丙型肝炎病毒相关混合型冷球蛋白血症的炎症因子浓度分
析
秦绪珍1，刘 鹏2，朱 力3，李 超4，李 剑5，苏 薇1
【摘 要】摘要：目的 探讨丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）相关混合型冷球蛋白血症（mixed cryoglobulinemia，MC）患者的外周血炎症相关因子的表达情况。方法 30例患者经过年龄、性别、HCV抗体检测结果、冷球蛋白定性结果匹配后，纳入本研究。分别归入MC和HCV双阳性组（MC+HCV+）、MC和HCV双阴性组（MC-HCV-）、MC阳性HCV阴性组（MC-HCV+）、MC阴性HCV阳性组（MC-HCV+）。采用魏氏沉降法、毛细管电泳分型进行冷球蛋白定性、定量、分型分析，Meso Scale Discovery（MSD）超敏电化学发光多细胞因子检测试剂盒检测人白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2），CXC趋化因子10（C-X-C motif chemokine 10，CXCL10），CXC趋化因子12（C-X-C motif chemokine 12，CXCL12），胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin，TSLP）。IBM SPSS 22.0软件进行数据分析。结果 MC+组IL-2，CXCL12，TSLP浓度高于MC-组（P＜0.05），HCV-MC+亚组CXCL12，TSLP浓度高于HCV-MC-亚组（P＜0.05）。其他亚组内细胞因子浓度差异不具有统计学意义。结论 本研究发现CXCL12，TSLP与MC有一定的关联，而与HCV感染没有相关性。这些发现为进一步深入研究HCV相关MC的发生机制提供了初步的研究基础。 【期刊名称】标记免疫分析与临床 【年(卷),期】2018(025)011 【总页数】5
【关键词】冷球蛋白血症； 丙型肝炎病毒； 细胞因子 修回日期：2018-03-08
基金项目：北京协和医院中青年科研基金（编号：I101450）；公益性行业科研专项（编号：201402001）
冷球蛋白血症（cryoglobuliemia）是一种以血液中出现低温下凝固的免疫球蛋白（冷球蛋白）为特征的系统性血管炎疾病，由免疫复合物介导，可累及小血管及中等大小血管。根据免疫球蛋白的型别和组成不同，冷球蛋白可分为I、II、III型［1］。由于II型和III型冷球蛋白组成成分不单一，且临床表现又相似，发病率占所有冷球蛋白血症的90%以上，因此它们又被合称为MC。HCV感染是MC的主要发病原因，据报道约90%的MC是由HCV感染引起［2］。我国是丙型肝炎患病率较高的国家，2017年HCV感染总人数为214023，发病率达15.51/10万［3］。出现MC症状会显著降低患者对治疗的应答，严重影响疾病预后。HCV引起冷球蛋白血症的分子机制还不明确，目前认为病毒持续存在，对宿主免疫系统产生持续的刺激，导致B淋巴细胞增殖可能是主要的病因［4］。本研究拟比较HCV感染者中伴有和不伴有MC的患者，外周血B淋巴细胞增殖相关细胞因子等的表达，探讨HCV相关性MC的可能发生机制。
资料与方法
1 研究对象
北京协和医院2017年3月至11月所有申请冷球蛋白定量和分型检测的患者，经过年龄、性别、HCV抗体检测结果、冷球蛋白定性结果匹配后，30例纳入本研究，分别计入MC+HCV+、MC-HCV-、MC-HCV+、MC-HCV+。纳入标准：实验组参照MC诊断标准［5］，纳入明确的伴有HCV的MC患者。对
照组为不伴有MC的慢性HCV感染者；没有HCV感染史的MC患者和MC与HCV均阴性的有相似临床表现的患者。排除标准：同时伴有乙型肝炎病毒、免疫缺陷病毒、巨细胞病毒、EB病毒等感染的患者。本研究开展前经协和医院临床医学研究伦理委员会同意并授权开展。 2 研究方法
2.1 标本采集与处理
采集患者15mL外周静脉血，避免溶血、脂血等情况，立即置于加有37℃温水的保温瓶或保温杯中，立即送检。样本在37℃温箱中保存，待血液凝固后，37℃3000r/min离心10min，分离出的血清，迅速分装到2个10mL普通聚丙乙烯塑料管和1个魏氏管中，分别保存于4℃，37℃和4℃，作为冷球蛋白电泳分型试验管、自身对照管和定量试验管。
1.2 冷球蛋白定性、定量和电泳分型检测血清标本4℃冰箱内保存至一周后血清中出现沉淀，如37℃自身对照管没有出现沉淀，确定血清中存在冷沉淀，则将沉淀溶于4℃生理盐水，采用Sebia Capillarys2 flex piercing全自动毛细管电泳仪进行毛细管免疫分型分析。魏氏管4℃冰箱内保存一周后，如出现沉淀，读取相应的刻度数，计算沉降率作为相对定量结果报告。 1.3 细胞因子检测
采用MSD超敏电化学发光多细胞因子检测试剂盒U-PLEX检测IL-2、CXCL10、CXCL12、TSLP，双份样本平行检测，质控合格。 3 统计方法
本研究数据采用IBM SPSS 22.0软件进行数据分析。如果数据呈正态性分布，采用均数±标准差±s）形式表示；如数据呈非正态分布，采用中位数和四分位
丙型肝炎病毒相关混合型冷球蛋白血症的炎症因子浓度分析
