人肾间质纤维母细胞培养及血管紧张素Ⅱ2型受体转染表达

人肾间质纤维母细胞培养及血管紧张素Ⅱ2型受体转染表达

李荣藻;刘建平;叶任高

【期刊名称】《中国中西医结合肾病杂志》 【年(卷),期】2001(002)003

【摘要】目的:体外培养人肾间质纤维母细胞(hRIF)并用腺病毒介导转染表达血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)2型受体(AT2R).方法:用肾穿刺活检法取慢性肾小球肾炎病人肾组织,以常规组织块贴壁法培养hRIF;构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(AdCMV-AT2R),体外转染hRIF;用RT-PCR方法检测AT2R mRNA表达,免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法检测AT2R蛋白表达,流式细胞仪检测AT2R表达率,同时检测AT1R的表达变化.结果:用肾活检组织成功培养出hRIF.构建的AdCMV-AT2R体外转染培养hRIF表达率为90.57%.以免疫组化、免疫印迹和RT-PCR检测AT2R表明,转染后AT2R表达明显增强,并随表达时间延长而增加,48 h为表达峰值.AT2R转染表达不影响AT1R表达.结论:腺病毒载体可较高效率介导AT2R在hRIF的转染表达,ATIR表达不受其影响.转染表达AT2R的hRIF可作为研究AngⅡ在肾间质纤维化中作用的良好细胞模型. 【总页数】4页(133-136)

【关键词】血管紧张素Ⅱ2型受体;肾间质;纤维母细胞;腺病毒载体 【作者】李荣藻;刘建平;叶任高

【作者单位】广东省粤北人民医院肾内科，韶关 512026;第三军医大学附属西南医院心内科，重庆 400038;中山医科大学附属第一医院肾脏研究所，广州 510080

【正文语种】中文