO包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上,此致敏胶乳在与待测血清中的抗链球菌溶血素O(ASO)相遇时,即发生肉眼可见的凝集。 2. 标本采集
2.1 采集前病人准备:受检者应空腹 2.2 标本种类:血清
2.3 标本要求:采集病人静脉血2ml,室温放置不超过4小时,分离血清备用。
3. 标本储存:2-8°C保存不应超过24小时,-20°C不应超过3个月,-70°C长期保存,应避免反复冻融。 4. 标本运输:密封,室温运输。
5. 标本拒收标准:污染、标本量不足、脂血或严重溶血标本不宜作此项检测。 6. 试剂
6.1 试剂名称:抗链球菌溶血素(ASO)测定试剂 6.2 试剂生产厂家:上海捷门生物技术合作公司 6.3 包装规格:60Test/Kit 6.4 试剂盒组成:
ASO胶乳悬液,阳性对照血清,阴性对照血清。 6.5 试剂储存条件及有效期:2-10°C避光保存,有效期12个月。 7. 操作步骤
7.1 平衡:将试剂盒各组分取出,平衡至室温(18-25°C)。
7.2 分别吸取50?l阳性对照和阴性对照血清均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。
7.3 吸取50?l待测血清均匀铺加在纸卡的另一圆圈中。
7.4 加胶乳试剂50?l于上述血清中。
7.5 处分混匀后立即摇动反应板,2分钟内于直射阳光下观察。
7.6 如需定量测定,将标本用生理盐水进行对倍稀释后检测。
8. 结果判断:定性:出现明显凝集者为阳性。定量:出现明显凝集的最高稀释倍数×200IU/mL。
9. 质量控制:每次测定均做阴阳对照,阴性对照不出现凝集物,阳性对照出现明显凝集。 10. 参考范围:阴性或<200IU/mL
11. 临床意义:成人ASO>500单位有诊断意义。ASO阳性常见于A族溶血性链球菌感染。活动性风湿病人,不但ASO增高,并有血沉增快,CRP阳性及白细胞增多的特点。急性肾小球肾炎也使增高。 12. 操作性能:灵敏度、特异性高。 13. 方法局限性:
13.1 6个月至2岁儿童可能出现假阴性结果。 13.2 感染早期可能出现假阴性结果。
13.3 单次阳性结果不能完善解释临床意义,建议4-6周后作第二次检查。
14. 注意事项
14.1 试剂的使用:在大于10℃室温条件下进行;使用前必需充分混匀。
14.2 应在2分钟内判读结果。 14.3 不同批号的试剂组分不可混用。
15. 当检测系统(仪器)不能工作时,所采取的补救措施:无。
16. 参考文献:中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程(第二版)427页。 17. 其它:无。