四川大学食品生物技术导论2014复习题
段飞霞版本，标红的为今年的考题，题型为名词解释6个三十分，简答题4个四十分，阐述题2个三十分。
一、绪论
1.食品生物技术的基本概念：
食品生物技术是现代生物技术在食品领域中的应用，指以现代生命科学的研究成果为基础，结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果，用全新的手段和方法设计新型的食品和食品原料。
2.食品生物技术研究的内容：
（1）改善农业生产、解决食品短缺
①提高农作物产量及其品质（培育抗逆的作物优良品系、植物种苗的工厂化生产 、提高粮食品质、生物固氮，减少化肥使用量 、生物农药，生产绿色食品 ）
②发展畜牧业生产（动物的大量快速无性繁殖 、培育动物的优良品系 ） （2）食品生产、食品加工、食品检测
（3）提高生命质量、延长人类寿命（开发制造奇特而又贵重的新型药品 、疾病的预防和诊断、基因治疗 ）
（4）解决能源危机、治理环境污染（解决能源危机 、环境保护 ） （5）制造工业原料、生产贵重金属 （制造工业原料 、生产贵重金属 ）
二、基因工程
1.什么是基因工程？优点？
利用重组DNA或扩增技术从工体生物基因组中分理出、或以人工合成的方法取得目的基因，通过一系列切割、加工修饰、拼接等方法产生重组DNA分子，将其转入适当的受体细胞并使重组基因在受体细胞中表达，以获得人类所需要的基因产物。
优点：1.大大缩短育种年限 2.打破常规育种难以打破的物种隔离 2.基因工程的操作步骤？
①用限制性内切酶分离或人工合成目的基因，并制备运载体（质粒、病毒、噬菌体）； ②将目的基因及运载体用DNA连接酶连接组成重组体； ③将重组体导入细胞；
④筛选、鉴定出含有外源目的基因的菌体或个体 3.什么是基因重组？
利用限制性内切酶和其他一些酶类，切割和修饰载体DNA和目的基因，并将两者连接起来。
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主要包括4个步骤：目的基因的分离或制备；外源基因DNA及载体的连接反应；将重组DNA导入受体（宿主）细胞；通过筛选找到理想重组体的受体（宿主）细胞。 4.基因工程研究的理论依据是什么？
①不同基因具有相同的遗传物质 ②基因是可切割和转移的
③多肽及基因存在对应关系，并且有相同的遗传密码 ④基因的遗传信息是可以遗传的 5.什么是反义DNA\\RNA？RNA怎么被沉默？
反义RNA是指有义DNA链转录成的、及特异的靶RNA互补结合并能抑制靶RNA表达的一段序列。
转录产生反义RNA的基因称为反义基因。
反义基因技术是指把一段DNA序列以反义方向插入到合适的启动子和终止子之间，然后把此基因构建体转化到受体细胞中去，通过选择培养获得转化生物体的技术。
RNA沉默的原理：形成双链RNA，在此基础上对目标RNA进行降解。 方法（植物）：直接注射法、农杆菌介导法、病毒诱导基因沉默（VIGS） 6.如何分离目的基因？
（1）酶切法 （2）PCR法 （3）化学合成法
（4）基因组或cDNA文库法
7.什么是基因组文库？
用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA，可以得到大量的基因组DNA片段，然后将这些DNA片段及载体连接，再转化到宿主细菌中去。这样就形成了一个宿主细胞群，每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段，整个宿主细胞群包含基因组的全部基因片段。这样的一个宿主细胞群称为基因组文库。 8.cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些？
（1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列；cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。
（2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响；cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列，因它受发育和调控因子的影响。
（3）基因组文库中的编码基因是真实基因，含有内含子和外显子，而cDNA文库克隆的是不含内含子的功能基因。 9.什么是克隆？
外源基因的无性繁殖，具体指目的基因及载体连接成重组DNA以后，将其导入受体细胞进行扩增和筛选，达到大量的重组分子的过程。 10.常用的基因载体有哪些？有什么特征？
基因工程的载体具备如下特征：
1）能在宿主细胞内进行独立的稳定的DNA自我复制。在外源DNA插入其DNA后，仍能保持稳定的复制状态和遗传特性；
2）易于从宿主细胞中分离，并进行纯化；
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3）在其DNA序列中有适当的限制性内切酶单一酶切位点。
4）具有能够直接观察的表型特征（有报告基因），在插入外源DNA后，这些特征可以成为重组DNA选择的标志。
常见的基因载体有:细菌质粒载体、农杆菌质粒载体、λ噬菌体载体、柯氏质粒载体和植物病毒载体等。
11.用作克隆的质粒满足什么条件？
（1）具有转录复制起始点。 （2）具有抗菌素抗性基因。
（3）具有若干限制酶切单一识别位点。 （4）具有较小的分子量和较高的拷贝数。 12.重组体的筛选及鉴定
①报告基因的检测 ②转基因生物的PCR鉴定
③目的基因分子杂交法（点杂交；Southern(DNA)/Northern(RNA)/Western(蛋白质)吸印杂交；原位（菌落）杂交技术 13.PCR技术的基本原理
PCR亦称多聚酶链式反应，或无细胞分子克隆法。在微量离心管中,加入适量的缓冲液, 微量的模板DNA,四种脱氧单核苷酸,耐热性多聚酶, 一对合成DNA的引物；通过高温变性、低温退火和中温延伸三个阶段为一个循环,每一次循环使特异区段的基因拷贝数放大一倍,一般样品是经过30次循环,最终使基因放大了数百万倍; 扩增了特异区段的DNA带。 14.基因工程在食品工业中的应用？
改造微生物菌种（使啤酒酵母产生α-淀粉酶改良啤酒制作工艺）、改善食物原料品质（改善肉质、减少牛乳中乳糖含量、增加食物中维生素含量）、改良食品加工工艺（果糖）、改良食品风味（甜蛋白、酱油）、利用基因工程生产食品添加剂和功能性食品（将SOD酶导入酵母细胞）
三、细胞工程
1.什么是细胞工程？
是细胞水平上的工程技术。以细胞为基本单位，在离体条件下进行培养或人为的精细操作，使细胞在体外大规模繁殖，细胞的一些生理学特性按照人们的意愿进行改变，从而得到体外生产生物产品的目的。通常认为，细胞工程包括细胞融合、细胞核移植、细胞器移植和组织培养等技术内容。 2.什么是细胞的全能型？
体细胞具有产生完整个体的潜能的特性。
原因是生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。 3.什么是外植体？
外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。
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