医疗器械产品无菌检验操作规程
1 目的 通过无菌检验，确保灭菌后产品能够达到无菌的要求。
2 适用范围 适用于灭菌后医疗器械产品（列举）的无菌检验。
3 检验依据 本厂产品注册标准（编号） EN1174-1996 医疗器械灭菌产品中微生物数量的评
估 《中国药典》（ 2005 年版）
GB14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分：生物试验方法 GB15980-
1995 一次性使用医疗用品卫生标准
4 仪器、设备
百级层流超净工作台、电热干燥箱、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、压力蒸汽灭 菌器、集菌仪（器）、电子天平、
PH计、冰箱、恒温水浴锅、酒精灯、二角烧瓶，接
种环、无菌棉签、镊子，试管架，大试管若干等。
5 无菌检验室的环境要求
5.1 无菌检验应在环境洁净度 10000 级下的局部百级的单向流空气区域内进行。
5.2 缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压，阳性对照室
与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于 检验室的室温应保持 18?26 C,相对湿度：45?65%
10Pa。无菌
5.3 无菌检验室的单向流空气区、 工作台面及环境应定期按 《医药工业洁净室 （区） 悬
浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行悬浮粒子、浮游菌和沉 降菌的监测。每年至少检测一次。
5.4 无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落数：每次操作时
在层流空气所及台面的左中右置
3个营养琼脂平板，暴露 30min,于30?35C培养48
小时，菌落数平均应不超过 1CFU平板。
6 无菌检验前的准备
6.1 器具灭菌、消毒
6.1.1 灭菌：试验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方法灭菌。可经 电热干燥箱160C以上干烤2小时，或置压力蒸汽灭菌器内 121 C蒸汽灭菌30分钟后 使用（根据灭菌效果验证决定灭菌参数）。所有的灭菌物品不应超过 2 周即用毕，否 则应重新灭菌。
6.1.2 消毒：凡检验中使用的器材无法灭菌处理的，使用前必须经消毒处理。如 无菌检验室
的试管架、电子天平、工作台面、工作人员的手、橡胶吸头等。可采用消 毒剂浸泡或擦拭。消毒剂应每月更换，以防止产生耐药菌株。
6.1.3 标识：器具的灭菌、消毒后必须做好标识，标明灭菌、消毒时间和使用有 效期。
6.2 人员、物料进入无菌检验室
6.2.1 开启紫外线灯或臭氧发生器进行空间灭菌处理，消毒时间不得少于 30min。
6.2.2 物料进入无菌检验室流程
6.2.2.1 脱包：进入无菌检验室的物品若有双重包装的，需将外包装在传递窗 / 缓 冲间拆除
后，传入试验室。
6.2.2.2 消毒：进入无菌操作室的所有培养基、供试品等的外表都应采用适用的 方法进行消
毒处理，以避免将外包装污染的微生物带入无菌检验室。
6.2.2.3 传递：查看所有进入无菌检验室的器具上的灭菌、消毒标识，是否在有 效期内。符合
要求的经传递窗传入无菌检验室。
6.2.3 人员进入无菌检验室流程
6.2.3.1
服。
更鞋脱衣：在一更区脱去一般区工作鞋，穿上无菌检验室工作鞋；脱去 一般区工作
6.2.3.2
泡沫。
洗手：首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫， 再用流水连续冲洗 洗净
20 秒，
6.2.3.3 更衣：在二更区按照从上到下的顺序穿戴无菌工作服（包括衣、帽、口 罩等），要
求裤子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹所有头发。
6.2.3.4 手消毒：用消毒液浸泡双手 5 秒以上或用浸过消毒液的棉球擦拭双手 消毒液可用洗
必泰、新洁尔灭、碘伏、 75%酒精等。
6.2.3.5 人员进入：经缓冲间进入无菌检验室。
6.2.4 人员进入无菌检验室后，进一步用消毒液擦拭工作台面，戴无菌手套。
7 无菌检验操作要求
7.1 全过程必须严格执行无菌操作，防止微生物污染
7.2 使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养物扩散。
7.3 所有操作均应在近火焰区进行，且不得有大幅度或快速动作，以免搅动空气 中的尘埃微
粒。
7.4 使用金属接种器具时，用前、用后均需灼烧灭菌。
7.5 在接种培养物时，动作应轻、准，防止培养物溅出，产生汽溶胶，造成污染
7.6 操作过程中所有的带菌物品，用后均应作消毒、灭菌处理。可在检验过程中 随用随时放
入消毒液缸内浸泡或消毒桶内，或在检验完成后经传递窗传至一般区，立 即用压力蒸汽灭菌锅121
C灭菌30分钟。
8 培养基制备
8.1 需气菌、厌气菌培养基（硫乙醇酸盐流体培养基）的制备
8.1.1 所用试剂
酪胨（胰酶水解） 15.0g
葡萄糖 5.0g
L- 胱氨酸 0.5g
硫乙醇酸钠 0.5g
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