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园林科技2012年第1期总第123期
珍稀多肉植物种质资源组培保存和快速繁殖技术刘与明张淑娟
(厦门市园林植物园,厦门
摘
361003)
要:景天科、仙人掌科等多肉植物耐干旱,净化空气,具有外观小巧玲珑,植株肥厚多汁,造型特异等特点,
是近年来逐渐流行的一类观赏植物。市场上名品价格居高不下,在花卉产业中逐渐占有一席之地。但很多名优珍稀多肉植物品种,因为自然繁殖率低,有的品种不结种子,推广受到限制。本文采用组织培养技术,成功保存与快速繁殖的多肉植物涉及3个科5个属的20多种,对保存多肉植物优良的种质资源、繁殖名优珍稀品种、快速繁殖出口需要和园林绿化需要的优良品种,具有重要的意义。
关键词:珍稀多肉植物;种质资源;组织培养;快繁技术
多肉植物(Succulent)也可称为多浆或多汁植物,是近年来逐渐流行的一类观赏植物,在花卉产业中逐渐占有它的一席之地,特别是在出口小盆栽植物上有着相当大的比重。多肉植物外观一般小巧玲珑,植株肥厚多汁,造型特异,仪态万千。其中景天科、仙人掌科等多数多肉植物有着与一般植物不同的特殊的代谢形式,即景天酸代谢。它们多在晚上天气较凉爽潮湿时才打开植株上的气孔,放出O2,吸收CO2,经过羧化反应固定大量CO2,贮存于苹果酸内,白天气温高时,气孔关闭,不吸收CO2,而是将前一晚上形成的苹果酸氧化,放出CO2,供给植物进行光合作用。故这类多肉植物有着特殊的耐干旱能力和净化空气有利健康的特别功能。因而,栽培这类多肉植物迎合了现代人们崇尚健康和追求美的理念,现在越来越多的人们喜欢收藏莳养。而许多名优珍稀多肉植物品种因为自然繁殖率低,有的连种子都不结,限制了它的推广,市场上名品价格居高不下。采用组织培养技术快速繁殖多肉植物是一种行之有效的方法,它对于保存多肉植物优良的种质资源、繁殖名优珍稀品种、快速繁殖出口需要和园林绿化需要的优良品种,有着特别重要的意义。
厦门市园林植物园经过多年的研究,已经掌握了糊斑金城、白洋宫锦、玉露、玉露锦、玉章、康平寿、绿玉扇、千代田锦、琉璃姬孔雀、金边龙舌兰、翡翠盘、吉祥、百惠、细叶景天等多种珍稀多肉植物的种
质资源组培保存和快繁技术,试验成功的多肉植物品种涉及3个科5个属20多种;基本摸清不同科、属、种的多肉植物在诱导、增殖等培养阶段的差异,掌握了相应的培养基配方以及供试的各种多肉植物在增殖快繁时培养基激素的调整规律。更重要的是采用花梗作为外植体进行组织培养,能诱导出带“锦”的组培苗,克服因使用侧芽为外植体建立的组培体系失“锦”的问题。现将主要技术介绍如下。
1外植体取材季节和部位
珍稀名贵的多肉植物往往是不易繁殖或繁殖系数很低,若取其茎尖进行培养,必然要损伤或损坏母本植物,因此,选取的部位既不能损坏母本植物又要求能诱导成功。研究发现,龙舌兰科、百合科植物可在春季植物生长季节,取优良母株新萌发的1~3cm的幼嫩侧芽;或切取其幼嫩的叶片;一些没有侧芽的珍稀名贵品种的母株则可等待植株开花期间取其较充实的花梗;景天科植物取其母株的幼嫩枝条作为外植体。夏季休眠期,一些品种不适取材,此季节的多肉植物外植体在培养基中对激素常反应迟钝,生长静止,不易培养成功。
2培养条件
培养室条件:温度25~27℃,光照1500LX,每日
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照光10h,相对湿度90%的人工培养室中培养。
培养基:不同多肉植物种类和品种其培养基的成分,尤其是添加物各不相同,不同培养时期培养基的成分亦各不相同,通过比较研究和不断筛选,发现
不同多肉植物基本培养基具有一定的规律,其激素等添加物都在一定值的范围,只是要根据不同品种、不同的培养材料及不同的培养时期进行调整。其基本培养基成份详细见表。
多肉植物组培快速繁殖基本培养基成份一览表
培养基种类初代诱导继代增殖生根
MS3/4*3/4*1/2**
·6-BA(mgL-1)·NAA(mgL-1)白糖(%)琼脂粉(%)pH值6.26.26.2
2-40.2-4-
0.2-0.40.02-0.40.02-0.05
2.52.52.0
0.50.50.5
*大量元素取3/4量,微量元素和有机成份用全量;**大量元素取1/2量,微量元素用全量,不添加有机成份。
3培养基及材料消毒
培养基的消毒:制作好的培养基须立即放入高
压灭菌锅灭菌,灭菌中必须排净锅内空气,当压力达
1.1kg/m,温度121℃时保持25min,可杀死培养基中
各种细菌及其耐热的芽孢。
