加试特训2 生物技术实践(B)
1．某研究小组利用酵母菌发酵葡萄生产葡萄酒。回答下列问题：
(1)欲从土壤中分离野生型酵母菌，最好采用________法进行接种，经过培养后，观察培养基上微生物的________，从中选出酵母菌。
(2)为提高生产效率，做了对比实验。甲发酵罐中保留一定量的氧气，乙发酵罐中没有氧气，其余条件相同且适宜，定期测得的数据如图所示。
甲发酵罐提供氧气的目的是______________________，12 h后，甲、乙两发酵罐消耗的葡萄糖量之比为________(A.3∶4 B．4∶3 C．5∶3 D．3∶5)。实验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、操作正确、发酵温度和pH适宜，但乙醇含量比预期低，可能的原因是________________________。
(3)在酿制葡萄酒时，加入果胶酶将果胶分解成可溶性的____________，瓦解植物的胞间层，可以提高果汁的出汁率，并使果汁澄清，提高葡萄酒的品质。
答案 (1)划线分离(或涂布分离) 菌落 (2)使酵母菌进行需氧呼吸，快速繁殖 B 乙醇增多会抑制酵母菌的酒精发酵过程 (3)半乳糖醛酸
解析 (1)欲从土壤中分离野生型酵母菌，最好采用划线分离法或涂布分离法进行接种，经过培养后，观察培养基上微生物的菌落，从中选出酵母菌。(2)甲发酵罐提供氧气的目的是使酵母菌进行需氧呼吸，快速繁殖。由于甲发酵罐中含有一定量的氧气，因此甲发酵罐中进行需氧呼吸和酒精发酵，由题图可知，甲发酵罐中的氧气是6 mol，则需氧呼吸消耗的葡萄糖是1 mol，产生的乙醇是18 mol，则酒精发酵消耗的葡萄糖是9 mol，故消耗的葡萄糖共10 mol；乙发酵罐不含有氧气，只进行酒精发酵，产生的酒精是15 mol，则酒精发酵消耗的葡萄糖是7.5 mol。因此，甲、乙两发酵罐消耗的葡萄糖之比为10∶7.5＝4∶3。实验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、操作正确、发酵温度和pH适宜，但乙醇含量比预期低，可能的原因是乙醇增多会抑制酵母菌的酒精发酵过程。(3)果胶酶将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。
2．下列问题是有关大肠杆菌的培养实验，请回答：
(1)配制培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入蛋白胨和____________作为营养物质，为维持一定的渗透压，常需加入一定量的
________。
(2)大肠杆菌培养和分离的实验中，在________________中进行扩大培养，培养液经________后，在LB固体培养基上进行________，并将培养皿________放在恒温培养箱中培养，可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及________________，应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。
(3)通常对获得的纯菌种可以依据________的形状、大小等特征进行初步的鉴定。 (4)关于“大肠杆菌培养和分离”的操作中，下列叙述正确的是________。 A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．为了防止污染，接种工具经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
(5)科学家利用转基因技术，利用大肠杆菌生产人胰岛素，其过程如图。由甲和载体乙拼接形成的丙通常称为________，构建得到丙时必需的工具酶有________________________。在此过程中，用来处理丁以增加细菌细胞壁通透性的化学试剂是________。 A．氯化钠 C．次氯酸钠
B．氯化钙 D．纤维素酶
答案 (1)酵母提取物 NaCl (2)LB液体培养基 稀释 分离 倒置 无菌操作是否规范 (3)菌落 (4)D(5)重组质粒(重组DNA分子) 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 B 解析 (1)配制培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入蛋白胨和酵母提取物作为营养物质，为维持一定的渗透压，常需加入一定量的NaCl。(2)大肠杆菌培养和分离的实验中，在LB液体培养基中进行扩大培养，培养液经稀释后，在LB固体培养基上进行分离，并将培养皿倒置放在恒温培养箱中培养；为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及无菌操作是否规范，应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱中培养。(3)通常对获得的纯菌种可以依据菌落的形状、大小等特征进行初步鉴定。(4)高压灭菌加热结束，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能直接打开放气阀使压力表指
针回到零；倒平板过程中只能打开皿盖的一边，不能将皿盖放在一边，以防止杂菌污染；接种环在火焰上灼烧，待冷却后才可以快速挑取菌落；用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上。(5)由目的基因甲和载体乙拼接形成的丙通常称为重组质粒；构建重组DNA分子时，需先用限制性核酸内切酶切割外源DNA分子和载体，再用DNA连接酶将目的基因与载体连接形成重组DNA分子；将重组质粒导入微生物细胞时，常用氯化钙来处理微生物细胞，以增加细胞壁通透性，使之成为感受态细胞，有利于重组质粒向内部转移。 3．请回答微生物筛选和培养实验的有关问题：
(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从__________________环境采集。 (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择____________的培养基，并在________条件下培养。
(3)为获得一种能高效降解农药的细菌(目的菌)，向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是____________；实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做是为了________________。
(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行________，接种前要进行____________，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。
答案 (1)海滩等高盐 (2)以淀粉为唯一碳源 高温 (3)划线分离法 防止造成环境污染 (4)pH调整 高压蒸汽灭菌
4．果胶酶能分解果胶等物质，澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用。某兴趣小组的同学对三种不同品牌的果胶酶制剂(制剂中果胶酶浓度相同)进行了探究，其实验设计及实验结果如表所示。
分组 1 2 3 4
注：“＋”越多表示果汁越浑浊。
(1)表中X所代表的数值应为__________，Y的果汁浑浊程度应表示为______________(用若干个“＋”表示)。
(2)除了观察果汁浑浊程度外，还可以通过检测____________的变化量来判断不同品牌果胶酶制剂的效果。若使用该方法，相关物质变化量最大的是________组。
蒸馏水(mL) 2 2 2 X 缓冲液(mL) 2 2 2 2 果汁(mL) 5 5 5 5 果胶酶制剂(mL) 甲 乙 2 0 0 0 0 2 0 0 丙 0 0 2 0 果汁浑浊程度 ＋ ＋＋＋ ＋＋ Y
(浙江选考)2024届高三生物二轮专题复习 题型增分练 四_加试非选择题(32~33题)加试特训
