2. 在表格编辑器中添加新的列: 在表格编辑器中点击添加列按钮
,打开“列信息”对话框,选择“Keyword”选
项卡,在“文件关键词”中选择“Antibody Concentration”,将列标题命名为“抗体浓度”,点击OK
3. 在表格编辑器中添加公式列:
在表格编辑器中点击添加列按钮,打开“列信息”对话框,选择“函数”选项卡。编辑公式“CD8+ (FL1-H) Median ÷ CD8- (FL1-H) Median”,计算CD8阳性细胞荧光强度中位数与CD8阴性细胞荧光强度中位数之比。将列标题命名为MFI比率。点击OK
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在经过上述操作之后,表格编辑器如下图所示:
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4. 表格分析的批处理:
点击表格编辑器右上角的批处理按钮
,得到批处理的结果。
从结果中可以看出,随着抗体浓度的增加,MFI的比率不断增加,当抗体浓度增加到1之后,MFI的比率没有明显的增加,可以判定最佳的抗体浓度为1.
三、图形分析的批处理及图像叠加
1. 图形分析的批处理
点击工作台常用工具栏中的布局编辑器按钮
,打开布局编辑器,将工作台
中Sample 1样本下的淋巴细胞节点拖入布局编辑器
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点击布局编辑器右上角的批处理按钮
,得到批处理的结果,选择输出到
FlowJo里,点击“创建”,将“Titration Data”组中的所有样本的淋巴细胞的直方图都输出到FlowJo的布局页里,如下图所示:
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2. 图形的叠加(Overlay): 例1:
将Titration Data中的所有实验样本的直方图分别与对照样本的直方图进行叠加,以显示出实验样本与对照样本之间的差别。操作步骤如下:
(1) 先将Sample 1样本的淋巴细胞节点拖入布局页,再将Sample 2样本的淋巴细胞节点拖到布局页的Sample 1的直方图上,此时鼠标指针显示为两个图形便重叠在一起。此时右上角的批处理按钮未启用
,松开鼠标之后,
(2) 双击重叠之后的图形,打开图形定义窗口,选择“Specify”选项卡,在“Control”选项中双击Sample 1,将Sample 1设为对照,其前面会显示打钩。点击OK。
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