本技术涉及一种梨树高效抗腐烂病早期选择育种方法，所述的育种方法包括选种、杂交授粉、杂交果的管理、杂交果采收、采收冷藏、种子采集、种子层积处理、壮苗培育、苗期修剪、接种前准备、接种、第一次调查、第二次调查、单株抗病性评价及淘汰、烧毁淘汰株和单株转接步骤，本技术具有抗病强、产量高、经济效益高的优点。
技术要求
1.一种梨树高效抗腐烂病早期选择育种方法，其特征在于：所述的育种方法包括如下步
骤：
步骤1：选种，杂交后代对腐烂病的抗性受亲本品种的影响，亲本品种的抗性对后代抗性植株的数量影响较大，双亲都不是抗性品种的后代中抗病植株的数量很少，双亲或亲本之一是抗病品种的，后代中能产生较多的抗病植株，因此选种组合为双亲或亲本之一是抗病品种，其中选种为秋子梨、砂梨、白梨和新疆梨中的任意两种组合；
步骤2：杂交授粉，提前采集大气球期的花蕾，然后剥下花药，收集后在25℃的环境中进行干燥，散粉后可以密封在4℃的环境中暂时保存，等待母本花蕾大气球期开始授粉，授粉后随即进行套袋隔离，授粉10天后去掉隔离；
步骤3：杂交果的管理，授粉三周后开始对果实套袋，套袋前一周喷一次杀虫剂和杀菌剂，采用70%甲基托布津800倍液和5%阿维菌素4000倍液进行杀虫和杀菌，并且在套袋的前一晚用500倍甲基托布津和1000倍毒死蜱浸湿袋口，套袋时先撑起袋口，托起袋底，令袋体彭起，套上果实后，将袋口绕果柄封好，果实生长期进行病虫害防治，并加强肥水管理，重视5月的壮果肥，此次以有机肥、氮肥、钾肥为主，每亩施尿素30千克，硫酸钾
30千克，沼液水4000千克左右；
步骤4：杂交果采收，待果实充分成熟后开始采收，采果后运回室内让其散发田间热，然后去掉果袋，并做好标记；
步骤5：采收冷藏，为了种子的充分后熟，杂交果采收散热后，再20℃左右的环境中预冷
24h，然后在0-2℃的冷库中储藏；
步骤6：种子采集，冷藏60-80天后，将果实从冷库取出，然后横切果实，用镊子将种子从心室中取出，并用种子袋收集，然后在25℃的温水下搓洗，洗干净后将种子在通风处干燥，经过充分干燥的种子，做好标记后在室温保存；
步骤7：种子层积处理：每年的元旦前后开始层积种子，先将种子放在25℃的温水中充分吸水12h，另外准备保鲜盒，盒子底部放有充分吸水的滤纸，然后将种子均匀不叠加的铺在滤纸上，之后每10天检查一次，待70-80%的种子露白后，开始准备播种；
步骤8：壮苗培育，将露白后的种子播种到11cm深的林木专用穴盘，播种前对基质进行杀虫和杀菌处理，当幼苗长至4片真叶，根近10cm时，开始移栽，将穴盘中的幼苗移栽到苗圃，移栽前在苗圃平铺施有机肥4-7立方，尿素30公斤/亩，然后深翻，平整土地，起垄打畦，畦宽80cm，一畦种4行，宽窄行栽植，宽行行距40cm，窄行行距20cm，株距15-
20cm，畦间50cm，移栽前幼苗要充分浇透水，避开正午时间移栽，午后2点开始移栽，移
栽后苗圃用喷灌浇水，一个月后幼苗完全成活，从5月中旬至8 月中旬追肥，每隔10天施肥1次，每次施尿素2-4kg/亩，追肥要少量多次，追肥前除净杂草，不可把肥料撒在幼苗叶片上；
步骤9：苗期修剪，实生苗容易长枝刺，作业期间容易被划伤，另外也不利于将来接种作业，所以在8月份将主干上的分枝和枝刺都剪掉，9月下旬再将主干上的分枝和枝刺复剪一次；
步骤10：接种前准备，8月下旬开始接种，菌种选择已经筛选过的致病力强且分布广泛的菌株，提前配置PSA培养基，然后在121℃环境中高温高压灭菌25min后，在超净工作台上用无菌培养皿进行分装，每皿分装薄薄的一层，不可过厚，凝固后将菌株接种在培养基上，用25℃的培养箱培养，4天后菌丝长满培养皿后用打孔器打成菌饼后备用，将滤纸剪成2cm×2cm的正方形，经过高压灭菌后备用，并准备保鲜膜，裁成5cm宽；
步骤11：接种，对地径超过1cm的壮苗进行接种，接种从杂交苗地面高度80cm开始，每隔
15cm接种一个菌饼，即杂种苗高80cm，95cm，110cm，125cm，140cm处各接种一次，在
此高度处用打孔器打孔，厚到触及木质部，将准备好的菌饼背面放在用无菌水完全浸湿的三层滤纸用来保湿，有菌丝的一面朝上，然后和杂种苗干上的打孔完全对应，用手轻轻按住滤纸固定，然后用封口膜从下至上将其完全缠住，以保持湿度；
步骤12：第一次调查，接种3周后调查一次，对于能看到病斑已经延伸到保鲜膜外的单株，直接淘汰，将杂种苗从根部剪除，然后收集起来集中焚烧；
步骤13：第二次调查：接种4周后第二次调查，解开封口膜去掉滤纸，统计每个接种点的是否发病和病斑的长度，计算每个单株的发病率和发病程度，并对发病程度分级，发病率=发病的接种点/总接种点×100%，发病程度=总病斑长度/5；
步骤14：单株抗病性评价及淘汰，结合发病率和发病程度综合判断单株的抗病性，并决定每个组合单株淘汰的量，组合内单株数超过1000的大组合可以加大淘汰力度，淘汰发病率超过40%同时病斑长度大于1cm的单株；组合内单株数小于500的，淘汰发病率超过
80%同时病斑长度大于2cm的单株；
步骤15：烧毁淘汰株，淘汰后的单株要从根部剪除后集中烧毁，使其不可传播；步骤16：单株转接，经过接种鉴定，淘汰对腐烂病敏感和易感的单株，对留下的单株继续嫁接培养，第二年春季在单株最顶端的10cm内选择最饱满的芽嫁接到已经定植株行距
0.5m×2m的杜梨砧木上。
技术说明书
一种梨树高效抗腐烂病早期选择育种方法技术领域
本技术属于育种技术领域，具体涉及一种梨树高效抗腐烂病早期选择育种方法。背景技术
梨树腐烂病（pear Valsa canker）俗称“烂皮病”，是梨栽培生产中危害最为严重的病害之一，它主要危害梨树主干、主枝和侧枝，造成树皮腐烂、树势衰弱，梨果产量和品质下降，该病具有发生区域广、发病率高、难以控制的特点，发病严重的梨园，树体病疤累累、枝干残缺不全，甚至造成大量死树或毁园，严重威胁到我国梨产业的健康发展。
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