第八章植物胚胎培养
一.思考题
1. 幼胚培养需要比较复杂的培养基为什么？
答：因为幼胚在胚囊里生长时是处于异养状态，幼胚的生长发育不
仅依赖于它们细胞间的代谢，而且还依赖于周围胚乳的丰富营养。所以，要使离体胚能继续发育至成熟胚，必须尽可能提供与幼胚相似的环境条件。
2. 弱光和黑暗更有利于幼胚培养为什么？
答：因为在自然条件下，胚在胚珠内发育是不见光的。光照对胚芽
生长有利，而黑暗则对胚根生长有利，大多数处于球形期至心形期的幼胚，需要在黑暗条件下培养2周后再给予一定时间的光照。
3. 在一朵花中胚珠与子房的位置关系怎样？各发育成什么？ 答：子房是被子植物生长种子的器官，位于花的雌态下面，一般略
为膨大。子房里面有胚珠，胚珠受精后可以发育为种子，是被子植物花中雌蕊的主要组成部分，子房由子房壁 和胚珠组成。当传粉受精后，子房发育成果实
4. 植物胚胎培养中成熟胚与幼胚培养有何不同？幼胚培养时胚的发育方式有哪几种？各有什么特点？
答：（1）成熟胚在比较简单的培养基上（只要含有大量元素的无机
盐及糖），一般即能正常萌发生长。但在有些情况下，对于远缘杂交胚的培养或次生胚的增殖等，则需要加入有机物或生长调节剂。而幼胚培养需要比较复杂的培养基因为幼胚在胚囊里生长时是处于异养状态，幼胚的生长发育不仅依赖于它们细胞间的代谢，而且还依赖于周围胚乳的丰富营养。所以，要使离体胚能继续发育至成熟胚，必须尽可能提供与幼胚相似的环境条件。
（2）a、胚性发育：幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体
内的发育方式发育，最后形成成熟胚（有时甚至可能类似种子），然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株。这种途径发育的幼胚，一般一个幼胚将来发育成一个植株。
b、早熟萌发：幼胚接种后，不继续胚性生长，而是在培养
基上迅速萌发成幼苗，这种现象即称为早熟萌发。这种方式形成的幼苗往往细弱、畸形，难以成活。因此 在幼胚培养中应防止早熟萌发。
c、产生愈伤组织：在幼胚培养中常能在追加生长调节剂时
诱发愈伤组织产生、进而分化形成胚状体或不定芽。
5. 比较胚培养、胚珠培养和子房培养的异同。
答：（1）胚培养分为成熟胚培养和幼胚培养两种。成熟胚为子叶期
以后的胚其在简单的培养基上即可萌发生长。对营养条件要求不严格。幼胚培养，培养技术和条件要求较高。其作用为克服远缘杂交不亲和性，打破种子休眠缩短育种周期提高种子萌发率。
（2）胚珠培养是在人工控制的条件下对胚珠进行离体培养使其
生长发育形成幼苗的技术。由于幼胚分离难度大而胚珠分离则相对容易故在幼胚培养时常采用胚珠培养。胚珠培养分为，受精胚珠培养它可防止杂种胚早期败育获得杂种植株与未受精胚珠培养它可作为试管受精的基础未受精胚珠培养能培养获得单倩体植株用于单借体育种。
（3）子房培养包括授粉子房和未授粉子房培养，授粉子房培养形
成成熟果实和种子，未授粉子房培养形成小的无籽果实。其作用为获得杂种植株，未授精子房培养为试 管受精提供技术基础，且未受精子房培养能获得单倍体植株用于单倍体育种。
6、控制胚状体发育的同步化是人工种子制备的核心技术之一，主要包括哪些方法？
答：抑制剂法：在细胞培养初期加入DNA合成抑制剂（如5-氨基尿嘧啶），当去除DNA合成抑制剂后细胞可以同步发育。
低温法：低温处理抑制细胞分裂，再恢复正常温度可以使细胞分裂同步。
渗透压法：不同发育时期的胚状体对渗透压的要求不同，用一定的渗透压使胚状体停止在某一阶段，然后再使其同步发育。
通气法：细胞分裂旺盛时有大量气体（如乙烯等）生成。可以通过在培养基中通入乙烯或氮气控制细胞同步分裂。
分离筛选法：用不同孔径的筛网将不同发育时期的胚状体分离开来，也可以采用密度梯度离心法来选择不同发育期的胚状体.
7、理想的人工种皮应该是怎样的？人工种子制备还存在什么问题需要改进？
答： 理想的人工种皮应该是
具有一定的封闭性以保证人工胚乳的各种成分不易流失，而且播种后易于降解。
还应有一定的坚硬度，以加强人工种子的耐储运性和适于机械化操作； 具有良好的透气性，以保证繁殖体维持生理活性的需要； 又要求其无毒无害，能保证繁殖体顺利穿透发芽。 存在问题
1、人工种皮性能不尽人意
2、还没有一种符合多数植物胚状体需要的人工胚乳 3、胚状体贮藏阶段的休眠控制
4、如何保证长期贮藏而又不影响萌发率 5、工厂化制作流程较繁琐、成本高等
二.判断题
1、在植物胚培养中幼胚培养较成熟胚易成功。（×） 2、完全成熟的胚乳，必须借助原胚萌发，使其活化（√）
3、植物离体授精过程中卵细胞和精细胞的分离均可采用酶解法（×） 4、未授粉胚珠的培养与花粉培养一样可获得单倍体植株（√）
5、利用未授粉的子房培养应选择胚囊发育到单核至四核时期的子房为材料（×）
6、在幼胚培养中，幼胚发育阶段越早，所要求培养基中的蔗糖浓度越低。（×）
三．选择题
1. 胚乳培养是否必须有原位胚的参加，主要与（C）有关 A、培养基和培养条件 B、培养基和胚乳的年龄 C、胚乳的生理状态和胚乳的年龄 D、胚乳的生理状态和培养条件
2. 未授粉胚珠以发育至（B）胚囊进行培养为最佳 A、四核胚囊 B、八核胚囊 C、成熟胚囊 D、B和C
【细胞工程习题总结及参考答案】第8.10章
