动物繁殖学
第七章 人工授（jing）精Artificial Insemination(AI)
第一节 概述
一、人工授（jing）精的概念及在家畜生产中的意义 （一）AI 概念
AI：是以人工的方法，采集雄性动物的（jing）精ye，再将处理后的（jing）精ye输入到雌性动物生殖道的特定部位，以代替雌、雄性动物自然交配而繁殖后代的一种繁殖技术。 （二）意义
1、提高优良种公畜的利用率； 2、加速畜群的遗传改良； 3、降低饲养管理费用； 4、控制生殖疾病的传播； 5、提高母畜受胎率；
6、促进良种公畜的地区和国际交流。
二、人工授（jing）精的发展概况 （一）试验阶段 （二）实用阶段
（三）冷冻（jing）精ye阶段
三、人工授（jing）精的基本技术环节 采（jing）精
（jing）精ye品质检查 （jing）精ye的稀释
保存（液态保存和冷冻保存） 运输
冷冻（jing）精ye的解冻与检查 输（jing）精
第二节 采（jing）精 一、采（jing）精方法
假阴dao法、按摩法、电刺激法、手握法等 （一）假阴dao法（于各种家畜）
原理：利用模拟母畜阴dao环境，并诱导公畜在其中she（jing）精，从而获取（jing）精ye。 1、假阴dao的结构：
外壳、内胎、集（jing）精瓶（杯）、及附件构成 2、应满足三个条件：温度、压力和润滑度 （1）适宜的温度：加入温水（38-40℃）； （2） 适当的压力：冲入气体；
（3）一定的润滑度：涂抹消毒润滑剂。 3、采（jing）精操作
（1）可以将假阴dao置于假台畜后躯内，并使假阴dao纵轴方向与公畜阴jing伸出方向在同一直线上。
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（2）采（jing）精员也可以站在台畜右侧，手持假阴dao采（jing）精，当公畜爬跨阴jing勃起伸出，将阴jing导入假阴dao。
（二）手握法（猪）
1、公猪的手握法采（jing）精
是模仿母猪子宫颈对公猪螺旋状阴jing龟头约束力而引起she（jing）精的生理刺激，以手握住其阴jing龟头呈节奏性松紧给与压力进行刺激，因此适当压力很重要。
筒握法（于公猪）
? 是假阴dao和手握法相结合的方法，具有假阴dao和手握法双重优点。
? 用普通的假阴dao，但前端未装集（jing）精瓶。当公猪阴jing插入假阴dao后，在假阴dao漏斗
部握住公猪龟头采（jing）精的方法。
（三）电刺激法
利用电刺激采集器刺激公畜引起she（jing）精而进行采（jing）精的一种方法。
适合于各种家畜和动物，更适于那些种用价值高而失去爬跨能力的优良公畜、或不适宜用其他方法采（jing）精的小动物和野生动物。
（四）按摩法采（jing）精
采（jing）精时通过采（jing）精员的手指对生殖器官及副性腺进行按摩刺激，以引起性欲而出现she（jing）精。
该法适于无爬跨能力的公牛和禽类。
三、采（jing）精频率
采（jing）精频率：是指每周内对公畜的采（jing）精次数。 公牛：2-3次/周
猪、马：因为she（jing）精量大，隔日一次.
第三节 （jing）精ye的品质检查
一、外观评定
（一）（jing）精ye量
定义：指公畜一次采（jing）精时射出（jing）精ye的量。 奶牛：5-10ml；肉牛：4-8ml； 绵羊：0.8-1.2ml ； 猪：150-300ml；山羊：0.5-1.5ml；马：30-100 （二）色泽
一般为乳白色、浅灰色或浅乳黄色 （三）气味
一般略带腥味。 （四）PH
一般新采集的原（jing）精yePH近中性，牛、羊（jing）精ye呈弱酸性（pH值为6.5-6.9），猪、马（jing）精ye呈弱碱性（PH值为 7.4-7.5）。
二、实验室检查
（一）（jing）精zi的运动能力 1、（jing）精zi活率(sperm motility)：指（jing）精ye中呈直线运动的（jing）精zi占（jing）精zi数的百分比。
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2、死活（jing）精zi百分率（染色）
3、（jing）精zi的云雾状运动状态（多见于牛羊） （二）（jing）精zi密度（（jing）精zi浓度）
（jing）精zi密度：指每毫升（jing）精ye中所含的（jing）精zi数。 （三）（jing）精zi形态 1、（jing）精zi畸形率
头部、颈部、尾部，观察200个（jing）精zi，求出比例。用于输（jing）精的（jing）精zi畸形率不得超过20%。
头部：巨大，细小，缺失，双头，轮廓不明显，皱缩 颈部：臌大，纤细，弯曲，不全，原生质滴 尾部：屈折，带原生质滴，双尾，折断，纤细 2、（jing）精zi顶体异常率
顶体与（jing）精zi受（shou）（jing）精能力直接有关，牛超过14%，猪 超过4.3%，显著降低受（shou）（jing）精率。
第四节 （jing）精ye的稀释
（jing）精ye稀释：指向（jing）精ye中加入适宜于（jing）精zi存活、保持其受（shou）（能力的稀释液。
（jing）精ye稀释的目的：
? 扩大（jing）精ye量—增加可配♀数；
? 延长存活时间，增强其受（shou）（jing）精能力和提高优良♂的配种效能； ? 便于运输和保存。
如何（jing）精确计算一份（jing）精ye的稀释倍数？ 首先要考虑以下几个因素： 猪
