现代生物科技专题训练（一）
1. （2007山东）继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞能够合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是_________________。
（2）实行基因转移时，通常要将外源基因转入___________中，原因是________________。 （3）通常采用___________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的______________细胞中特异表达。 （5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的________转入_________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为______________。 2.（2008宁夏）回答下列相关动物细胞培养的问题：
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂长年到细胞表面__________时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的___________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是________。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是______________。
(2)随首细胞传代次数的增多，绝绝绝绝绝大部分细胞分裂停止，进而出现____________的现象；但极少数细胞能够连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变面变成____________细胞，该种细胞的黏着性__________，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量__________。
(3)现用某种大分子染料，对细胞实行染色时，观察到死细胞被污色，而活细胞不染色，原因是_______________________________。
(4) 检查某种毒物是否能改变细胞染一的数目，最好选用细胞分裂到_______期的细胞用显微镜实行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在_________条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 _________的活性降低，细胞__________的速率降低。
(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作__________实行攻击。
3.（2009辽宁） 右图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分 化的示意图。请回答：
（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至______期的内细胞团或胎儿的__________中分离得到 的一类细胞。
（2）图中分化水准最低的干细胞是_________。在体外培养条件下，培养液中加入_______因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
（3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因___________的结果。
（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植能够达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的__________细胞移植到患者体内。
（5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________，其原因是_________________________。
（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞NDA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的_________期。
（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用__________细胞与骨髓细胞融合，经多
交筛选最终得到能分泌_______________的杂交瘤细胞。
4.（2009江苏）苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫水平的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因
ramp植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。
(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有 _____种DNA片段。 (2)图中②表示 HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得 _____种重组质粒；如果换用Bst l与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得______种重组质粒。 (3)目的基因插人质粒后 ，不能影响质粒的___________ 。 (4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，能够协助带有目的基因的T—DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中_________________对T—DNA的降解。
(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞_____________________________ 。
(6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的_____________基因频率的增长速率。
5.（2009山东） 人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图： 请回答： （1）过
程①代表的是________________。
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用__________和___________两种工具酶。 （3）过程③采用的实验技术是_______________，获得的X是________________。
(4)对健康人实行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的________所制备的疫苗。 对该传染病疑似患者确诊时，能够疑似患者体内分离病毒，与已知病毒实行__________比较；或用图中的_________________实行特异性结合检测。
6.（2009福建）转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：
（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶_______，对___________实行切割。
（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有_______________，作为标记基因。 （3）香蕉组织细胞具有_____________，所以，能够利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的________、________。
7.（2010福建）红细胞生成素(EPO)是体内促动红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病因为天然EP0来源极为有限，当前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图
（1）图中①所指的是______________技术。
（2）图中②所指的物质是_________________，③所指的物质是____________________。
（3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换_____________________。
（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的__________________细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成 8.（2010全国）请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术能够保持品种的___________，繁殖种苗的速度__________。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部__________________。
(2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上实行，其原因是避免_____的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗_______，而与_______配比适宜时可促动芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需尊使用的生长调节剂是______________(脱落酸、2，4-D)。
（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是______________，单株鲜重的变化趋势是____________。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量______(能、不能)满足自身最佳生长的需要。
(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提升其光合作用水
平，应______(降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提升试管苗的自养水平。
9.（2010山东）胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。
（1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要实行体外培养，其目的是_____；从良种公牛采集的精子需_____后才能实行受精作用。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供____气体以维持___________。
（3）图中过程A称为_____，它在胚胎工程中的意义在于________________________。 （4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是___________；获得转基因母牛后，如果____________________即说明目的基因已经表达。
10.（2010天津）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答：
（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用__________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含_____________的培养基上实行。
（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________（填字母代号）。 A.启动子 B. tetR C.复制原点 D. ampR
（3）过程①可采用的操作方法是________（填字母代号）。
A.农杆菌转化 B. 大肠杆菌转化 C.显微注射 D. 细胞融合
（4）过程②可采用的生物技术是_________________。
（5）对早期胚胎实行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的___________性。（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________（填字母代号）技术。 A.核酸分子杂交 B. 基因序列分析 C.抗原—抗体杂交 D. PCR 11.（2008海南）（18分）某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：
（1）图中①表示的是该花粉培养过程中的___________过程，②表示的是__________过程，X代表的是____________，③表示的是__________过程，④表示的是诱导_________过程。 （2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中_____________的种类及其浓度配比，最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为____________植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有__________________。
（3）对植株实行___________ ，才能使其结实产生后代（乙），否则植株甲只有通过__________的方式才能产生后代（丙）。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是_____植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为_______种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为_______种。花药培养在育种上的特殊意义是______________ ，从而开辟育种新途径。 12.（2008海南）图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点， ampR为青霉素抗性基因，tctR 为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答：
（1）将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用ＤＮＡ连接酶实行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_____________、____________、_______________三种 。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物实行____________________。
（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞实行转化实验。之后将这些宿主
现代生物科技专题训练(一)
