寒兰基因组DNA ISSR-PCR反应条件的优化

寒兰基因组DNA ISSR-PCR反应条件的优化

孙小琴;李恩香;贾文杰;彭德镇;孔令杰;杨柏云

【期刊名称】《安徽农业科学》 【年(卷),期】2009(037)029

【摘要】以改良的CTAB法提取的寒兰(Cymbidium kanran Makino)基因组DNA为模板,通过单因子试验建立最适的寒兰的ISSR-PCR反应体系.结果表明,适宜寒兰ISSR-PCR反应体系的扩增条件为:25 μl PCR 反应体积中,1×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl2,300 ng 模板 DNA,200 μmol/L dNTP,1.40 U Taq DNA 聚合酶,0.4 μmol/L 引物.最佳扩增程序为:94 ℃预变性 5 min,然后进行 40 个循环:94 ℃变性 30 s,复性温度根据各引物的Tm值略低1～2 ℃,30 s,72 ℃延伸 50 s,循环结束后 72 ℃延伸7 min. 【总页数】4页(14044-14046,14050) 【关键词】寒兰;ISSR-PCR反应;遗传多样性

【作者】孙小琴;李恩香;贾文杰;彭德镇;孔令杰;杨柏云

【作者单位】南昌大学生命科学学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学学院,江西南昌,330031 【正文语种】中文 【中图分类】S682.31 【相关文献】

1.毛冬青基因组DNA提取方法及ISSR-PCR反应体系的优化 [J], 付铨盛; 卫滢;