一种苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法
杨冬静, 谢逸萍*, 孙厚俊, 张成玲, 马居奎
【摘 要】摘要: 通过对甘薯黑斑病侵染后薯苗地上部和地下部发病特征进行研究,设置了薯苗黑斑病病情指数分级标准,形成了一种苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法,为快速大量精准地进行甘薯黑斑病抗病品种的选育提供了依据和技术支撑．
【期刊名称】江苏师范大学学报：自然科学版 【年(卷),期】2019(037)002 【总页数】3
【关键词】关键词: 甘薯;苗期;黑斑病;抗性鉴定
基金项目: 现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-10-B15)
甘薯黑斑病是甘薯大田和贮藏期的主要病害之一,在世界各甘薯产区均有发生,其病原菌为甘薯长喙壳菌(Ceratocystis fimbriata Ellis et Halsted),可为害甘薯茎、叶及块根组织,造成死苗、烂床、烂窖,对甘薯生产影响极大[1]．被黑斑病菌侵染的病薯中含有甘薯黑疤霉酮等物质,家畜食用后可引起中毒症状;用病薯作发酵原料会延缓发酵过程,降低酒精产量和质量,严重制约甘薯产业的发展．黑斑病菌可通过种薯、种苗及土壤等多种途径传播,很难彻底根除．生产上种植黑斑病抗病品种是主要防治途径之一．甘薯黑斑病抗性鉴定是选育抗病品种的基础,目前,生产上采用蘸孢子液针刺薯块接种法[2-5]和孢子液侵染薯苗法[6]进行甘薯品种黑斑病抗病鉴定．采用蘸孢子液针刺薯块接种法进行抗病鉴定大约需要11 d,每天换纱布进行保湿,在此过程中湿度过小，黑斑病不易发生;湿度过大,薯块长时间处于高湿状态,非常容易被杂菌污染,且薯块容易腐烂,严重影响抗病鉴定结果.
采用孢子液侵染薯苗法大约需要5～7 d,薯苗茎秆长时间浸泡在液体中极易腐烂,对抗病鉴定结果造成较大影响．因此,建立一种甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法,是本领域亟待解决的技术问题,也是甘薯黑斑病抗病育种的迫切需要．本文采用黑斑病菌孢子液灌根接种薯苗的方法进行抗病鉴定研究,以期形成一套苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法,可为抗病品种的选育提供技术支撑．
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.1.1 甘薯黑斑病菌 从田间采集发病薯块,用组织分离法和单孢分离法分离纯化甘薯黑斑病菌,并经科赫式法则验证后,在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养7 d,备用．
1.1.2 PS培养液的制备 称取马铃薯20 g，加入1 L超纯水煮沸至马铃薯完全烂软,纱布过滤后加入15 g蔗糖,加超纯水定容至1 L,每个三角瓶分装30 mL,然后于121 ℃高压灭菌15 min备用．
1.1.3 病原菌的摇培 取出活化好的甘薯黑斑病菌,用直径为6 mm的打孔器打取菌碟,每个三角瓶中接种20个菌碟,将接种好的三角瓶置于28 ℃恒温摇床中,以120 r/min摇培48 h．
1.1.4 黑斑病菌孢子悬浮液的制备 采用滤纸过滤收集滤液,显微镜下观察并调节孢子悬浮液浓度,使菌落总数约为1×105 个/mL．
1.1.5 参试薯苗 12个参试品种分别为南京92、冀982、烟25、济26、SQ 16、广87、苏16、运薯66、龙9、商19、胜利百号、徐薯29．从甘薯储藏库取甘薯品种每个3块,置于装土的盆钵中催芽,待发芽后每个品种剪取3棵生长一致的甘薯幼苗待用．
1.2 甘薯黑斑病接种和评价
分别将剪取的薯苗种植在装有灭菌土的花盆中,将制备好的孢子悬浮液进行灌根处理，每个盆钵灌根量为50 mL,之后每3 d用灭菌水均匀喷雾．接种15 d后调查薯苗黑斑病发病情况,并根据发病程度将薯苗分为0～9级，共6个等级,根据受害等级将各品种对黑斑病的抗性分为抗病、中抗、感病和高感4个级别． 1.3 薯苗病情指数分级标准
薯苗病情指数分级标准:0级,整株健康无病症;1级,植株正常生根,地下部茎有零星黑斑,茎基部叶片发黄或有萎蔫,地上部正常分枝生长;3级,植株生根但根系较少,地下部茎有连片黑斑,茎基部叶片发黄,薯苗生长缓慢;5级,植株不生根,地下部茎有连片黑斑,茎基部叶片发黄,薯苗完全不分枝;7级,地下部坏死腐烂,整株叶片发黄,植株萎蔫;9级,地下部坏死腐烂,薯苗心叶腐烂,整株死亡．平均发病级别为3次重复的平均值.抗病级别确定:抗病,平均病情指数≤2.0;中抗,2.0<平均病情指数≤4.0;感病,4.0<平均病情指数≤6.0;高感,平均病情指数>6.0．
2 结果与分析
薯苗接种15 d后，调查黑斑病发病症状,图1为黑斑病抗病品种南京92和高感品种SQ 16地上部和地下部发病症状对照图．结合地上部和地下部发病症状,按照分级标准进行病情指数记录和抗感级别的鉴定,结果如表1所示.可以看出,所鉴定的12个甘薯品种中,南京92薯苗对黑斑病的抗性级别为抗病;冀982薯苗为中抗;烟25、广87、苏16、运薯66和龙9共5个品种为感病;济26、SQ 16、商19、胜利百号和徐薯29共5个品种为高感．
3 讨论
苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法是一种农作物病害抗性鉴定方法,本方法的创
一种苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法
