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微生物室肠球菌属纸片扩散法药物敏感试验
操作规程
1 目的
规范肠球菌属纸片扩散法药物敏感试验操作规程，确保药敏结果的准确。
2 适用范围
本操作规程适用于肠球菌属细菌。 3 选药原则
3.1 根据CLSI M100-S19对肠球菌属纸片扩散法药物敏感试验的要求。
3.2 卫生部细菌耐药监控网每年发布的监控要求。 3.3 本单位抗生素的使用情况。 4 试验质控
纸片药敏试验应作用金黄色葡萄球菌ATCC-25923进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见CLSI M100-S19。
5 材料和仪器
M-H培养基、无菌盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、测量尺标准浊管或比浊仪。
6 操作步骤
参见《药物敏感性试验标准操作规程》。
7 判断标准
肠球菌属纸片扩散试验判断标准
判断标准（mm） 备注 敏感（S） 中介（I） 耐药（R） 氨苄西林（10μg） ≥17 ≤16 参见结果解释9.1、9.2 万古霉素（30μg） ≥17 15 ~ 16 ≤14 参见结果解释9.3 替考拉宁（30μg） ≥14 11 ~ 13 ≤10 庆大霉素（120μg） ≥10 11 ~ 15 6 参见结果解释9.4、9.5 左氧氟沙星（5μg） ≥17 14 ~ 16 ≤13 呋喃妥因（300μg） ≥17 15 ~ 16 ≤14 利奈唑胺（30μg） ≥23 21 ~ 22 ≤20 磷霉素（200μg） ≥16 13 ~ 15 ≤12 氯霉素（30μg） ≥18 13 ~ 17 ≤12 药敏纸片
8 结果解释
8.1 氨苄西林的药物敏感试验结果可代表细菌对氨苄西林和阿莫西林的敏感性。在非产酶的肠球菌中，氨苄西林敏感提示菌株对阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林-他唑巴坦敏感。
8.2 纸片扩散法和稀释法均无法准确判断菌株是否由于产β-内酰胺酶而引起对氨苄西林和青霉素的耐药性，因此对于血液和脑脊液分离的菌株需要用头孢噻吩进行检测菌株是否产β-内酰胺酶，见产色素头孢菌素试验操作规程。
8.3 在进行肠球菌的万古霉素药物敏感试验时，药敏平板孵育要足24小时，须用透视不源量取抑菌圈直径，对于万古霉素中介的肠球菌应用MCI进行检测，有关耐万古霉素肠球菌的检测参见《耐万古霉素肠球试验操作规程》。
8.4 氨苄西林、青霉素或万古霉素与一种氨基糖苷类抗菌药需要进
行菌株对高浓度氨基糖苷类的药物敏感试验（庆大霉素和链霉素），其他氨基苷类抗菌药的效果并不比这两种更好，因此无需检测。
8.5 敏感提示可以与细菌壁活性的抗菌药（如氨苄西林、青霉素和万古霉素等）抗菌药联合使用，7 ~ 9mm为不确定，应进行琼脂稀释法或肉汤稀释法进行确认，耐药表明不能与细胞壁活性抗菌药联合使用。
9 相关文件
CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing,Nineteenth Intormational Supplement.CLSI document M100-S19.Wayne,PA:CLlinical PA: Clinical and Laboratory Standards Institute
医院微生物室肠球菌属纸片扩散法药物敏感试验操作规程
