《实验诊断学》实验报告
实验一红细胞计数、白细胞计数
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实验日期: ____________________
2015
一. 实验原理
1. 红细胞计数
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数, 充入计数池中,于显微镜下计数一定体 积内的红细胞数,经过换算求得每升血液中的红细胞数量。
2?白细胞计数
血液经白细胞稀释液稀释,成熟红细胞全被溶解,在显微镜下计数一定体积 内白细胞数,换算出每升血液中白细胞数量。
二. 实验内容与步骤
1. 实验器材
改良Neubauer计数板、显微镜、盖玻片、试管、微量吸管、移液管、洗耳 球、生理盐水、RBC稀释液、WB(稀释液(冰乙酸3ml、蒸馏97ml、10g/L亚甲 蓝溶液3滴混合过滤后备用)
2. 实验步骤
(1)红细胞计数
1、 取红细胞稀释液2.0ml毫升,放入一小试管内。 2、 用微量吸管吸至l0ul处。
3、 擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内,
清液嗽洗吸管2-3次,立即摇匀。
上
4、 将计数池与盖玻片用软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。 5、 用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。
6待3~5分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低
倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数的区域:中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。 计数原则:数上不数下,数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线 (双线) 上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。
计算方式:
RBC/L = 5 个中方格内 RBC 数X 5X 10X 200X 106
=5个中方格内RBC数/100X 1012
参考值: 男性: 女性:
(4.0 ?5.5) X 1012/L (3.5 ?5.0) X 1012/L
(6.0 ?7.0) X 1012/L 新生儿:
(2)白细胞计数
1、 取小试管一支,加白细胞稀释液 0.38ml。
2、 用微量吸管准确吸收末梢血 20ul,擦去管外余血,将吸管插入试管中稀 释液底
部,轻轻将血液放出,并吸取上清液清洗吸管两次,混匀。
3、 待红细胞完全破坏,液体变为棕褐色后,再次混匀后充池,静置2~3min, 待白
细胞下沉。
4、 用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数,对压线细胞按“数上不数 下、数
左不数右”的原则进行计数。
计算方式:
WBC/L = (4 个大方格内 WBC 数/4) X 10 >20 X106
=(4个大方格内 WBC数/20)X 109
参考区间:
成年男性:(3.97~9.15)X 109/L 成年女性:(3.69~9.16 )X 109/L 儿童:(8~10)X 109/L 婴儿:(11~12)X 109/L 新生儿:20 X 109/L
三. 实验结果