1、该份（jing）精ye总量 250ml 2、（jing）精zi密度 2亿/ml
3、有效（jing）精zi数（保存后使用前（jing）精zi活率） 0.6 4、每次输入有效（jing）精zi数 10亿 5、每次输（jing）精量 20ml 该份（jing）精ye的有效（jing）精zi数：
250ml×2×0.6=300亿 则分成的份数：
300亿/10亿=30份 则稀释后总量：
30×20=600ml 则稀释倍数：
600-250/250=1.4
第五节 （jing）精ye的保存 （jing）精ye保存目的：
1、延长（jing）精zi的存活时间及维持其受（shou）（jing）精能力； 2、便于运输；
3、扩大（jing）精ye使用范围，增加受配母畜数，提高种公畜的配种效能。 方法：
液态保存（常温和低温保存）、冷冻保存
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jing）精
一、液态（jing）精ye保存
定义：指（jing）精ye稀释后，保存温度在0 ℃以上，以液态形式作短期保存。 分为：常温保存和低温保存
（一）常温保存（15-25℃）P192 1、原理
酸性环境，抑制运动、代谢 2、稀释液
猪（17℃ ）、马、绵羊、牛 3、保存方法
储存在室内、地窖及自来水中
（二）低温保存 （牛羊0-5℃）1、原理 低温抑制（jing）精zi运动和代谢 2、稀释液
牛、绵羊、马、猪
加抗冷休克物质（奶类和卵黄） 3、保存方法
（1） 缓慢降温（30℃→0-5 ℃，0.2 ℃/min) （2） 贮存在冰箱中，温度恒定 （3） 输（jing）精前升温至30℃
二、（jing）精ye的冷冻保存
定义：是指将采集的新鲜（jing）精ye，经过特殊处理后，主要利用液态氮（-196 ℃）作为冷源，以冻结的形式保存于超低温环境下，进行长期保存。 （一）（jing）精ye冷冻保存的意义 1、极大地提高了优良种畜的利用效率； 2、开展国内、国际间的交流； 3、配种不受时间和地域限制；
4、推动繁殖新技术在生产上的应用； 5、建立动物（jing）精ye基因库。 （二）（jing）精ye冷冻保存的原理
1、温度为-196 ℃（液氮）和-79℃ （干冰）的超低温; 2、超低温条件下（jing）精zi代谢处于静止状态; 3、（jing）精zi内外水分子在低温下的变化:
（1）晶体化（crystallization）（0- -60℃）：物、化伤害，故升降温度时需快速通过该温度范围 （2）玻璃化（vitrification）（-60- -250 ℃）：对（jing）精zi无害，可逆 4、抗冻剂的作用
（1）防止冰晶形成、增强（jing）精zi抗冻力 （2）抗冻物质：甘油、DMSO、乙二醇 （jing）精ye冷冻保存的原理 利用超低温使（jing）精ye和（jing）精zi快速冷冻，快速越过形成冰晶的温度范围（0 - -60 ℃）、（jing）精ye或（jing）精
子中的水分不形成冰晶化，而是形成玻璃化（-60- -250 ℃ ）。同时在抗冻剂的存在下使（jing）精zi 免受冻伤，在温度上升至体温（jing）精ye解冻后（jing）精zi能够保持完整的形态结构、功能和受（shou）（jing）精能力。
（jing）精ye冷冻保存的技术程序
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1、（jing）精ye的稀释 （1）一次稀释法
快捷但甘油毒害大 （2）二次稀释法
稀释一半（无甘油）——》 1小时缓慢降温（30℃→5℃）——》等温稀释（甘油） 2、分装与平衡（
（1）（jing）精ye的分装
颗粒、细管（0.25ml、0.5ml）、安瓶和袋装 （2）平衡 ①降温
1-2h缓慢降温（30℃→4-5℃）——防冷休克 ②平衡
5℃的（jing）精ye在冰箱中（5℃）放置1-2h——增强（jing）精zi的耐冻性 3、（jing）精ye的冷冻即冻结（freezing） 液氮熏蒸法
（1）颗粒（jing）精ye冷冻法
（2）细管和安瓶（jing）精ye冷冻法 4、（jing）精ye的解冻（thawing） 低温冰水解冻（0-5℃） 温水解冻（30-40 ℃ ） 高温解冻（50-80 ℃ ）
牛细管（jing）精ye解冻：38 ℃±2 ℃温水 猪颗粒冻（jing）精解冻：50-60 ℃
原则上，输（jing）精前解冻后的（jing）精zi活率不低于0.3，解冻后即输（jing）精。液态（jing）精ye活率不低于0.6，可用于输（jing）精。
第六节 输 （jing）精
一、输（jing）精前的准备 1、母畜的发情鉴定和保定； 2、输（jing）精器材的消毒； 3、（jing）精ye准备；
4、输（jing）精人员的准备。
二、输（jing）精要求 有效精子(亿)20-500.1-0.20.1-0.20.52.5-5 适宜输精发情后19-发情后10-发情后10-发情后10-发情第二 时间(h)30h，或压20h，或排20h，或排36h天开始隔 背后8-12h卵前10-20卵前10-20日一次 输精次数1~31~21~21~21~2或更多 输精间隔12~18 h8~10 h8~10 h8~10 h24~48 h 输精部位子宫内子宫内子宫内子宫颈内子宫内
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动物繁殖学资料(7章)
