第三讲
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(实验课)
1．还原糖的检测
2．脂肪的检测
(1)检测原理：脂肪＋苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液→橘黄色(或红色)。 (2)检测步骤
方法一：花生种子匀浆＋3滴苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液→橘黄色(或红色)。 方法二：
3．蛋白质的检测
1．理清斐林试剂与双缩脲试剂的“一同三不同”
2．关注实验中的四个注意点 选材 不宜选有颜色的材料，因为有颜色的材料会干扰实验结果 脂肪检测时，用体积分数为50%的酒精洗去浮色，不能用清水，因为染料材料处理 溶于有机溶剂、不溶于水 蛋白质检测中，若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其粘在试管上不易刷洗，且该实验应预留部分组织样液作对比 设置对照 3．把握三类有机物检测在操作步骤上的“三个唯一” 唯一需要加热 唯一需要显微镜 唯一使用酒精
命题点(一) 考查实验原理、材料选取和操作过程
1．(2017·全国卷Ⅰ)下列关于细胞结构与成分的叙述，错误的是( ) A．细胞膜的完整性可用台盼蓝染色法进行检测 B．检测氨基酸的含量可用双缩脲试剂进行显色
C．若要观察处于细胞分裂中期的染色体可用醋酸洋红液染色 D．斐林试剂是含有Cu2的碱性溶液，可被葡萄糖还原成砖红色
＋
物质检测实验一般不设立对照实验，若需设立对照实验，对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清 还原糖检测，必须水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热，则无砖红色沉淀出现 切片法检测生物组织中的脂肪 脂肪的检测，用体积分数为50%的酒精洗去浮色 解析：选B 台盼蓝是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率，是组织和细胞培养中最常用的细胞活性鉴定染色剂。双缩脲试剂的作用原理是Cu2在碱性
＋
条件下与肽键发生反应生成紫色络合物，因为氨基酸中没有肽键，故不会与双缩脲试剂发生反应。染色体可被碱性染料染成深色，常用的碱性染料为龙胆紫溶液或醋酸洋红液。斐林试剂的甲液是质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液，乙液是质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液，应现配现用，可溶性还原糖中含有的醛基具有弱还原性，在水浴加热的条件下可与Cu(OH)2发生氧化还原反应，把Cu2还原成砖红色的Cu2O沉淀。
＋
2．(2016·海南高考)下列实验中，加入试剂后不能产生特定颜色的是( ) A．取成熟香蕉匀浆，用斐林试剂检测还原糖 B．黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，用碘液检测淀粉 C．玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核 D．花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒
解析：选B 成熟香蕉中含有较多葡萄糖，用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀；黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，淀粉被消耗，加入碘液后不发生蓝色反应；玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核呈绿色；花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
[归纳拓展]
生物实验中的材料选取原则
(1)凡是用到染色剂的实验，一般都需要选择无色材料，涉及的实验有：①还原糖、脂肪、蛋白质的检测；②观察DNA、RNA在细胞中的分布；③观察线粒体；④观察细胞的有丝分裂；⑤观察细胞的减数分裂；⑥低温诱导染色体加倍。
(2)用到有色材料的实验有：①观察植物细胞的质壁分离和复原；②观察叶绿体；③叶绿体色素的提取和分离。
(3)在选择实验材料时，不仅要考虑材料本身颜色的影响，还要特别注意材料中是否包含实验对象，如甘蔗汁不能用来检测还原糖，菠菜叶的表皮细胞不能用来观察叶绿体。
(4)有的实验材料必须是新鲜的，放置时间不能过长。如蔗糖本身没有还原性，但如果放置时间过长，蔗糖可能会因被微生物分解，产生还原糖。
命题点(二) 以种子成熟和萌发为素材，考查有机物的检测