外植体材料的消毒:切取多肉植物幼嫩的侧芽或花梗、茎段、叶片等,然后用肥皂水或洗洁精轻轻洗涤(尽可能不弄伤组织),在自来水下冲洗干净之后于超净工作台中用75%酒精浸泡数秒,再用0.1%升汞处理10~30min,而后用无菌水冲洗6遍,每遍
图1
琉璃姬孔雀的诱导
1~2min,冲洗之后用消毒滤纸吸干水分就可以在无
菌条件下操作,用手术刀切取所需的培养材料,最后无菌操作植入初代诱导培养基中培养。经多次取材试验,这种消毒方法很适合各类多肉植物,灭菌效果好,获得无菌材料的成功率较高。不同品种之间消毒处理时间上的差别,主要跟材料组织表面的革质化程度相关,较幼嫩的材料消毒处理的时间需较短,否则植物细胞易被杀死。
5丛生芽的增殖扩繁
侧芽外植体丛生芽的增殖:
由于侧芽诱导的丛生芽芽数非常有限,需切分进行增殖培养,刚开始增殖时,培养基采用诱导时的配方,培养周期4~6周,可由一个丛生芽增殖为若干个丛生芽,扩繁倍数约3~5,长至满瓶,并可继续不断增殖(图2~5)。然而试验中发现,在经若干次继代增殖培养后,所建立的各个多肉植物品种无性系无一例外都不再顺利增殖丛生芽,而是出现新芽少,芽体短簇,植株僵硬,类似俗称的石头苗,有的芽或芽丛还出现玻璃化倾向,无法继续培养。这种现象说明增殖培养时添加的激素浓度已不再适宜,植物体内内源激素和添加的外源激素打破了原有的平衡所致。
此时在下一个继代培养时须调节外源激素的绝对浓度及不同种类激素的相对配比,当调整后,瓶苗很快就恢复到原来良好的增殖状态,激素的调整规
4外植体初代诱导
侧芽外植体腋芽的诱导:侧芽植入培养基后培
养15~21d,腋间萌发出多个腋芽芽点,至30~45d,由外植体长成一团丛生芽(见图1)。
花梗外植体不定芽的诱导:花梗植入诱导培养基,经15~21d培养,花梗节膨大,并萌发1~3个不定芽,长至1cm左右约需45d。
叶片外植体的诱导:叶片外植体经4~6周诱导培养,仅发生愈伤组织,未见形成不定芽。
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图5
图2
千代田锦的增殖
圆叶景天的增殖
征可在花梗诱导建立的体系中保存下来(图6),而取带“锦”植株的侧芽进行诱导建立的无性系则难于保持该性状,这可能和外植体组织所带的遗传信息有关,有待进一步研究。
图3百蕙的增殖
图6玉露锦的增殖
6生根培养及组培苗移栽
生根培养:当增殖的芽体长至1~3cm,可切下转入生根培养,一般接种后20d可顺利生根。各个多肉
图4
水晶掌的增殖
植物品种组培苗的生根都很容易,操作中,只要遵循将大苗生根,而将幼嫩苗进行增殖的原则,便可顺利发根(图7~8)。
瓶外生根:将增殖瓶苗中原本可切下诱根培养的壮苗,取出瓶并在苗基部切一新鲜切口直接插于苗床的基质中,大约经过25~35d,便开始长根。在春秋季节,气温适宜,其扦插发根率达95%以上,这说明多肉植物组培无根苗完全可进行瓶外扦插生根。此法生根率高,可能由于组培苗体内含有适量的激素,扦插特别易于生根。使用瓶外扦插法能降低生产成本,既减少无菌操作的工时消耗,又减少了培养基
律基本是以高低浓度适度地交错进行,只有这样才能使增殖扩繁顺利进行,既保持一定的增殖系数,又避免产生僵苗、畸形苗、玻璃苗等。不同多肉植物品种对激素浓度和配比有不同的适应范围。
由花梗外植体诱导建立的无性系的增殖:花梗诱导出节芽后,数量同样相当有限,需继续切分增殖,芽的增殖状况及激素调整规律,同侧芽外植体诱导建立的繁殖体系基本一致。试验中发现,一些叶片带条纹俗称“锦”的多肉植物其珍贵的线条特
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较,以河砂、泥炭土、珍珠岩2∶1∶1相混合的基质最适宜组培苗的过渡栽培(图9~10)。移栽的季节全年均可进行,但以春、秋二季更为适宜,因夏季大多的多肉植物有短时间的休眠期。移栽后要注意移栽苗的水肥管理,当第一次栽下苗床后必须浇透水,以后掌握不干不浇的原则,因为肉质植物多数叶片肥厚,体内贮水多,相对耐干不耐湿。施肥则掌握薄肥勤施的原则。
图7玉章的生根
图9
图8
卧牛的生根
玉露出瓶移栽苗
制作的材料消耗及电力、水资源与工时的消耗。但最好避开炎热的夏季,夏季因高温多湿,若水分管理不周,肉质植物体很容易腐烂而死亡。
组培苗移栽及管理:移栽是组培快速繁殖工序的最后一步,也是最重要的一步。试验表明,只要前面几个工序做得好,培养出了优质的壮苗,根系生长良好,移栽很容易成活。具体做法是,取出瓶苗,用自来水洗净根系附着的培养基,自然晾干水分后,假植于专门的基质中,稍遮荫,并注意通风。通过试验比
图10
白洋宫锦出瓶移栽苗