3．(2014·广东高考)油菜种子成熟过程中部分有机物的变化如下图所示。将不同成熟阶段的种子匀浆后检测，结果正确的是( )
选项 取样时间 检测试剂 检测结果 A B C D
第10天 第20天 第30天 第40天 斐林试剂 双缩脲试剂 苏丹Ⅲ试剂 碘液 不显色 不显色 橘黄色 蓝色 解析：选C 第10天有可溶性糖，不排除有还原糖的可能，故加入斐林试剂，水浴加热后可能出现砖红色沉淀；种子中一定有蛋白质，加入双缩脲试剂后会出现紫色反应；第30天种子中有脂肪，与苏丹Ⅲ染液发生反应，呈现橘黄色；第40天种子中无淀粉，加入碘液后不会呈现蓝色。
4．(2013·全国卷Ⅰ)某油料植物的种子中脂肪含量为种子干重的70%。为探究该植物种子萌发过程中干重及脂肪含量的变化，某研究小组将种子置于温度、水分(蒸馏水)、通气等条件适宜的黑暗环境中培养，定期检测萌发种子(含幼苗)的脂肪含量和干重。结
果表明：脂肪含量逐渐减少，到第11 d时减少了90%，干重变化如图所示。
回答下列问题：
(1)为了观察胚乳中的脂肪，常用__________________染液对种子胚乳切片染色，然后在显微镜下观察，可见__________________色的脂肪颗粒。
(2)实验过程中，导致萌发种子干重增加的主要元素是______________(填“C ”“N”或“O”)。
(3)实验第11 d后，如果要使萌发种子(含幼苗)的干重增加，必须提供的条件是________和________________。
解析：(1)脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，或被苏丹Ⅳ染液染成红色。(2)该油料植物种子萌发过程中脂肪会转变为糖类，与糖类相比，脂肪中氧含量较低，故导致萌发种子干重增加的元素主要是O。(3)由题中信息可知，到第11 d时，脂肪的含量减少了90%，种子干重继续下降，说明种子贮存的营养物质已经基本消耗殆尽，若要使其干重增加，必须为其提供光合作用所需要的理想条件。由于研究小组将种子置于温度、水分(蒸馏水)、通气等条件适宜的黑暗环境中培养，故要使萌发的种子(含幼苗)干重增加，必须提供的条件是光照和矿质元素离子。
答案：(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 橘黄(或红) (2)O (3)光照 所需的矿质元素离子 [归纳拓展]
种子成熟与萌发时有机物的变化
(1)种子成熟时有机物的变化：
种子成熟时，小分子有机物转化为大分子物质，以便于储存，主要营养物质变化如下： ①可溶性糖类→不溶性糖类(如淀粉)。
②非蛋白质氮→蛋白质。 ③糖类→脂肪。
(2)种子萌发时有机物的变化：
种子萌发时，储存的大分子有机物在酶的作用下水解为小分子物质，作为幼胚生长的营养物质。
①淀粉――→麦芽糖――→葡萄糖。 ②蛋白质――→氨基酸。 ③脂肪――→甘油＋脂肪酸。
1．学习小组选用苏丹Ⅲ染液，使用显微镜检测和观察花生子叶中的脂肪，下列相关叙述错误的是( )
A．原理：脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色
B．步骤：切取子叶薄片→苏丹Ⅲ染液染色→洗去浮色→制片→观察 C．现象：花生子叶细胞中有被染成橘黄色的颗粒 D．结论：脂肪是花生子叶细胞中含量最多的化合物
解析：选D 花生子叶细胞中含有脂肪和水等成分，通过本实验无法得出“脂肪是花生子叶细胞中含量最多的化合物”的结论。
2．在生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的检测实验中，对实验材料的选择，下列叙述错误的是( )
A．可用斐林试剂甲液和乙液、蒸馏水来检测葡萄糖和尿液中的蛋白质 B．花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪检测的理想材料
C．食用花生油最好选用苏丹Ⅳ染液来检测，而一般不选用苏丹Ⅲ染液来检测 D．甘蔗茎的薄壁组织都含有较多糖且近于白色，因此可以用于还原糖的检测 解析：选D 斐林试剂与双缩脲试剂的物质组成相同，只是CuSO4溶液的浓度不同，因此斐林试剂甲液和乙液可用蒸馏水配制成双缩脲试剂；花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪检测的理想材料；苏丹Ⅲ染液可将脂肪染成橘黄色，苏丹Ⅳ染液可将脂肪染成红色，而食用花生油的颜色接近橘黄色，因此最好用苏丹Ⅳ染液检测食用花生油；甘蔗茎的薄壁组织含有较多的蔗糖，但蔗糖属于非还原糖，不能用于可溶性还原糖的检测。
3．某校生物兴趣小组进行了生物组织中还原糖检测的实验(如下图)，下列叙述正确的是( )
脂肪酶蛋白酶淀粉酶
麦芽糖酶
2020版高考生物一轮复习通用版 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（实验课）
